Как поменять салонный фильтр на лада гранта: Салонный фильтр лады гранта, замена фильтра своими руками. Салонный фильтр Лада Гранта. Снятие и замена Фильтр салонный лада гранта 16 клапанная

Содержание

когда требуется, как выбрать расходник, последовательность работ

Салонный фильтр – неотъемлемый элемент комплектации большинства автомобилей. Он необходим для очистки воздуха, поступающего в салон снаружи. Если своевременно не осуществить его замену, в поездках вам придется дышать грязным воздухом. Кроме того, возможно ухудшение работы печки и кондиционера. Рекомендуется замена стандартного салонного фильтра Лада Гранта примерно через 10–15 тысяч км пробега. Однако длительная эксплуатация машины в местах с сильной загазованностью или на пыльных дорогах может потребовать более частой замены агрегата.


Вернуться к оглавлению

Устройство и назначение агрегата

Оснащать серийные авто для фильтрации воздуха в салоне начали примерно с 91 года. Изначально их основным элементом была фильтровальная бумага, которая могла улавливать частицы не менее 5 мкм, а вот против токсичных газов была практически бессильна. В середине девяностых европейские автомобили стали массово укомплектовываться салонными фильтрами.

В более продвинутых фильтрующих элементах теперь уже применялся активированный уголь, служащий для поглощения молекул нежелательных газообразных соединений. Сегодня системой салонной фильтрации оснащено абсолютное большинство машин любых марок.

Зона интенсивного автомобильного движения с плотным и медленным транспортным потоком характеризуется повышенной концентрацией токсичных соединений. В таких условиях воздухозаборник почти впритык примыкает к выхлопной трубе движущегося впереди транспортного средства. Превышение неблагоприятных для здоровья веществ может быть здесь десятикратным. Фильтрация загрязненного токсинами воздуха – одна из ключевых функций салонного фильтра. Кроме того, он препятствует попаданию внутрь частиц сажи, пыли и резины, защищая легкие вредного воздействия, а приборную панель и прочие элементы – от загрязнения.

В настоящий момент на рынке представлены два основных вида салонных фильтров.

  1. Простые противопылевые.
  2. Продвинутые угольные.

Обычные фильтрующие элементы производятся из гофрированной бумаги или синтетического волокна и улавливают пыль, сажу и крупную пыльцу. Против мелкофракционных загрязнений они менее эффективны. Синтетический материал может быть наэлектризован, за счет чего происходит не только механическое удержание частиц, но и их притягивание. Дополнительно обработанный хлором расходник также обеспечивает защиту от бактерий.

Устройство синтетического салонного фильтра

Угольные являются усовершенствованным и, соответственно, более дорогостоящим аналогом простых салонных фильтров. Кроме волокон, здесь применяется активированный уголь, выполняющий функцию абсорбента. Это позволяет более эффективно фильтровать воздух, очищая его от большинства вредных веществ. Как правило, они отличаются многослойной структурой, где угольные элементы перемежаются бумагой или синтетикой. Каждый из таких слоев отвечает за фильтрацию тех или иных типов и размеров.

В угольных фильтрах даже сильно загрязненный воздух подвергается многоэтапной очистке и поступает внутрь уже в пригодном для дыхания состоянии.

Принцип работы угольного фильтра


Вернуться к оглавлению

Когда нужно менять устройство

Производитель обычно указывает рекомендуемую периодичность замены фильтров. У LADA Granta это примерно 15 тысяч километров пробега для салонного фильтра (замену воздушного фильтра двигателя Лады Гранта рекомендуют делать реже – через 30 тыс.). Но если машина эксплуатируется в условиях повышенного загрязнения атмосферы пылью или газом, имеет смысл производить процедуру чаще – через 10 тысяч километров. Например, фильтрующий элемент скорее придет в негодность при постоянной езде по пыльным грунтовым дорогам или в городе с интенсивным трафиком и крупными предприятиями. Также на долговечность фильтра влияет его качество, уровень которого, соответственно, отражается на стоимости.

Основные признаки того, что требуется замена:

  • недостаточный приток воздуха в салон;
  • отсутствие свежести;
  • неприятный запах;
  • плохое кондиционирование летом;
  • неудовлетворительный подогрев в зимнее время;
  • запотевающие стекла.

В результате своевременной замены фильтра воздух в салоне станет более чистым и приятным, улучшится работа печки зимой и кондиционера летом. Критическое же загрязнение фильтрующих элементов, кроме всего прочего, приводит к тому, что скапливающаяся в них грязь вместе с влагой создает подходящие условия для развития бактерий, успешно размножающихся в вентиляционной системе. Возможны и негативные последствия технического свойства. Например, в авто с климат-контролем отсутствие нормальной фильтрации может привести к нарушению функционирования воздушной системы и обмерзанию радиатора-испарителя.

Некоторые автовладельцы в целях экономии имеют обыкновение не менять испорченный фильтр на новый, а просто его чистить. Затея это мало конструктивная и даже вредная, поскольку собственноручная очистка не может восстановить нормальные свойства фильтрующих элементов. Особенно это касается фильтров угольного типа, работа которых сопряжена с достаточно сложными молекулярными процессами.

Целесообразнее приобретение другого экземпляра. Тем более что в массе своей они не такие уж дорогие. При этом стоит помнить, что цена зависит в основном от того, из каких материалов изготовлено изделие и его качества. Простой пылевой фильтр улавливает в основном пыль, тогда как угольный – не только ее, но и газы.

Если точно марка изделия вам неизвестна, спросите в магазине салонный фильтр для Лады Гранта. Также подойдет и аналогичный для Калины, поскольку они взаимозаменяемы. Можно купить фильтрующую часть без пластикового корпуса, использовав старый и немного сэкономив на этом.


Вернуться к оглавлению

Расположение и правильная замена

Поменять салонный фильтр LADA Granta по силам любому автомобилисту собственными руками, без обращения в сервис. Операция эта довольно несложна и требует минимального количества времени. Для ее осуществления вам будет нужен новый агрегат и две отвертки: крестовая и TORX Т20.

 

Салонный фильтр (он же фильтр системы вентиляции) находится под правой пластиковой накладкой под ветровым стеклом у всех типов Лада Гранта, будь то седан или лифтбек, комплектация 8 клапанов или же 16 клапанов. Если автомобиль только что был на ходу, для начала следует открыть капот и подождать, пока горячий двигатель остынет. Затем поднять дворники в вертикальное положение, при помощи отвертки (или ключа) TORX Т20 открутить и снять накладку.

Далее посредством крестовой отвертки откручиваем пластиковый кожух. Снимаем его, открывая доступ к требующему замены испорченному фильтру.

Теперь аккуратно, стараясь ничего не поломать, производим снятие старого фильтра и заменяем его на новый.

Собственно фильтрующий элемент содержится в прямоугольном пластиковом корпусе (рамке). Если только что купленное устройство у вас без корпуса, удаляем прежнее из рамки, ставим туда новое и помещаем на место.

Салонный фильтр – обязательный элемент для поддержания благоприятной атмосферы внутри авто. Он требует своевременной замены, исходя из его состояния, а не из ориентировочных рекомендаций изготовителя или знатоков в интернете. Выбирая фильтр, лучше обратить внимание на более дорогие изделия авторитетных брендов.

Погоня за низкой ценой в данном случае – это экономия на своем здоровье.

Как поменять салонный фильтр на Лада Гранта

avtorin

141 Просмотров0 Лайк

avtorin

20 Просмотров0 Лайк

avtorin

25 Просмотров0 Лайк

avtorin

17 Просмотров0 Лайк

avtorin

6 Просмотров0 Лайк

avtorin

8 Просмотров0 Лайк

avtorin

4 лет назад

2 Просмотров0 Лайк

avtorin

126 Просмотров0 Лайк

avtorin

18 Просмотров0 Лайк

avtorin

44 Просмотров0 Лайк

avtorin

8 Просмотров0 Лайк

avtorin

30 Просмотров0 Лайк

где находится, замена — Все о ремонте авто

Лада Гранта — замена фильтра системы отопления и вентиляции — журнал За рулем

На автомобиле Лада Гранта замену фильтра системы отопления и вентиляции (салонного фильтра), а также прочистку дренажного отверстия водоотводящего короба проводим в соответствии с регламентом технического обслуживания — через каждые 15 тыс. км пробега.

При эксплуатации автомобиля в запыленной местности пробег между заменами фильтра следует сократить в 1,5–2 раза.

Фильтр системы отопления и вентиляции и дренажное отверстие водоотводящего короба расположены под правой облицовкой ветрового окна.

2279-4-16-01 (Копировать)

Открыв капот ключом Torx T-20, отворачиваем пять саморезов крепления правой облицовки.

Открыв капот ключом Torx T-20, отворачиваем пять саморезов крепления правой облицовки.

Открыв капот ключом Torx T-20, отворачиваем пять саморезов крепления правой облицовки.

2279-4-16-02 (Копировать)

Снимаем правую облицовку ветрового окна.

Снимаем правую облицовку ветрового окна.

Снимаем правую облицовку ветрового окна.

2279-4-16-03 (Копировать)

Крестообразной отверткой отворачиваем два самореза крепления крышки.

Крестообразной отверткой отворачиваем два самореза крепления крышки.

Крестообразной отверткой отворачиваем два самореза крепления крышки.

2279-4-16-04 (Копировать)

Снимаем крышку фильтра.

Снимаем крышку фильтра.

Снимаем крышку фильтра.

2279-4-16-05 (Копировать)

Отжав две защелки…

Отжав две защелки…

Отжав две защелки…

2279-4-16-06 (Копировать)

…вынимаем фильтр отопления и вентиляции.

…вынимаем фильтр отопления и вентиляции.

…вынимаем фильтр отопления и вентиляции.

2279-4-16-08 (Копировать)

Прочищаем дренажное отверстие со стороны водоотводящего короба…

Прочищаем дренажное отверстие со стороны водоотводящего короба…

Прочищаем дренажное отверстие со стороны водоотводящего короба…

2279-4-16-09 (Копировать)

…и со стороны ниши правого переднего колеса.

…и со стороны ниши правого переднего колеса.

…и со стороны ниши правого переднего колеса.

Устанавливаем новый фильтр в обратной последовательности.

2279-4-16-07 (Копировать)

При этом стрелка на этикетке фильтра должна быть направлена вниз, а надпись «перед» — к передней части автомобиля.

При этом стрелка на этикетке фильтра должна быть направлена вниз, а надпись «перед» — к передней части автомобиля.

При этом стрелка на этикетке фильтра должна быть направлена вниз, а надпись «перед» — к передней части автомобиля.

2279-4-16-10 (Копировать)

При установке правой облицовки ветрового окна два выступа облицовки должны зайти за отбортовку переднего крыла.

При установке правой облицовки ветрового окна два выступа облицовки должны зайти за отбортовку переднего крыла.

При установке правой облицовки ветрового окна два выступа облицовки должны зайти за отбортовку переднего крыла.

[14 операций по техобслуживанию Lada Granta, которые помогут вам сэкономить]

[Как сэкономить на плановом ТО Lada Granta] [Техническое обслуживание Lada Granta на 2,5 тыс. км пробега] [Техническое обслуживание Lada Granta на 15 000 и 105 000 км пробега] [Техническое обслуживание Lada Granta на 30 000 и 60 000 км пробега] [Техническое обслуживание Lada Granta на 45 тыс. км пробега] [Техническое обслуживание Lada Granta 75 тыс. км пробега] [Техническое обслуживание Lada Granta на 90 тыс. км пробега] [Самостоятельное проведение ТО — общие рекомендации] [Правила техники безопасности при самостоятельном проведении ТО] [Инструмент, необходимый для проведения техобслуживания Lada Granta] [Лампы, применяемые в автомобиле Lada Granta]

Салонный фильтр для Лада Гранта

✅ САЛОННЫЙ фильтр для Лада Гранта (LADA Granta). Как ЗАМЕНИТЬ, где купить, цены, обзор — NORDFIL

Салонный фильтр Лада Гранта

✅ Вся информация о САЛОННОМ фильтре для Лада Гранта (LADA Granta). Обзор применяемости, как заменить, аналоги, характеристики, как он сделан, где купить, цены.

 

 

NORDFIL CN1115 и CN1115K

 

  • Подробный видеообзор
  • Инструкция «Как заменить»
  • Применяемость, аналоги, оригинальный номер, размеры
  • Характеристики и надежность
  • Как и из чего сделан
  • Где купить по хорошей цене в розницу и оптом
  • Отзывы

Видеообзор салонного фильтра на LADA Granta

Содержание

0:05 Применяемость фильтра по моделям Лада Гранта
0:42 Общий обзор
1:25 Как определить, что в угольном салонном фильтре материал установлен правильно
3:20 Как узнать точное положение фильтра при установке
3:43 Особенности фильтровального материала в угольных салонных фильтрах и его плотность
4:23 От каких загрязнений защищает угольный салонный фильтр и обычный противопыльный
5:12 Особенности корпуса салонных фильтров
5:31 Реальный ресурс салонных фильтров

 

Применяемость, модельный ряд

 

  • GRANTA (2190) 1. 6, г.в. 11 ⇒
  • GRANTA (2190) 1.6, г.в. 11 ⇒
  • GRANTA (2190) 1.6, г.в. 11 ⇒
  • GRANTA (2190) 1.6, г.в. 13 ⇒
  • GRANTA (2349) 1.6, г.в. 11 ⇒

 

Аналоги CN1115 И CN1115K

 

  • 1A FIRST AUTOMOTIVE C30454
  • 20 BAP421
  • ALCO FILTER MS6405
  • BIG GB-9831
  • BIG FILTER GB9831C
  • BIG FILTER GB9831
  • BM FA1118
  • BM FA2123
  • BOSCH 1 987 432 230
  • BOSCH 1987432230
  • BOSCH 1 987 432 243
  • BOSCH 1987432243
  • BOSCH M2230
  • CHAMPION CCF0419C
  • CHAMPION CCF0419
  • CORTECO CC1313
  • CORTECO 80000998
  • CORTECO CP1313
  • CORTECO 80000999
  • DELPHI TSP0325329
  • DELPHI TSP0325329C
  • DENCKERMANN M110888
  • EKOFIL ЕКО-04.05
  • FILTRON K1229
  • GOODWILL AG921CF
  • GOODWILL AG 920 CF
  • GOODWILL AG 919 CFC
  • HENGST FILTER E4906LI
  • HOFFER 17559
  • LYNXauto LAC-1906
  • LYNXauto LAC-1906C
  • MAHLE LA933
  • MAHLE ORIGINAL LA933
  • MANN-FILTER CU26004
  • MANN-FILTER CU 26 004
  • MEAT & DORIA 17559
  • MISTRAL AVF1801
  • MULLER FILTER FC454
  • NAC 7765CH
  • NAC 77325ST
  • NAC 77325CH
  • NAC 7773ST
  • OE LADA11188122010
  • OE LADA111808122010
  • OE 11188122010
  • PILENGA BMFA1118
  • PILENGA FAP2123
  • PILENGA BMFA2123
  • PILENGA FAP1118
  • QH Benelux WP2000
  • SAKURA Automotive CA-25050
  • SCT Germany SA1150
  • SCT Germany SAK150
  • SCT Germany SAK150
  • SCT Germany SA 1150
  • SIVENTO G767
  • SIVENTO P767
  • UNIFLUX FILTERS XC562
  • VEMO V28300001
  • WEBASTO 82D0325329CA
  • WEBASTO 82D0325289CA
  • WEBASTO 82D0325329A
  • WIX FILTERS WP2000
  • Zekkert IF3255K
  • Zekkert IF3255
  • Невский фильтр NF6003

 

Сравнительные номера

 

  • LADA 1118-0812-201-00-00
  • LADA 1118-08122-010-00
  • LADA 1118-8122-010
  • Штрих код (EAN) 40 11558 01309 7

 

Оригинальные размеры фильтра NORDFIL CN1115 и CN1115K, мм

 

Замена фильтра салона на Лада Гранта.

ВИДЕО

Мы подготовили для вас исчерпывающую видеоинструкцию по замене салонного фильтра на автомобиле Лада Гранта, после просмотра которой вы сможете сделать это своими руками даже с закрытыми глазами

Преимущества салонного фильтра NORDFIL


для Лада Гранта

 

Тщательная очистка воздуха

В салонных фильтрах NORFIL используются такие же по качеству фильтрации материалы, что и в оригинальных фильтрах. Фильтры проходят сертификацию.

 

Точные размеры и стабильная геометрия

Фильтры NORDFIL созданы по проектам оригинальных салонных фильтров, поэтому они легко устанавливаются и не теряют своей формы в процессе эксплуатации.

 

Соответствие требованиям автопроизводителей

Мы производим фильтры очистки воздуха салона на высокоточном оборудовании по оригинальным технологиям, ориентируясь на требования автопроизводителей.

 

Большой ресурс и выносливость

Для достижения максимально возможного ресурса в салонных фильтрах NORDFIL используется оптимальное количество фильтровальных материалов.

Фильтр сертифицирован

Оцените информацию

Средняя оценка :

Голосов :

Рассказать друзьям

 

У нас вы можете заказать автомобильные фильтры под вашей торговой маркой. Звоните +7 (812) 327-72-16

Салонный фильтр Лада Гранта где находится: фото и видео

Автомобиль: Лада Гранта.
Спрашивает: Некипеллов Павел.
Вопрос: Где находится салонный фильтр на автомобиле Лада Гранта?


Купил Гранту с рук. Состояние не плохое, но с воздуховодов дует грязный воздух. Машина постояла день под тополями, включил печку, а на меня полетел пух и семечки тополиные. До этого у меня была старенькая Тойота, там салонный фильтр находится в бардачке, а тут я его в нём не нашел. Такое ощущение, что у меня вообще этот фильтр не установлен.

Местонахождение салонного фильтр на Лада Гранта

The following two tabs change content below.

Эксперт по автомобилям Лада с многолетним стажем. Владею автомобилем Лада Гранта, собираю корч на базе «Приоры».

Иногда остаюсь с ночёвкой в гараже. Моя жена к автомобилям ревнует меня больше, чем к женщинам.

На рисунке видно расположение пластиковой заглушки под которой установлен салонный фильтр, также отмечено, какие болтики необходимо открутить

Фильтр находится под капотом слева (ближе к пассажиру). Между моторным отсеком и лобовым стеклом. Закрыт он декоративной заглушкой (пластмассой). Подробнее о замене салонного фильтра здесь.

Так выглядит болт крепления torx

Почему может отсутствовать фильтр?

Салонный фильтр устанавливается на всех автомобилях Лада Гранта не зависимо от его комплектации. Я встречал некоторые модели комплектации стандарт, в них салонного фильтра не было, но это были самые первые «пилотные» версии.

В вашем случае возможен вариант, что перед продажей салонный фильтр изъяли из автомобиля. Фильтр мог испортиться и «завоняться», в результате чего, стёкла на автомобиле будут сильно потеть. А зачем покупать новый фильтр, если автомобиль продаётся?

Артикулы фильтра для замены

Один из самых популярных заменителей оригинального салонного фильтра

Грантоводы с нашего сообщества рекомендуют для замены фильтр от Калины. Он дешевле и по качеству исполнения не уступает оригинальному. Его артикул: 1118-8122010-01.

Лада Гранта замена салонного фильтра

Салонный фильтр является неотъемлемой частью системы вентиляции и отопления. Здесь рассмотрим технологию замены данного фильтра в модели Лада Гранта, оснащение которой предусматривает присутствие кондиционера. Эта процедура будет знакомой той категории владельцев, которые ранее сталкивались с ней в модели Приора.

Как произвести замену фильтра?

Многие задаются вполне обыденным вопросом, с какой периодичностью производится замена салонного фильтра и для чего необходима эта процедура? Заводом рекомендуется склоняться к замене фильтрующего элемента по истечении каждых 30 тыс. км. Практическая эксплуатация свидетельствует о сокращении данного регламентного периода до 5-7 тыс. км. Если автомобиль бороздит загрязненные дороги, то периодичность следует корректировать с учетом индивидуальных особенностей эксплуатации. В виде главных сигналов о возникновении потребности в рассматриваемой нами процедуре выступает ухудшение функционирования печки или появление «из неоткуда» грязного воздуха внутри салонного пространства Лада Гранта.

Счастливых обладателей Лада Гранта, чье оснащение предусматривает наличие полезной системы кондиционирования, кроме непосредственной замены фильтра, волнуют моменты, касающиеся достаточности фреона в контуре, даты его замены, температуры и степени очистки подаваемого в салон воздуха. На последние два аспекта оказывает влияние фильтрующий элемент.

Важность процесса замены сложно переоценить, поскольку фильтр «беспокоится» о здоровье передвигающихся в автомобиле Лада Гранта людей. Это связано с постепенным загрязнением фильтрующего вкладыша, со временем становящегося рассадником вирусов и грибков. Своевременная замена салонного фильтра предотвращает данный процесс.

Как поменять фильтр в салоне. Процедура подразделяется на такие последовательные этапы:

  • непосредственная подготовка;
  • обеспечение доступа к месту нахождения;
  • демонтажные манипуляции с отработанным фильтром;
  • установка нового компонента.

Замена

  1. После открытия капота LADA Granta с помощью крестообразной отвертки откручиваем два винта, располагающиеся на поверхности утеплительного материала кузова.
  2. Место расположения фильтра – непосредственно за двигателем. Элемент зафиксирован в вертикальной позиции.
  3. Для обеспечения свободы в доступе отодвигаем уплотняющую резинку и отводим патрубок вакуумного усилителя (является помехой в момент обратной установки фильтра).
  4. После смещения шумоизолирующего материала обеспечивается доступ к пластиковой крышке элемента. Она снимается посредством размыкания присутствующей защелки.
  5. Извлекаем фильтр из пазов, потянув за специальный «язычок».
  6. В момент монтажа элемента предполагается его незначительное сжатие (для удобства).

Важно! Фильтр устанавливается только в одном положении, о чем на соответствующей боковой части сигнализирует нанесенная метка в виде надписи со стреловидным логотипом.

Итак, теперь вы знаете, как поменять фильтр.

Когда менять ремень ГРМ на Лада Гранта 8 клапанная

Лада Гранта замена ремня грм

Замена ремня ГРМ Лада Гранта 8 клапанов

Вывод

Замена салонного фильтра на отечественной LADA Granta выглядит весьма просто. Если воспользоваться отверткой с указанным профилем наконечника, то вся «операция» потребует не более 15 минут временного ресурса. Моментом, требующим небольшой концентрации внимания, послужит установка «свежего» фильтра в предназначенное место. Это связано с обеспечением достаточности пространства для доступа.

Своевременно заменяйте салонный фильтр в LADA Granta, не пренебрегая рекомендацией выполнять эту процедуру не реже одного раза за полугодие. Это позволит достичь завидной чистоты воздушной среды в салоне и исключить появление неприятных сюрпризов в работе такого сложного узла, как система кондиционирования.

Где находится фильтр салонный на Лада Гранта Спорт

Замена салонного фильтра Лада Калина 2 поколения

На главную Замена салонного фильтра. Для работы потребуется короткая крестообразная отвертка, шлицевая отвертка и ключ » Torx T «. Для снятия облицовки необходимо извлечь две пробки-заглушки, закрывающие доступ к головкам винтов крепления.

Делаем это при помощи шлицевой отвертки. Ключом Torx отворачиваем 2 винта крепления.

Вместо ключа Torx можно использовать отвертку со сменными битами. Открыв капот, откручиваем еще три винта крепления. Аккуратно снимаем правую облицовку ветрового стекла.

Смотрите также: Ремень ГРМ на гранту 8 клапанов ВАЗ цена

Сделать это можно двумя способами: при открытом капоте потянуть вниз, либо при закрытом капоте и поднятой щетке ветрового стекла, перемещая сначала вправо, а затем вверх. При извлечении не прилагайте больших усилий, чтобы не повредить пластиковых деталей облицовки. Перед открытием капота не забудьте вернуть в исходное состояние щетку ветрового стекла.

Рекомендуем: Литые диски на Лада Веста в Нижнем Новгороде

Крестообразной отверткой отворачиваем винт крепления трубки омывателя и два винта крепления крышки, под которой находится фильтрующий элемент. Извлекаем крышку, перемещая ее сначала вправо, выводя из зацепления, а затем потянув вверх.

Проем, через который происходит снятие крышки, имеет острые края.

ВИДЕО: Замена топливного фильтра на Ладе Калине и Гранте

Процесс замены

Таким образом, замена расходника выполняется либо согласно регламенту, либо после визуального осмотра.

Инструменты

Для проведения процедуры необходимо подготовить рабочий инструмент и расходный материал:

  • отвертку TORX Т20;
  • крестовую отвертку;
  • пылесос или компрессор;
  • расходный материал.

Инструменты для выполнения процедуры

Чтобы избежать вероятности покупки подделки, следует приобретать оригинальный расходный материал. Его стоимость выше, но зато он и прослужит гарантированный срок. Оригинальные номера на Лада Гранта для противопылевого фильтрующего элемента — 11180-8122010-82, для угольного — 11180-8122010-83.

 Загрузка …

Этапы

Замена салонного фильтра Лада Гранта состоит из следующих шагов:

  1. Для проведения процедуры необходимо открыть капот и дать остыть двигателю.
  2. Очистители стекла следует поставить вертикально.
  3. Далее необходимо открутить с помощью отвертки TORX Т20 пластиковую накладку на лобовом стекле, через которую поступает воздух.

    Снятие пластиковой накладки

  4. Затем следует снять пластиковую защиту. Для этого крестовой отверткой нужно выкрутить саморезы, которые удерживают защитный кожух.
  5. Далее необходимо извлечь рамку вместе с фильтрующим материалом, который нужно вытащить из рамки, отогнув два фиксатора.

    Рамка со старым расходником

  6. Перед установкой нового изделия следует почистить пылесосом или компрессором место, где стоял старый элемент.
  7. На новый расходник следует одеть рамку и поставить его на штатное место. При установке нового элемента следует обратить внимание, чтобы он устанавливался по направлению воздушного потока. Направление потока воздуха часто указано стрелочкой на расходнике.
  8. Затем нужно прикрутить назад пластиковую защиту фильтра, накладку лобового стекла и поставить, как положено, дворники.

На этом замена фильтрующего элемента на Лада Гранта своими руками закончена. Процедура несложная и может быть выполнена любым водителем, поэтому нет смысла ехать в автосервис. Таким образом, можно сэкономить время и деньги.

Видео от Darius Stone «Замена фильтра салона на Лада Гранта»

В этом видео демонтируется, как поменять салонный фильтрующий элемент салона на Лада Гранта.

Замена салонного фильтра на Ладе Гранта

Система вентиляции входит в базовую комплектацию практически на всех автомобилях и подразумевает под собой работающий салонный фильтр. Lada Granta комплектуется подобным устройством с самой первой модели 2001 года выпуска.

Салонный фильтр необходим для того, чтобы фильтровать и очищать поступающий воздух в салон автомобиля. Многие автовладельцы не уделяют должного внимания уходу за этой деталью, но ее замена необходима так же, как и смена воздушного фильтра.

Сроки замены салонного фильтра

Замена салонного фильтра на Ладе Гранта необходима для того, чтобы внутри автомобиля циркулировал чистый воздух, пассажиры не дышали пылью и бактериями, которые могут размножаться внутри самой запчасти и чтобы печка функционировала в нормальном режиме.

Производители настаивают на том, чтобы проводить процедуру смены фильтрации раз в 25-30 тысяч км пробега — так же, как, например, на Ладе Калина. Если автомобиль не подвергается пылевому загрязнению, то производить замену следует реже. Но если машина эксплуатируется на грунтовых дорогах, то снимать салонный агрегат придется каждые 5 тысяч км. Однако, согласно регламенту завода-автоконцерна, снимать старый агрегат и ставить новый на Гранте необходимо раз в 5-7 тысяч км пробега. Если автомобиль интенсивно используется и эксплуатируется в тяжелых погодных условиях, замена салонного фильтра на Гранте может осуществляться раньше установленных сроков.

На автомобилях Lada, где в комплектации предусмотрена система кондиционирования, при смене салонного фильтрующего элемента могут рекомендовать произвести проверку и системы отопления. В кондиционер должен поступать чистый воздух, поэтому дополнительно может потребоваться смена фильтра отопления. Если при включении печки в салон поступает неприятный запах и пыль, необходимо срочно произвести соответствующий частичный или полный ремонт.

Расположение фильтра в Ладе Гранта

Чтобы приступить к работе с системой вентиляции, необходимо знать место расположения салонного фильтра. Главный расходник в LADA расположен под капотом с левой стороны от водительского сиденья. Практически под лобовым стеклом, в самом верхнем углу, расположен защитный короб, в котором располагается главный элемент.

Он практически такой же формы, как и воздушный, но его волокна состоят из поролона. Расстояние между волокнами составляет 2-3 мм. Чтобы подобраться к салонному фильтру Лады Калина, необходимо открутить защиту ветрового стекла, а само посадочное место идентично Ладе Гранта.

Основные признаки грязного фильтра:

  • обильный конденсат на лобовом и боковых стеклах внутри салона даже при пасмурной погоде;
  • присутствие неприятного, гнилого запаха при закрытых стеклах.

В первом случае замену необходимо производить в кратчайшие сроки, так как главный элемент полностью забит грязью и пылью. Неприятный запах свидетельствует о том, что в самом устройстве уже начали образовываться микробы и бактерии, которые также негативно влияют на работу системы вентиляции.

Подготовка к замене

На Гранте замена салонного фильтра часто осуществляется в течение пяти минут. Чтобы приступить к ремонту, понадобится крестовая и торцевая отвёртки, фигурная отвёртка и новый фильтр.

Индекс новой салонной фильтрации — 1118 8122010-01. Также можно сменить на фильтр от Лады Калина — 11180 8122010 — 82. Альтернативный вариант — Conterno 80000990 с угольной основой. Главное условие его применения — эксплуатация автомобиля в городской среде.

Также подходит для моделей Лада Лифтбек, Гранта 2007-2010 года выпуска с установленным кондиционером. Поскольку угольная основа наилучшим образом фильтрует поступающий воздух в вентиляцию и систему отопления.

Процесс замены салонного фильтра

Ниже представлен пошаговый процесс ремонта на Lada Granta:

  • отодвинуть резиновый уплотнитель капота и шланги вакуумного усилителя;
  • крестовой отверткой открутить 5 винтов на защитной крышке. Их расположение — между лобовым стеклом и моторным отсеком;
  • извлечь защитную декоративную крышку;
  • открутить болты крепления защитной крышки воздухофильтра и снять ее. Понадобится фигурная отвертка;
  • нажать на два крепления и извлечь старый салонный агрегат;
  • очистить короб от пыли и грязи;
  • установка нового фильтра поролоновой стороной вниз;
  • защелкнуть крепление;
  • произвести установку в обратном порядке.

Некоторые модели фильтрации необходимо согнуть при установке. Замена на Ладе Калина можно производить аналогичным образом, но имеются некие отличия. Ветровая защита и трубка омывателя — чтоб открутить защитную крышку устройства нужна отвёртка и работа с двумя винтами.

Замена салонного фильтра Гранты Лифтбек производится в такой же последовательности:

  • открутить саморезы на пластиковой накладке вдоль лобового стекла. Для работы взять отвёртку Т20;
  • выкрутить болты крепления кожуха и снять его;
  • заменить агрегат в обратной последовательности.

В некоторых случаях производить смену фильтрации можно без оригинального устройства. Важно: главный элемент придется присадить на старую рамку и вставить в кожух. Мануал Гранта Лифтбек указывает, как часто требуется ремонт — раз в год или каждые 7 тысяч км пробега. Главное условие оптимальной работы системы вентиляции и отопления — своевременная смена салонного устройства.

Где фильтр печки на гранте. Салонный фильтр Лада Гранта. Необходим инструмент для самостоятельной замены

Начиная с самой простой комплектации Лада Грант, в автомобиле установлен салонный фильтр. Быстро загрязняется, особенно при движении по пыльным дорогам. Проверить его состояние несложно, для этого включите обдув на максимальной 4-й скорости и следите за соплами воздуховодов. Если оттуда стали вылетать частички пыли и грязи — фильтр пора менять.

Для замены нам понадобятся две отвертки — крестовая и специфическая TORX T20.

Итак, приступим. Откройте капот машины. Возле лобового стекла есть пластиковая накладка, которую нам нужно удалить. Для этого откручиваем винты «Т20», которые отмечены на фото. Для удобства перед ним поверните дворники в вертикальное положение.

Затем снимите пластиковую накладку и отложите ее в сторону.

После снятия кожуха и там наш салонный фильтр.

Фильтр был в ужасном состоянии (через 5 с небольшим тысяч км пробега).

Он вставляется в рамку, из которой он должен будет выдавать. Покупаем новый салонный фильтр от Лада Калина. Обозначение в каталоге: 11180-8122010-82.

Одеваем на него рамку от старого фильтра.

Установите фильтр в порядке, обратном снятию.

Вот и все! Наслаждайтесь чистым воздухом в салоне нашей Lada Grant.

Салонный фильтр Относится к системе отопления и вентиляции в автомобиле.Речь пойдет о его замене, идущей в комплектации с кондиционером. Тем, кто уже успел освоить такую ​​операцию на приоре (с кондиционером), эта установка покажется знакомой.

Установка фильтра на Лада Грант с кондиционером

Многих волнует, как часто рекомендуется салонный фильтр и зачем он нужен. Каждые 30 000 км производитель рекомендует его заменять. Но на практике это необходимо делать за 5-7 тысяч км, так как его загрязнение напрямую зависит от того, по каким дорогам вы ездите.Сигналом к ​​этому может быть плохо работающая печка или грязный воздух, непонятно куда в салон.

Если вы счастливый обладатель автомобиля с кондиционером, вас должен интересовать не только вопрос о дате последней замены фреона. Важно и какой воздух подается в салон автомобиля, какой температуры и чистоты. На эти 2 параметра как раз влияет система отопления и вентиляции. Его замена — важный элемент в обслуживании любимой машины. Вспомните, как ваш уже давно установлен.Как проходит замена салонного фильтра Лады Грант? Всю процедуру можно разделить на такие основные этапы:

  • подготовка к работе;
  • доступа;
  • замена на новый.

После того, как капот открыт, нужно открутить 2 винта крестовой отверткой. Они находятся на утеплителе корпуса. Сам фильтр находится за двигателем и крепится в вертикальном положении. Для облегчения доступа можно заранее сдвинуть уплотнительную резинку и взять шланг вакуумного усилителя.Особенно мешает обратная установка.

При перемещении будет доступна пластиковая крышка элемента. Имеет защелку, после открытия которой крышка снимается. А сам фильтр вытаскивается за язычок из пазов. Надо будет отогнуть на штатное место. В зависимости от типа фильтра он может легко сгибаться с усилием. Важно, с какой стороны ставить фильтр. Поэтому на его боковой части есть соответствующая отметка — надпись со стрелкой.

Замена салонного фильтра Лада Грант не кажется сложной. Вооружившись крестовой отверткой, вы сможете выполнить всю работу за 10 минут. Отдельное внимание стоит уделить установке устройства на свое место. Здесь нужно проявить некоторую сноровку. На этом этапе помогут меры по обеспечению беспрепятственного доступа: шланг вакуумного усилителя, а также убогая уплотнительная резинка.

Максимально соблюдаемый салонный фильтр современных автомобилей вне зависимости от страны и фирмы производителя. Лада Грант тоже оснащается таким фильтром начиная с базовой комплектации. Этот фильтр необходим для фильтрации воздуха, поступающего в салон автомобиля извне. Если вовремя не заменить, печка может плохо заработать, воздух, поступающий в салон, не будет очищаться, а водитель и его пассажиры будут дышать мелкими частицами пыли и бактериями, размножающимися на поверхности фильтра.

Производитель рекомендует менять салонный фильтр Лада Грант каждые 5-7 тыс. Км. Однако, если вам часто приходится ездить по пыльным дорогам или пересеченной местности, рекомендую заменить дедлайн раньше указанного срока.Если однажды включив печку, вы увидели, что из воздуха идет пыль или неприятный запах — это сигнал к замене салонного фильтра.

Замена салонного фильтра Лада Грант — Пошаговая инструкция с фото

Для работы понадобится всего два инструмента:
  1. крестовая отвертка;
  2. Отвертка Torx T20;
  3. Новый салонный фильтр Гранта или.

Начнем !?

1. В первую очередь необходимо открыть и дать двигателю остыть.

2. Поднимите вертикальное положение.

4. Теперь возьмите крестовую отвертку и открутите два винта, которыми крепится пластиковая крышка салонного фильтра.

5. Снимите кожух, после чего вы увидите салонный фильтр, который вам нужно будет заменить.

6. Отдайте рамку фильтра вместе с самим фильтром и удалите старый фильтр из рамки.

7. Салонный фильтр на гранту не нашел поэтому взял салонный фильтр от Лады Калины.Наденьте на него рамку от старого фильтра и установите следующую услугу.

А так выглядел старый салонный фильтр:

На этом замена салонного фильтра Лада Грант заканчивается. Спасибо за Ваше внимание. Надеюсь, у вас все получилось !? Перед новыми встречами на сайте своими руками.

& nbsp.

DIY Авто Замена воздушного фильтра салона

Заявление об ограничении ответственности: некоторые ссылки на этой странице являются партнерскими. Мы можем получить комиссию, если вы совершите покупку по этим ссылкам.Смотрите наш полный отказ от ответственности здесь.

Если вы похожи на большинство американцев, ваша машина — одно из самых ценных вложений. Как и любому другому активу, очень важно уделять ему должное внимание и заботу, чтобы убедиться, что потраченные вами деньги и дальше будут приносить вам доход от ваших инвестиций. В этом случае выполнение нескольких простых задач дома поможет ему оставаться надежным средством передвижения на долгие годы; Одна из первых задач, которую решают многие автовладельцы, — это замена воздушного фильтра салона.

Насколько легко заменить воздушный фильтр?

В то время как большинство владельцев автомобилей узнали о необходимости замены воздушного фильтра двигателя автомобиля, другой воздушный фильтр в вашем автомобиле часто забывают. Подумайте о том, как ваша домашняя система HVAC помогает удалять грязь, пыль, пыльцу и загрязняющие вещества из внешнего воздуха до того, как он попадет в ваш дом. Ваш салонный воздушный фильтр работает примерно так же.

Частота замены салонного воздушного фильтра зависит от производителя; как правило, воздушные фильтры салона следует менять один раз в год или каждые 7500 миль.Хотя это может показаться относительно частой задачей, замена воздушного фильтра салона — одна из самых простых задач, которые вы можете выполнить при техническом обслуживании автомобиля — проще, чем замена масла. В большинстве случаев все, что требуется, — это быстро снять перчаточный ящик или зону под приборной панелью, чтобы получить доступ к фильтру за его пределами.

Экономия затрат на замену салонного воздушного фильтра своими руками

В то время как ваш любимый механик, безусловно, способен заменить воздушный фильтр в салоне, их время, труд и необходимые детали потребуют значительных затрат.В зависимости от вашего региона и модели автомобиля механики иногда берут до 100 долларов за запчасти и работу. Если учесть тот факт, что базовая стоимость воздушного фильтра салона составляет всего 15 долларов, вы обнаружите, что, как и во многих простых задачах по обслуживанию автомобилей, стоимость покупки воздушного фильтра салона AutoZone и небольшое количество времени, которое вы потратите установка того стоит.

Другая форма экономии, которую вы получите, регулярно заменяя воздушный фильтр салона, — это долгосрочное здоровье вашего автомобиля.Если не решить проблему замены воздушного фильтра салона должным образом, это может привести к появлению затхлого запаха и пыли в салоне вашего автомобиля, а повышенная влажность, вызванная старым фильтром, может привести к поломке системы HVAC вашего автомобиля. Чтобы избежать дорогостоящего ремонта и сохранить ценность вашего автомобиля, важно заменить воздушный фильтр салона в соответствии с рекомендациями.

Дополнительная рекомендуемая литература: Найдите более дешевую альтернативу оплате замены масла Walmart и ознакомьтесь с нашим Руководством по замене масла своими руками

Семь шагов по замене воздушного фильтра

Научиться менять воздушный фильтр салона можно за несколько минут в приятный выходной день.Однако сначала проверьте руководство по эксплуатации вашего автомобиля, чтобы определить подходящую модель воздушного фильтра для вашего автомобиля. Кроме того, посещение надежного интернет-магазина автозапчастей позволит вам ввести технические характеристики вашего автомобиля, чтобы определить, какая часть вам подходит.

После того, как у вас будет в руках нужный салонный воздушный фильтр, выполните следующие простые шаги, чтобы заменить его:

  1. Собери инструменты

    К счастью, вы можете завершить замену воздушного фильтра салона с помощью инструментов, которые, вероятно, уже есть у вас дома. Вам понадобятся следующие инструменты:

    • Отвертки с плоской и крестообразной головкой, которые могут понадобиться для снятия корпуса фильтра
    • Запасная тряпка для протирки отсека корпуса фильтра
    • Небольшой пылесос для удаления излишков пыли из вентиляционной системы
  2. Найдите место расположения воздушного фильтра

    В зависимости от марки и модели вашего автомобиля воздушный фильтр может располагаться в нескольких местах — все в передней панели или под капотом вашего автомобиля. Обратитесь к руководству по эксплуатации вашего автомобиля, чтобы найти подходящее место. В каждой из наших самых популярных моделей автомобилей — Subaru Forester, Subaru Outback и Honda Accord — воздушный фильтр салона расположен за перчаточным ящиком. Во многих других панель доступа расположена под приборной панелью у ног пассажира.

  3. Снимите панель приборной панели для доступа

    Если воздушный фильтр вашего автомобиля не расположен под капотом, вам необходимо снять панель или крышку передней панели приборной панели. Для большинства марок и моделей вы можете добиться этого, просто используя отвертку Phillips для удаления необходимых винтов, а также отвертку с плоской головкой, чтобы выдвинуть панель. Отложите панель в сторону и еще раз оцените расположение фильтра — если вам необходимо снять перчаточный ящик, перейдите к шагу 4.

  4. Снятие перчаточного ящика (Subaru Outback, Forester и Honda Accord)

    Если корпус фильтра находится за перчаточным ящиком, его тоже необходимо снять. Опустошите содержимое перчаточного ящика и выполните следующие действия:

  5. Снимите блок корпуса фильтра

    Во многих моделях, включая Subaru Forester и Honda Accord, блок корпуса фильтра удерживается на месте двумя пластиковыми зажимами. Просто отсоедините их, чтобы освободить корпус фильтра. В других случаях, таких как Subaru Outback, вам нужно будет открутить винты, которые удерживают кронштейн корпуса фильтра на месте, с помощью отвертки Phillips, прежде чем прикладывать давление к лотку корпуса фильтра.

  6. Очистить территорию

    На этом этапе вы можете очистить область вокруг воздушного фильтра салона. Тряпкой протрите область корпуса фильтра, удаляя излишки пыли. Кроме того, вы можете пропылесосить область и внутреннюю часть корпуса воздушного фильтра, чтобы удалить все следы пыли.

  7. Снять и заменить фильтр

    Снимите поддон корпуса фильтра и воздушный фильтр салона. Воздушный фильтр, скорее всего, будет сероватого цвета, так как за это время он уловил значительное количество пыли и мусора. Выбросьте его и поместите новый фильтр в лоток, в последний раз убедившись, что вы выбрали правильную посадку, прежде чем задвинуть фильтр и лоток на место.

  8. Установите на место перчаточный ящик и приборную панель

    После установки нового фильтра выполните указанные действия в обратном порядке, чтобы закрепить все необходимые зажимы корпуса фильтра, и замените все винты. Установите стопоры перчаточного ящика на их место и снова прикрутите все винты. Перед закрытием перчаточного ящика и восстановлением передней панели восстановите все остальные стопоры, рычаги управления и стопорный шнур.

Очистка воздушных фильтров

Многие водители предпочитают использовать многоразовый очищаемый салонный воздушный фильтр вместо стандартного одноразового фильтра. В отличие от одноразовых фильтров, вы не выбрасываете эти многоразовые фильтры каждый раз; вместо этого вы очистите фильтр и переустановите его, как обычно.Эти многоразовые фильтры могут сэкономить деньги в долгосрочной перспективе и рассчитаны на весь срок службы вашего автомобиля.

Очистить воздушный фильтр салона легко с помощью набора для очистки воздушного фильтра K&N. Просто распылите средство для очистки воздушного фильтра и удалите грязь, плесень и другие частицы небольшим количеством воды. Когда вода станет прозрачной, дайте ей высохнуть и нанесите освежитель воздушного фильтра салона. Выполняйте эту задачу так часто, как при замене фильтра, в соответствии с инструкциями производителя.

Наш рекомендуемый комплект для очистки воздушного фильтра: K&N Air Filter Cleaner Kit

Когда пришло время очистить воздушный фильтр, вам понадобятся и очиститель, и масло.Просто распылите чистящее средство и смойте водой. Когда фильтр высохнет, распылите масло и установите его на место. Поставляется с полными инструкциями

Набор содержит:
— 12 унций. Очиститель
— 6,5 унций. Фильтр масляный

Какие фильтры воздуха в салоне самые лучшие?

Найти поставщика воздушных фильтров салона несложно; Фактически, вы можете найти многие из самых популярных брендов воздушных фильтров салона в розничных магазинах, таких как PepBoys и Auto Barn. Однако, как и в случае с другими автомобильными продуктами, качество является ключевым фактором.В наш список лучших воздушных фильтров салона вошли:

Моющийся салонный воздушный фильтр K&N VF2000

Воздушные фильтры

K&N обеспечивают первоклассную фильтрацию воздуха в салоне вашего автомобиля с полным спектром — необходимость, независимо от того, живете ли вы в сильно загрязненном городском районе или в пыльной сельской местности. Этот моющийся салонный воздушный фильтр K&N отлично справляется с фильтрацией и избавляет вас от необходимости заказывать нужные фильтры. Обозреватели неизменно впечатлены высоким качеством и возможностью многократного использования этой модели.

Плюсов:

  • Прочная заводская установка для фильтрации премиум-класса и непрерывного использования
  • Оптимальный контроль запаха и фильтрация плесени, пыльцы, спор грибов, бактерий и других аллергенов, включая пыль
  • Простота очистки и повторного использования, что исключает дополнительные расходы на фильтры, а также снижает воздействие на окружающую среду

Минусы:

  • Более высокая начальная стоимость по сравнению с традиционными одноразовыми фильтрами
  • Небольшая дополнительная операция, необходимая для очистки этого многоразового фильтра

Этот фильтр K&N обеспечивает всю свежесть совершенно нового одноразового фильтра с возможностью его постоянного повторного использования для решения экологических проблем. Его первоначальная более высокая стоимость в конечном итоге компенсируется, поскольку это единственный фильтр, который вам нужно будет приобрести до конца жизни вашего автомобиля.

Фильтр салонный Fram Fresh Breeze

Попросите любого механика составить краткий список воздушных фильтров, и он, скорее всего, будет включать этот воздушный фильтр Fram. В целом, большинство обозревателей сочли воздушные фильтры салона Fram более прочными или более прочными, чем даже фильтры оригинального производителя (OEM), и они часто имеют меньшую стоимость по сравнению с OEM. Хотя модель Fresh Breeze содержит все элементы этой прочности, она также содержит другие элементы, освежающие воздух.

Плюсов:

  • Пищевая сода и уголь, добавленные для фильтрации элементов, вызывающих запах
  • Воздух остается заметно свежим по сравнению с другими фильтрами
  • Гарантированно удаляет до 98% пыльцы, пыли и других загрязняющих веществ из воздуха вашего автомобиля.

Минусы:

  • Цена немного выше, чем у фильтров салона базовой модели
  • Серый цвет может ограничить вашу способность проверять фильтрацию пыли

Фильтрация, обеспечиваемая этим фильтром, стоит тех дополнительных денег, которые вы можете заплатить, особенно по сравнению со стоимостью профессиональной установки.Дополнительная свежесть заметна по сравнению с некоторыми другими брендами и позволяет оптимально использовать систему отопления, вентиляции и кондиционирования в вашей каюте.

Найдите любой нужный салонный воздушный фильтр на PepBoys.com

EPAuto Premium Воздушный фильтр салона

Этот салонный воздушный фильтр от EPAuto попал в большинство топовых списков кабинных воздушных фильтров, которые вы можете найти не зря — он считается очень ценным и обеспечивает хорошую фильтрацию, к тому же. Хотя он дешевле, чем другие в нашем списке, он обеспечивает ту же функцию, что и фильтр Fram, указанный выше.Рецензенты постоянно отмечают его отличную цену и ценят более свежий воздух, который он обеспечивает.

Плюсов:

  • Подходит для многих автомобилей, которых нет на рынке у некоторых других брендов, включая Honda Accord и Acura Integra
  • Содержит пищевую соду и активированный уголь, чтобы воздух в автомобиле оставался свежим и воздухопроницаемым.
  • Отличная цена по сравнению со многими другими брендами премиум-класса

Минусы:

  • Некоторые рецензенты прокомментировали стойкий запах выхлопных газов или упомянули, что воздействие пищевой соды не было таким заметным, как при использовании других фильтров.
  • Каждый фильтр серого цвета, что может означать, что вы не можете оценить количество отфильтрованной пыли и аллергенов в салоне.

Этот фильтр представляет собой отличное соотношение цены и качества за фильтрацию, которую он обеспечивает.Это может быть хорошей альтернативой, если вы хотите немного сэкономить или не хотите чистить воздушный фильтр ежегодно. Однако из-за изначально низкой цены вы могли пожертвовать более свежим воздухом и постоянной экономией средств за счет многоразового фильтра.

Найдите любой нужный салонный воздушный фильтр на PepBoys.com

Уход за автомобилем своими руками не должен быть расходом

Здесь, в Red Mountain Funding, наша приверженность делу покупки автомобиля не заканчивается покупкой одного из наших качественных подержанных автомобилей.Вместо этого мы рекомендуем выполнять как можно больше простых работ по техническому обслуживанию автомобилей дома для дальнейшей экономии. Наши партнеры в PepBoys и Auto Barn могут помочь вам выбрать воздушные фильтры Fram и многоразовые салонные воздушные фильтры K&N, которые подходят вашему автомобилю, и поддерживать его в рабочем состоянии на долгие годы.

Может ли регулярная замена салонного фильтра продлить срок службы компонентов кондиционера и обогревателя? —

Фильтры салона предотвращают попадание вредной грязи и мусора в салон вашего автомобиля.Но знаете ли вы, что они также защищают систему отопления, вентиляции и кондиционирования (HVAC) вашего автомобиля? Фильтры салона почти так же важны для здоровья вашего автомобиля, как и для вашего собственного.

Конструкция салонного фильтра

Салонный фильтр — это простой способ защитить не только ваши легкие, но и компоненты HVAC вашего автомобиля. Большинство салонных фильтров имеют гофрированный бумажный фильтрующий элемент, закрепленный на пластиковой раме. Загрязнения попадают в элемент до того, как попадут в систему HVAC и салон автомобиля.
Есть два основных типа салонных фильтров: сажевый и активированный уголь. Сажевые фильтры задерживают пыль и мусор. Фильтры с активированным углем тоже делают то же самое, а также поглощают пары и запахи. Оба типа фильтров способны обеспечить защиту системы отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха.

Как салонный фильтр защищает систему HVAC

Несмотря на то, что мы воспринимаем тепло и кондиционер как должное, система HVAC довольно сложна. Нагретый или охлажденный воздух должен пройти через лабиринт труб и каналов, прежде чем попадет внутрь.Фильтр салона расположен в начале этого лабиринта, в воздухозаборнике системы отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха. Наружный воздух втягивается в систему электродвигателем вентилятора. Этот воздух проходит через салонный фильтр, прежде чем попадет внутрь — или в любой из компонентов системы отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха. Электродвигатель вентилятора, сердечник отопителя и испаритель кондиционера — все они защищены салонным фильтром. Он улавливает пыль, грязь и пыльцу, прежде чем они смогут загрязнить эти жизненно важные (и часто дорогие) детали HVAC. Это улучшает характеристики HVAC и продлевает срок службы компонентов.

Важность замены салонного фильтра

Со временем салонный фильтр забивается загрязняющими веществами. Когда это происходит, он блокирует поток воздуха в систему HVAC. В результате система отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха должна работать интенсивнее, чтобы обогревать и охлаждать кабину. Например, электродвигатель вентилятора, возможно, придется работать дольше или установить более высокое значение, чтобы втягивать достаточно воздуха. Такое экстремальное использование сокращает срок службы компонентов.
В некоторых случаях фильтр с жесткими ограничениями может также позволить загрязнителям попасть в систему HVAC.Электродвигатель вентилятора может вытягивать грязь и мусор из перенасыщенного фильтра, направляя их непосредственно в испаритель и сердечник нагревателя. Это может засорить и повредить эти критически важные компоненты HVAC.
По этим причинам регулярная замена салонного фильтра необходима для исправности системы HVAC. Как правило, замена угольного фильтра должна производиться один раз в год или каждые 15 000 миль. Сажевые фильтры обычно заменяются каждые 30 000 миль. Оба типа фильтров следует менять чаще на транспортных средствах, которые ездят по грязным, пыльным или сильно загрязненным местам.

Качественные салонные фильтры для максимальной защиты

Не все салонные фильтры одинаковы. Некоторые фильтры с пониженной производительностью не задерживают достаточное количество загрязняющих веществ, чтобы быть эффективными. Выбирая салонные фильтры Premium Guard, вам гарантируется наилучшая производительность. Салонные фильтры Premium Guard улавливают до 99% загрязняющих веществ в воздухе, чтобы защитить вашу систему отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха. Подумайте о стоимости замены испарителя или теплообменника — вы быстро поймете, что качественный салонный фильтр просто необходим.

Опасности отказа от замены воздушного фильтра в салоне

Тот факт, что воздушный фильтр салона не влияет напрямую на то, доберется ли ваш автомобиль из пункта A в пункт B, не означает, что вам следует отложить получение нового фильтра — или не заменяя его вообще.Замена воздушного фильтра в салоне — важная часть регулярного технического обслуживания автомобиля, и ее игнорирование может вызвать довольно неприятные последствия. Вот почему так важно регулярно менять воздушный фильтр салона.

Что такое воздушный фильтр салона?
Воздушный фильтр салона не следует путать с воздушным фильтром вашего двигателя, хотя они выполняют схожие функции. В то время как воздушный фильтр двигателя обеспечивает попадание чистого воздуха в двигатель, воздушный фильтр кабины предотвращает попадание загрязнений, таких как грязь, пыль, дым, смог, пыльца, споры плесени и выхлопные газы, в кабину транспортного средства через систему отопления, вентиляции и т.д. и система кондиционирования воздуха (HVAC).Он также не пропускает другой мусор, такой как насекомые, помет грызунов и листья.

Воздушные фильтры салона обычно имеют прямоугольную форму и изготавливаются из бумаги и смеси других волокнистых материалов. У них есть складки, чтобы лучше улавливать загрязнения. Когда воздух проходит над воздушным фильтром салона, мусор задерживается фильтром и останавливается, а не закачивается в автомобиль. В конце концов, этот мусор накапливается, и фильтр необходимо заменить, чтобы он продолжал работать эффективно.

Что произойдет, если воздушный фильтр в салоне загрязнен?
Существует множество опасностей, если вы не будете регулярно заменять воздушный фильтр салона.Вот некоторые из рисков, которые несет грязный воздушный фильтр салона.

Проблемы со здоровьем: Функциональный воздушный фильтр кабины необходим для защиты салона автомобиля от загрязняющих веществ. Загрязненный или забитый воздушный фильтр салона не будет фильтровать эти загрязнения, вызывая проблемы у тех, кто страдает аллергией или имеет проблемы с дыханием. Хорошее практическое правило — заменять воздушный фильтр салона каждый февраль, до наступления весеннего сезона аллергии, особенно если вы живете в районе с большим количеством деревьев.Новый воздушный фильтр салона предотвратит попадание пыльцы в автомобиль и заставит его пассажиров начать чихать или даже хуже.

Система HVAC будет работать плохо: Воздушный фильтр салона, оставленный на месте после истечения срока его службы, усложнит работу системы HVAC автомобиля, что может привести к возгоранию двигателя. Грязные или забитые воздушные фильтры салона уменьшат количество воздуха, выходящего из вентиляционных отверстий. Это влияет на температуру воздуха в кабине, которая зависит от постоянного потока воздуха, проходящего через сердечник обогревателя, испаритель или оба компонента.Если вы не меняете воздушный фильтр в салоне, ваша система HVAC будет работать намного сложнее.

Плохая очистка окон от тумана: Другая проблема, которая возникает при нарушении воздушного потока, заключается в том, что окна не очищаются так быстро. Кроме того, ухудшение качества воздуха из-за воздушного фильтра салона, который необходимо заменить, приводит к образованию конденсата на лобовом стекле. После замены воздушного фильтра салона на лобовом стекле будет меньше накопления тумана.

Неприятные запахи: Нет, этот ужасный запах, исходящий из ваших вентиляционных отверстий, не от того, что вы только что проезжали.Это происходит из-за того, что вы не меняли воздушный фильтр в салоне. Грязные или чрезмерно забитые воздушные фильтры салона могут вызывать запах пыли и затхлости, особенно при включенной системе отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха. Регулярная замена воздушного фильтра в салоне гарантирует, что вашим пассажирам не придется опускать окна в разгар зимы, чтобы подышать свежим воздухом.

Вам нужно заменить воздушный фильтр салона?
Одним словом: абсолютно. Итак, какое хорошее эмпирическое правило? Большинство производителей предлагают заменять его каждые 12 000–30 000 миль, в зависимости от конкретного автомобиля.Если вы живете в сильно загрязненном районе или регулярно едете по грязной дороге, поднимающей много пыли, было бы разумно заменить ее еще раньше. Страдающие аллергией или люди с нарушенной дыхательной системой могут подумать о приобретении нового через всего 5000 миль.

Сколько стоит замена воздушного фильтра салона?
Замена воздушного фильтра салона может быть делом своими руками, если вы готовы к этой задаче. В современных автомобилях большинство из них расположено за перчаточным ящиком, под приборной панелью или под капотом.Хотя к воздушному фильтру салона легко получить доступ, будьте осторожны, чтобы не сломать зажимы или штифты, удерживающие его. Воздушные фильтры салона обычно стоят от 15 до 50 долларов. Если вы сможете заменить его самостоятельно, вы сможете сэкономить до 50 долларов на трудозатратах.

Регулярно заменяйте его
Хотя воздушный фильтр салона скрыт из виду, это не должно быть забыто. Регулярно заменяя его, вы гарантируете, что воздух, циркулирующий внутри салона вашего автомобиля, практически не будет содержать загрязняющих веществ, и этого должно быть достаточно, чтобы вам стало намного легче дышать.

Леонард, Дж. (2019) Опасности, связанные с отказом от замены воздушного фильтра салона. CarFax. Получено с https://www.carfax.com/blog/the-dangers-of-not-changing-your-cabin-air-filter

Тормоза

Как часто вам нужно обслуживание тормозов?

Это во многом зависит от того, как вы ездите по Ашленду! Если вы часто используете тормоза, как большинство городских или городских водителей, вам понадобится обслуживание автомобильных тормозов чаще, чем тому, кто большую часть времени водит по межштатным шоссе в Орегоне.

Зачем нужна замена центральных автомобильных тормозов

Детали, составляющие тормозную систему вашего автомобиля (например, тормозные колодки, роторы, суппорт и тормозная жидкость), со временем изнашиваются и в конечном итоге потребуют замены. Один из наиболее распространенных видов ремонта автомобильных тормозов, который мы выполняем в Grants Pass Toyota, — это замена тормозных колодок (или колодок). Независимо от того, из чего они сделаны (керамические или металлические), тормозные колодки изнашиваются каждый раз, когда вы нажимаете на педаль тормоза — именно так они работают, чтобы остановить ваш автомобиль Toyota!

Если вы позволите своим автомобильным тормозным колодкам изнашиваться слишком сильно, не заменяя их, металл, удерживающий колодки, войдет в контакт с металлическими роторами (или барабанами) тормоза.Это не только делает ваши тормоза менее эффективными (и менее безопасными!), Но также увеличивает износ тормозных роторов / барабанов, а это означает, что их также необходимо будет заменить!

Предупреждающие знаки о ремонте тормозов

Есть несколько предупреждающих знаков, с которыми большинство водителей столкнется, прежде чем автомобильные тормоза (ротор, колодки, суппорт) дойдут до точки потенциального отказа или потребуются дополнительные услуги по торможению.

Во время вождения в Медфорде слушайте, смотрите и обращайте внимание на то, как едет ваш автомобиль, чтобы предупредить вас о приближающемся ремонте тормозов.Вот некоторые общие вопросы, которые следует задать себе, если вы обеспокоены тем, что ваши тормоза нуждаются в ремонте:

  • Загорается ли контрольная лампа ABS вашего тормоза во время движения?
  • Ваш автомобиль Toyota поворачивается или тянется в сторону при использовании автомобильных тормозов?
  • Вы слышите скрежет или визг при нажатии на педаль тормоза?
  • Чувствуете ли вы пульсацию или ощущаете мягкость педали тормоза, когда вы наступаете на нее?

Это общие знаки, но не единственные, которые предполагают, что вам следует привезти свой автомобиль или грузовик Toyota в Grants Pass Toyota, чтобы его осмотрели и, возможно, заменили тормоза.Любые другие образы, звуки или ощущения в автомобильной тормозной системе, которые кажутся необычными или которые вы не замечали раньше, также указывают на то, что вам следует передать свой автомобиль в наш отдел обслуживания Grants Pass. Помните, что автоматические тормоза постоянно изнашиваются, поэтому, если вы думаете, что у вас проблемы с тормозами на вашем автомобиле Grants Pass, ситуация не улучшится, если оставить его в покое. Обычно ремонт тормозов обходится дешевле, чем замена автомобильных тормозов. Тормоза — это основная система безопасности каждого легкового и грузового автомобиля, так что не рискуйте!


Отдых с Бадом Грантом в его хижине на берегу озера

И хотя ему, конечно же, помогает его давний товарищ Пэт и другие, Грант наслаждается ручным трудом, который связан с владением хижиной.Он подчеркивает объем необходимой работы, но очевидно, что усилия приносят плоды.

«Если вам не нравится стричь лужайку, рубить дрова, расчищать землю или мыть окна, то вам здесь не место», — говорит Грант. «Но если вы хотите свое собственное жилище, вам достанется много заботы — и это то, что делает нас всех здоровыми».

Побывав некоторое время на улице, Грант предлагает отдохнуть от полуденного солнца, и мы переходим в гостиную.

Он устраивается в большом кресле: «Когда ты становишься старше, хорошо, когда ты немного покачиваешься», — и улыбается.Вокруг него стены покрывают безделушки и воспоминания. Там есть фотография в рамке первой бревенчатой ​​хижины, которая сгорела много лет назад, рядом с вырезанной гагарой на мантии за его головой. Рядом красочный фазан установлен над изображением рыбы.

«У всего есть своя история», — говорит Грант, указывая на украшенные стены.

У него есть охотничьи истории, которых слишком много, чтобы перечислять, но он рассказывает нам о первом белохвостом олене, которого он застрелил в 14 лет, всего в двух милях к северу от участка, который он позже купит.В его голосе до сих пор звучит гордость, когда он говорит нам, что сохранил эту пару рогов до сих пор.

Грант напоминает нам, что он вырос во время Великой депрессии, когда все было, как он их описал, «немного мрачным». Он делает паузу, а затем задумчиво говорит:

«Интересно состариться и пережить [столько изменений]».

Он рассказывает нам о первой машине своей семьи, спрашивая, знаем ли мы, что такое Ford Model T — «квадратная черная маленькая машинка» — и вспоминает, как переехал рядом с моделью A.Иногда на протяжении всего его детства у его родителей вообще не было машины.

«Я больше ценю то, что вы считаете само собой разумеющимся», — говорит он.

Где находится мой салонный воздушный фильтр и когда его менять?

Возможно, вы не поверите, но воздушный фильтр салона — это относительно новая технология — она ​​была впервые представлена ​​в автомобилях высокого класса в 1989 году. Для людей, заботящихся о своем здоровье и страдающих аллергией, это была отличная идея, которая должна была быть приходи раньше.Согласно исследованию Корейского института промышленных технологий, автомобильные воздушные фильтры для салона улавливают от 50% до 90% частиц размером более 0,3 микрометра, таких как пыль, сажа, пыльца и насекомых. Перенесемся на три десятилетия вперед, и трудно найти автомобиль, не оборудованный им.

Где находится воздушный фильтр салона?

По логике, фильтр салона должен быть где-то в системе кондиционирования воздуха, чтобы он мог фильтровать поступающий воздух. Некоторые производители размещают его там, где он также может фильтровать рециркуляционный воздух, в зависимости от положения рециркуляционной дверцы.

Обычно воздушный фильтр салона находится в одном из трех мест:

  • За перчаточным ящиком: Чаще всего воздушный фильтр салона находится за перчаточным ящиком. Чтобы получить к нему доступ, вы должны удалить небольшую панель с задней части ящика, или иногда весь перчаточный ящик плюхается вниз и в сторону.
  • Под капотом: Для многих автомобилей забор свежего воздуха находится в кожухе лобового стекла, где он подвергается воздействию воздуха, но не ветра.Чтобы получить доступ к этому салонному фильтру, необходимо приподнять капот и снять пластиковую крышку.
  • За приборной панелью: На некоторых автомобилях воздушный фильтр салона расположен в другом месте на приборной панели. Большинство из них находится где-то со стороны пассажира, над или под перчаточным ящиком, но некоторые — со стороны водителя.

Когда следует заменять воздушный фильтр салона?

Поскольку он фильтрует большую часть воздуха, поступающего в ваш автомобиль или рециркулирующего в салоне, воздушный фильтр салона со временем заполняется пылью, сажей, пыльцой и другими твердыми частицами.Но не существует универсального плана замены салонного фильтра. Некоторые производители рекомендуют замену каждые 10 000, 12 000, 15 000 или 20 000 миль или каждые 6–12 месяцев. Частота замены фильтра зависит от нескольких факторов:

  • Если вы много ездите, фильтр, скорее всего, будет собирать больше грязи, поэтому рекомендуемый пробег может лучше соответствовать вашим обстоятельствам.
  • Если вы немного водите машину, фильтр будет собирать меньше грязи, поэтому лучше всего ежегодно заменять салонный фильтр.
  • Некоторые участки, например, проселочные дороги, естественно более пыльные, чем другие, что может быстрее засорить фильтр.
  • Если салонный фильтр явно забит или издает неприятный запах, его следует как можно скорее заменить.

К счастью, проверка и замена салонного фильтра не требует много времени и инструментов, если они вообще есть. Обратитесь к руководству по эксплуатации для конкретного места и процедуры. Чтобы снять фильтр и проверить, достаточно ли он загрязнен, чтобы его можно было заменить, потребуется всего несколько минут.

Ознакомьтесь со всеми салонными фильтрами, доступными на NAPA Online, или доверьтесь одному из наших 17 000 пунктов обслуживания NAPA AutoCare для текущего обслуживания и ремонта. Для получения дополнительной информации о воздушном фильтре салона, расположенном в вашем автомобиле, поговорите со знающим экспертом в местном магазине NAPA AUTO PARTS.

Фото любезно предоставлено Pixabay

Бен разбирает вещи с 5 лет и собирает их снова с 8 лет. После того, как он побаловался ремонтом дома и на ферме своими руками, он нашел свое призвание в автомобиле CGCC.

Какой салонный фильтр стоит на ладе гранты. Фильтр салонный Лада Гранта

Салонный фильтр на Лада Гранта относится к системе отопления и вентиляции в автомобиле. Теперь поговорим об особенностях замены этого фильтра, уделив дополнительное внимание комплектации с кондиционером. На самом деле процедура не слишком отличается от той, что проводится на Lada Priora с кондиционером.

Процесс замены салонного фильтра

  1. Для начала снимите пять винтов с декоративной крышки под капотом с помощью отвертки Phillips.Они расположены между моторным отсеком и лобовым стеклом. Снимаем декоративную крышку. Более подробно мы уже писали в ответе на вопрос пользователя.

    Болты обозначены стрелками (Т20)

  2. Выверните два винта, которыми крепится крышка воздушного фильтра. «Фигурная» отвертка. Снимаем декоративную крышку.

    1 болт защитной крышки

    2 болта защитной крышки

  3. Снимите салонный фильтр. Для этого нажмите на два фиксатора по бокам фильтра.

    Откиньте правую защелку и потяните на себя

  4. Если под фильтром есть грязь или листва (как она туда попадает?), То избавьтесь от нее. Лучше всего пылесосить.

    Чистим сиденье

  5. Новый фильтр устанавливается поролоном вниз. Будьте осторожны, не перепутайте. Защелкните две защелки.

    Новый салонный фильтр с поролоновым пухом

  6. Наденьте предохранительную опору и закрепите болтами.
  7. Надеть декоративную опору и закрепить болтами.

При установке нового фильтра его, возможно, придется согнуть, что можно сделать легко или с небольшими усилиями, в зависимости от конкретной модели фильтра. Также важно помнить, с какой стороны следует устанавливать фильтр.

Убедиться в правильности установки можно по боковой отметке, которая представляет собой надпись со стрелкой.

Когда заменять салонный фильтр

Многие не знают, когда менять салонный фильтр, и вообще нужно ли это делать.

По внешнему состоянию этого фильтра сразу видно, почему воздух в салоне «грязный»

Но это касается «тепличных» условий, когда автомобиль активно не подвергается пылевому загрязнению. На практике может даже возникнуть необходимость проводить замену каждые пять тысяч километров, если автомобиль эксплуатируется по грунтовым дорогам.

Для владельцев автомобилей с кондиционером важным вопросом также будет, какой воздух поступает в салон, достаточно ли он чист и имеет ли правильная температура.На это влияет нагревательный фильтр, который, возможно, потребуется заменить.

выводы

Замена салонного фильтра не проблема даже для начинающего автолюбителя.

Достаточно вооружиться крестовой отверткой и десять минут свободного времени. Обратите внимание только на переустановку фильтра. Это может потребовать некоторой сноровки. Как мы уже говорили, отодвинуть назад уплотнительную резину капота, а также шланг вакуумного усилителя поможет справиться с задачей.

  • Новый салонный фильтр для вашего автомобиля доступен под индексом 1118-8122010-01.
  • Возможна замена на фильтр от «брата» в виде Лады Калины, представленной каталожным номером 11180-8122010-82.
  • Некоторые автолюбители рекомендуют установить альтернативный Corteco 80000999, представляющий собой угольный фильтр. Его установка особенно актуальна, если автомобиль эксплуатируется в городских условиях.

Салонный фильтр является неотъемлемой частью системы вентиляции и отопления.Здесь мы рассмотрим технологию замены этого фильтра в модели Lada Granta, оснащение которой предусматривает наличие кондиционера. Эта процедура будет знакома категории владельцев, ранее сталкивавшихся с ней в модели Priora.

Как заменить фильтр?

Многие задают довольно распространенный вопрос, как часто меняют салонный фильтр и зачем нужна эта процедура? Завод рекомендует склоняться к замене фильтрующего элемента через каждые 30 тыс. Км.Практическая эксплуатация свидетельствует о сокращении этого нормативного срока до 5-7 тыс. Км. Если машина пашет по грязным дорогам, то частоту следует регулировать с учетом индивидуальных особенностей эксплуатации. В виде основных сигналов о возникновении необходимости в рассматриваемой нами процедуре, ухудшении работы печки или появлении «ниоткуда» грязного воздуха внутри салонного пространства Lada Granta.

Счастливые обладатели Лады Грант, в оснащении которой предусмотрена полезная система кондиционирования, помимо прямой замены фильтра, беспокоятся о достаточности фреона в контуре, дате его замены, температуре и степени очистки. воздуха, подаваемого в салон.На последние два аспекта влияет фильтрующий элемент.

Важность процесса замены трудно переоценить, поскольку фильтр «переживает» за здоровье людей, передвигающихся в автомобиле Lada Granta. Это происходит из-за постепенного загрязнения фильтрующего элемента, который со временем становится питательной средой для вирусов и грибков. Своевременная замена салонного фильтра предотвращает этот процесс.

Как поменять фильтр в салоне. Процедура разбита на следующие последовательные этапы:

  • прямое приготовление;
  • , обеспечивающий доступ к локации;
  • демонтажные манипуляции с использованным фильтром;
  • установка нового компонента.

Замена

  1. После открытия капота LADA Granta отверткой Phillips открутите два винта, расположенные на поверхности изоляционного материала кузова.
  2. Фильтр расположен прямо за двигателем. Элемент зафиксирован в вертикальном положении.
  3. Для обеспечения свободы доступа отодвигаем уплотнительную резинку и снимаем патрубок вакуумного усилителя (это помеха при установке фильтра обратно).
  4. После перемещения шумоизоляционного материала обеспечивается доступ к пластиковой крышке элемента. Снимается при открытии имеющейся защелки.
  5. Извлекаем фильтр из пазов, потянув за специальный «язычок».
  6. Предполагается, что при установке элемент будет слегка сжат (для удобства).

Важно! Фильтр устанавливается только в одном положении, что обозначено на соответствующей боковой части нанесенным знаком в виде надписи с логотипом в виде стрелки.

Итак, теперь вы знаете, как менять фильтр.

Мощность

Замена салонного фильтра на отечественную LADA Granta выглядит очень просто. Если использовать отвертку с заданным профилем наконечника, то на всю «операцию» потребуется не более 15 минут временного ресурса. Момент, требующий небольшой концентрации внимания, — установка «свежего» фильтра в намеченном месте. Это связано с обеспечением достаточного пространства для доступа.

Своевременно заменять салонный фильтр в LADA Granta, не пренебрегая рекомендацией выполнять эту процедуру не реже одного раза в полгода. Это позволит добиться завидной чистоты воздушной среды в салоне и исключить появление неприятных сюрпризов при работе такого сложного агрегата, как система кондиционирования.

Плохо работает печка или слабо дует кондиционер? Независимо от марки и модели автомобиля, с такой проблемой может столкнуться каждый.Часто причина тому — забитый салонный фильтр. Рассмотрим, как заменяется салонный фильтр Гранта.

Как поменять салонный фильтр на Гранте

Хвала АвтоВАЗу — поменять салон сравнительно несложно и то же на Гранте и Калине. Изменения с улицы в подкапотном пространстве — демонтаж сложных элементов не требуется.

Для всех работ потребуется :

  • Ключ Torx Т-20;
  • Отвертка крестовая;
  • Новый фильтр.
Все, что потребуется для работы: ключ-звездочка, крестовая отвертка и сменный фильтр.

Пошаговая замена фильтра

Для работы придется снять часть декоративного фартука у основания лобового стекла. Для этого поднимите дворники в вертикальное положение .

Чтобы поднять дворники, включите зажигание и запустите дворники. Как только они достигнут вертикального положения, выключите зажигание. Доступ к фартуку открыт.


Шаг 1: поднимите дворник в вертикальное положение.
Шаг 2: снимите пластиковую накладку на правом дворнике.

Получил доступ к корпусу фильтра — крестовой отверткой откручиваем 2 самореза крышки … Снимаем.

Запомните порядок снятия крышки. Ставить неудобно — лучше точно знать, с какого края начинать в первую очередь.


Шаг 3: снимите крышку фильтра. Получаем доступ к самому элементу.

Последнее — отогнув защелки крепления, извлеките фильтр … Если под ним есть листья и мусор, можно пропылесосить или продуть сиденье.

Вы можете купить новый фильтр без монтажной рамки. В этом случае снимите старый фильтр с его рамы и используйте его для установки нового.


Шаг 4: замените старую деталь новой. Если новый фильтр обрамлен, просто поставьте его на место. В противном случае мы будем использовать кадр из старого элемента.

Сборку проводят в обратной последовательности :

  • 2 защелки крепления;
  • 2 самореза в кожухе;
  • 5 винтов в пластиковой крышке.

Особенности замены на Грант стандарт, 8 клапанов без кондиционера

На Гранте номер в стандартной комплектации без фильтра, с завода … Вне зависимости от типа кузова: седан или лифтбэк. Что делать с такими машинами?

Просто установите фильтр согласно нашим инструкциям.Фильтра в машине просто нет — место для него есть и доступ к нему такой же.

Что касается салона, то кондиционер влияет только одним образом: после длительной эксплуатации конденсатор начнет сильно дуть.

Видеоинструкция по замене

Общие вопросы по замене: SKU, интервал замены, выбор

Отфильтруйте артикул для поиска и заказа в Интернете: 11180-8122010-03

Как часто менять

Завод регламентирует замену воздушных фильтров каждые 30 000 км.Практика показывает разрыв в 15000 км от замены до замены. Или Дважды в год перед зимой и летом соответственно.

Какой салон выбрать

Есть 2 типа салонных фильтров: угольный и штатный. При выборе учитываем следующие моменты:

Таблица 1. Сравнение салонных фильтров на Лада Грант

Углеродистый Нормальный
Как очищает Задерживает запахи Не пропускает мусор и мелкие частицы, запахи проходят через все
Ресурс Считается, что уголь быстро забивается и после этого становится бессмысленным. Как заявлено — до 30 000 км
Где лучше всего использовать В пыльных условиях, в городе с большим количеством пробок В помещении с чистым воздухом, без пробок и сильной пыли
Стоимость, руб. 250 170

Выбор гранта — дело ваших предпочтений. Стоимость детали остается копейкой, даже если она пропитана углем.Если поставить обычный белый элемент, но регулярно его менять, хуже не станет. Если долго не менять, кто угодно превратится в это фото.

Вместо вывода

Подведем итог:

  • Замена салонного фильтра в Гранте — вопрос 10-20 минут ;
  • Для работ не требуется специального помещения или дорогостоящего инструмента;
  • Необходимо менять элемент каждые 15000км … либо сезонно перед зимой и летом;
  • Выбор самого фильтра между обычным и угольным — для избавления от запахов лучше взять угольный.

Нужно больше статей для ухода за Грантом? Выбирайте.

Ждем комментариев и мнений. Не стесняйтесь писать!

Автомобиль вентилируется за счет втягивания воздуха снаружи. Специальный очиститель помогает избавиться от дорожной пыли.

Сетчатый фильтр салона

Grant обеспечивает задержку мелких частиц. Таким образом, в автомобиль поступает только чистый воздух. Также элемент предотвращает попадание пыли в топку для обеспечения правильной работы каменки.

Когда нужно менять салонный фильтр Гранта и как его выбрать?

Расходники меняются каждые 30 тыс. Км. Но, специалисты рекомендуют учитывать условия эксплуатации, при которых очищается салонный фильтр в Лада Гранта. При частом использовании авто на загрязненных территориях или на песчаных дорогах лучше менять его через 10-15 тысяч км. Так что добиться нормального функционирования системы будет намного проще.

Перед установкой элемента стоит изучить типы, предлагаемые производителями.Для установки в Granta фильтр салона может быть как пылевым, так и угольным. Достоинства первого типа — невысокая стоимость. Второй отличается способностью собирать не только пыль, но и вредные газовые примеси.

Самостоятельная установка очистителя занимает примерно 20 минут. Качественная замена салонного фильтра Лада Гранта осуществляется при помощи крестовой отвертки и отвертки с 5 гранями. Работа ведется с поднятыми дворниками. Инструкция по исполнению следующая:

1.Открывается капот и откручивается пластиковая полоса с левой стороны (на 5 саморезов Т20).

2. Отвинтите крышку фильтра (2 крестообразных винта).

3. Старый фильтр удален.

4. Рама перенесена из старого очистителя в новый.

5. Прочищена розетка под фильтр и установлен новый салонный фильтр на Лада Грант с такой же рамой.

Установка накладок производится в обратной последовательности. Теперь для Лады Грант замена салонного фильтра будет полностью завершена.А водитель сможет с максимальным комфортом провести время в дороге. Остается только внимательно следить за состоянием нового элемента.

После замены салонного фильтра Гранта следует внимательно изучить старый очиститель. Количество пыли на нем подскажет владельцу, был ли монтаж был проведен вовремя.

Многочисленные частицы и помятая решетка, а также чрезмерное потемнение скажут о необходимости как можно чаще менять элемент.Поэтому интервалы между настройками следует запомнить или записать.

Большинство современных автомобилей, независимо от страны и производителя, оснащены салонным фильтром. Таким фильтром оснащается и Lada Granta, начиная с базовой комплектации. Этот фильтр необходим для фильтрации воздуха, поступающего в автомобиль извне. Если вовремя не заменить его, печка может начать плохо работать, воздух, поступающий в салон, не будет очищаться, а водитель и его пассажиры будут вдыхать мелкие частицы пыли и бактерии, которые размножаются на поверхности фильтра.

Производитель рекомендует менять салонный фильтр Лада Гранта каждые 5-7 тыс. Км. Однако, если вам часто приходится ездить по пыльным дорогам или пересеченной местности, я рекомендую вам заменить его раньше. Если после включения печки из воздуховодов идет пыль или неприятный запах — это сигнал к замене салонного фильтра.

Замена салонного фильтра Лада Гранта — пошаговая инструкция с фото

Для работы понадобится всего два инструмента:

  1. крестовая отвертка;
  2. отвертка TORX T20;
  3. Новый салонный фильтр Гранта или.

Приступим !?

1. Сначала откройте и дайте двигателю остыть.

2. Поднимите в вертикальное положение.

4. Теперь возьмите отвертку Phillips и открутите ею два самореза, которыми крепится пластиковый кожух салонного фильтра.

5. Снимите крышку, после чего вы увидите салонный фильтр, который нужно будет заменить.

6.Вынимаем рамку фильтра вместе с самим фильтром и вырываем из рамки старый фильтр.

7. Салонный фильтр на Гранту не нашел, поэтому взял салонный фильтр от Лады Калины. Наденьте на него рамку от старого фильтра и установите на место дальнейшего обслуживания.

А вот так выглядел старый салонный фильтр:

На этом замена салонного фильтра Лада Гранта завершена. Спасибо за внимание, надеюсь, у вас все получилось !? До новых встреч на сайте своими руками.

& nbsp

Стандартный фильтр для духовки. Лады салонного фильтра Гранта, замена фильтра своими руками

Не все автовладельцы Лада Гранта понимают важность такого расходника в автомобиле, как салонный фильтр.
Фильтр салона предназначен для очистки поступающего в автомобиль воздуха от пыли, спор растений, выхлопных газов и вредных бактерий. Качественный продукт способен задерживать до 95% загрязняющих веществ, не теряя способности впускать свежий воздух в машину.

Обычно производители изготавливают многослойные фильтрующие элементы. Наслоение обеспечивает удержание более крупных, а по мере продвижения — более мелких частиц. Более дорогие модели оснащены дополнительным фильтрующим слоем с активированным углем, задерживающим неприятные запахи и газы.
Есть однослойные, двухслойные, трехслойные и даже четырехслойные изделия.

Важность своевременной замены фильтра салона Гранта

Вот основная причина того, что замена фильтрующего элемента действительно важное и ответственное мероприятие.Итак, основная причина замены — размножение бактерий, вредоносных микроорганизмов, грибков.
Появление вышеуказанных неприятных организмов вызвано тем, что салонный фильтр подвергается воздействию влажного, влажного, загрязненного климата. Такие условия способствуют выработке веществ, опасных для здоровья человека. Водитель вынужден ежедневно вдыхать загрязненный воздух внутри автомобиля.

Фильтры салона также важны при работе с кондиционером.Дело в том, что сырая, влажная и теплая погода — благоприятная среда для размножения опасных бактерий. Именно в таких условиях чаще всего включается кондиционер. В этих условиях окружающей среды происходит активный рост и размножение опасных микроорганизмов.

Только представьте! Вы — участник дорожного движения в среднем городе. Концентрация вредных веществ (например, диоксида азота) в воздухе более чем в 1,5 раза превышает норму.В условиях движения этот показатель может превышать уровень в три раза, а в автомобиле в условиях интенсивного движения показатель достигает 8 раз.
Постоянное нахождение человека в столь неблагоприятных условиях (с нарушением или отсутствием системы фильтрации) приводит к хроническим заболеваниям.

Для того, чтобы окончательно решить проблему, связанную с качественной очисткой воздуха в салоне, необходимо регулярно (не реже двух раз в год при постоянной эксплуатации автомобиля) своевременную замену фильтроэлементов.О том, как поменять салонный фильтр на гранту, мы поговорим чуть позже.

Разновидности фильтроэлементов

  1. Обычные фильтры, без антибактериального покрытия.
  2. Продукция обработана специальным защитным средством, надолго предотвращающим рост бактерий.
  3. Фильтры угольные различных модификаций.

Обычные фильтры — не лучшее решение для обеспечения здорового микроклимата в вашем автомобиле. Обращаем ваше внимание, что некоторые из представленных в продаже средств позиционируют себя как антибактериальные, что зачастую далеко не так.
Поэтому к вопросу выбора нужно подходить очень внимательно. Помните: хорошее не может быть дешевым.

Если рассматривать изделия на угольной основе, то среди них можно выделить:
— фильтры на обычном угле (уровень фильтрации не слишком высокий), но цена вполне приемлемая;
— продукция с использованием кокосового угля (фильтрующие качества самые высокие), рыночная стоимость достаточно высока.

Замена салонного фильтра Лада Гранта

Для выполнения работ вам понадобится:

  • отвертка крестовая;
  • специальный ключ «ТОРКС» (с рабочей поверхностью в виде звездочки).

Этапы работы:


Заключение
Из всего вышесказанного можно сделать один единственный вывод — не пренебрегайте своевременной заменой фильтрующих элементов в своем автомобиле. Сэкономив дополнительно 300 — 500 рублей, не меняя вовремя фильтр, вы навредите своему здоровью.

Уже самые первые автомобили Lada Grant оснащались салонным фильтром, позже в систему вентиляции и отопления добавился кондиционер. При появлении в салоне посторонних запахов из печки вылетает мусор и пыль — нужно заменить салонный фильтр, а кондиционер — очистить.

1 Замена фильтра — открыть доступ и установить новый

Для замены салонного фильтра Грант вовсе не обязательно обращаться в автосервис. Если у вас есть инструмент и навыки, на его замену уйдет 10 минут. Следует вооружиться необходимыми инструментами. Для этого вам понадобится две отвертки. Первая — обычная крестовина, которая наверняка найдется среди инструментов автолюбителя. Второй характерен для шурупов Т20, которые, скорее всего, придется покупать.

Пожалуй, не все знают, где находится салонный фильтр, который надежно замаскирован декоративными накладками. Он находится под капотом справа от водителя. Поднимите капот и увидите, как на фото, пластиковую накладку рядом с лобовым стеклом. Сначала откручиваем пять саморезов Т20, снимаем декоративную панель. Чтобы было легче работать, поднимаем дворники.

Доступ к пластиковой крышке фильтра открыт. Он крепится двумя фигурными саморезами, которые откручиваем фигурной отверткой.

Снимаем пластик — открывается вид на фильтр. По бокам он крепится двумя защелками, которые загибаем, снимаем фильтрующий элемент. Под ним может быть грязь, даже листья. Чистим руками, пылесосим.

Берем новый фильтрующий элемент. Если он без рамки, мы используем его от старого для замены. Разделяем, надеваем на новую, ставим деталь на место. Иногда приходится немного согнуть — все зависит от типа нового элемента.С снятием и установкой легче справиться, отодвинув уплотнитель под капотом и шланг вакуумного усилителя.

Важно правильно установить фильтрующий элемент: ориентируемся по стрелке на стороне с надписью.

2 Если в машине есть кондиционер — сначала чистим.

На автомобилях с кондиционером мы совмещаем очистку с заменой салонного фильтра. Начинаем с покупки чистящих жидкостей, которых много, как пенистых, так и не образующихся.Находим дренаж: перед пассажирским сиденьем под бардачком отсоединяем трубку.

Добираемся до дренажной ямы: загибаем обшивку пола. Залейте как можно больше жидкости в испаритель, используя трубку, идущую в комплекте с очистителем, до тех пор, пока она не начнет переливаться через верх.

Устанавливаем в дренаж любую емкость для слива ненужной жидкости вместе с скопившейся грязью.

Мы также заливаем пену в дефлекторы вентиляции на панели.

Пока идет реакция — до 0,5 часа — занимаемся салонным фильтром: снимаем старый, как описано выше.

Затем включаем автомобильную печку в положение «тройка», заполняем место, где установлен фильтр, очистителем, даем печке поработать пять минут.

Устанавливаем новый элемент, собираем конструкцию.

За это время все очистилось, осталось вылить скопившуюся грязь из емкости. Трубку натягиваем на дренаж, фиксируем хомутом.Конструкцией автомобиля этого не предусмотрено, но известно множество случаев, когда трубка отваливалась.

  • уголь Corteco 80000999 — рекомендуем для постоянной эксплуатации в городе.
  • Как видите, самостоятельная замена несложная, немного больше работы, если машина оборудована кондиционером.

    В этом обзоре мы расскажем, как сэкономить на поездках к дилеру, и покажем, как легко снять и заменить салонный фильтр на Lada Granta.Рекомендуем менять фильтрующий элемент как можно чаще, т.е. несколько раз в год для более эффективной работы печки, когда в салоне нет запаха и окна не запотевают. Для этого мы приобрели салонный фильтр на Грант у авторитетной компании ТСН, специализирующейся на производстве фильтров. Также для замены нам понадобится стандартный набор ключей, в том числе Torx.

    Выбор салонного фильтра на Грант

    Артикул / номер ТСН 9.7.25 (фильтр салонный угольный) за 180 руб, также можно поставить:
    Sakura CA-25050 за 261 рубль
    BIG Filter GB-9831 за 200 руб
    Mann CU 26 004 за 580 руб

    Советуем взять более дешевый аналог от ТСН, ведь за такую ​​цену можно довольно часто менять салонный фильтр Лада Гранта, при этом качество товара остается на высоком уровне и вы всегда будете дышать чистым воздухом.

    Замена салонного фильтра на Лада Гранта

    На начальном этапе необходимо будет снять пластиковую вставку для остановки дворников, для этого открутить пять болтов ее крепления

    Для снятия и замены салонного фильтра на Лада Гранта необходимо с усилием прижать фильтр, чтобы он выпал из крепежной рамки и вставить новый салонный фильтр ТСН.

    Видео: как снять и заменить салонный фильтр Лада Гранта своими руками

    Плохо работает печка или слабо дует кондиционер? Независимо от марки и модели автомобиля, с такой проблемой может столкнуться каждый.Часто причина тому — забитый салонный фильтр. Рассмотрим, как заменяется салонный фильтр Гранта.

    Как поменять салонный фильтр на Гранте

    Хвала АвтоВАЗу — поменять салон сравнительно несложно и то же на Гранте и Калине. Изменения с улицы в подкапотном пространстве — демонтаж сложных элементов не требуется.

    Для всех работ потребуется :

    • Ключ Torx Т-20;
    • Отвертка крестовая;
    • Новый фильтр.
    Все, что потребуется для работы: ключ-звездочка, крестовая отвертка и сменный фильтр.

    Пошаговая замена фильтра

    Для работы придется снять часть декоративного фартука у основания лобового стекла. Для этого поднимите дворники в вертикальное положение .

    Чтобы поднять дворники, включите зажигание и запустите дворники. Как только они достигнут вертикального положения, выключите зажигание. Доступ к фартуку открыт.


    Шаг 1: поднимите дворник в вертикальное положение.
    Шаг 2: снимите пластиковую накладку на правом дворнике.

    Получил доступ к корпусу фильтра — крестовой отверткой откручиваем 2 самореза крышки … Снимаем.

    Запомните порядок снятия крышки. Ставить неудобно — лучше точно знать, с какого края начинать в первую очередь.


    Шаг 3: снимите крышку фильтра. Получаем доступ к самому элементу.

    Последнее — отогнув защелки крепления, извлеките фильтр … Если под ним есть листья и мусор, можно пропылесосить или продуть сиденье.

    Вы можете купить новый фильтр без монтажной рамки. В этом случае снимите старый фильтр с его рамы и используйте его для установки нового.


    Шаг 4: замените старую деталь новой. Если новый фильтр обрамлен, просто поставьте его на место. В противном случае мы будем использовать кадр из старого элемента.

    Сборку проводят в обратной последовательности :

    • 2 защелки крепления;
    • 2 самореза в кожухе;
    • 5 винтов в пластиковой крышке.

    Особенности замены на Грант стандарт, 8 клапанов без кондиционера

    На Гранте номер в стандартной комплектации без фильтра, с завода … Вне зависимости от типа кузова: седан или лифтбэк. Что делать с такими машинами?

    Просто установите фильтр согласно нашим инструкциям.Фильтра в машине просто нет — место для него есть и доступ к нему такой же.

    По отношению к салону кондиционер влияет только одним образом: после долгой эксплуатации конденсатор начнет сильно дуть.

    Видеоинструкция по замене

    Общие вопросы по замене: SKU, интервал замены, выбор

    Отфильтруйте артикул для поиска и заказа в Интернете: 11180-8122010-03

    Как часто менять

    Завод регламентирует замену воздушных фильтров каждые 30 000 км.Практика показывает разрыв в 15000 км от замены до замены. Или Дважды в год перед зимой и летом соответственно.

    Какой салон выбрать

    Есть 2 типа салонных фильтров: угольный и штатный. При выборе учитываем следующие моменты:

    Таблица 1. Сравнение салонных фильтров на Лада Грант

    Углеродистый Нормальный
    Как очищает Задерживает запахи Не пропускает мусор и мелкие частицы, запахи проходят через все
    Ресурс Считается, что уголь быстро забивается и после этого становится бессмысленным. Как заявлено — до 30 000 км
    Где лучше всего использовать В пыльных условиях, в городе с большим количеством пробок В помещении с чистым воздухом, без пробок и сильной пыли
    Стоимость, руб. 250 170

    Выбор гранта — дело ваших предпочтений. Стоимость детали остается копейкой, даже если она пропитана углем.Если поставить обычный белый элемент, но регулярно его менять, хуже не станет. Если долго не менять, кто угодно превратится в это фото.

    Вместо вывода

    Подведем итог:

    • Замена салонного фильтра в Гранте — вопрос 10-20 минут ;
    • Для работ не требуется специального помещения или дорогостоящего инструмента;
    • Необходимо менять элемент каждые 15000км … либо сезонно перед зимой и летом;
    • Выбор самого фильтра — между обычным и угольным — для избавления от запахов лучше взять угольный.

    Нужно больше статей для ухода за Грантом? Выбирайте.

    Ждем комментариев и мнений. Не стесняйтесь писать!

    Салонный фильтр является неотъемлемой частью системы вентиляции и отопления. Здесь мы рассмотрим технологию замены этого фильтра в модели Lada Granta, оснащение которой предусматривает наличие кондиционера. Эта процедура будет знакома категории владельцев, ранее сталкивавшихся с ней в модели Priora.

    Как заменить фильтр?

    Многие задают довольно распространенный вопрос, как часто меняют салонный фильтр и зачем нужна эта процедура? Завод рекомендует склоняться к замене фильтрующего элемента через каждые 30 тыс. Км. Практическая эксплуатация свидетельствует о сокращении этого нормативного срока до 5-7 тыс. Км. Если машина пашет по грязным дорогам, то частоту следует регулировать с учетом индивидуальных особенностей эксплуатации.В виде основных сигналов о возникновении необходимости в рассматриваемой нами процедуре, ухудшении работы печки или появлении «ниоткуда» грязного воздуха внутри салонного пространства Lada Granta.

    Счастливые обладатели Лады Грант, в оснащении которой предусмотрена полезная система кондиционирования, помимо прямой замены фильтра, беспокоятся о достаточности фреона в контуре, дате его замены, температуре и степени загрязнения. очистка воздуха, подаваемого в салон.На последние два аспекта влияет фильтрующий элемент.

    Важность процесса замены трудно переоценить, поскольку фильтр «переживает» за здоровье людей, передвигающихся в автомобиле Lada Granta. Это происходит из-за постепенного загрязнения фильтрующего элемента, который со временем становится питательной средой для вирусов и грибков. Своевременная замена салонного фильтра предотвращает этот процесс.

    Как поменять фильтр в салоне. Процедура разбита на следующие последовательные этапы:

    • прямое приготовление;
    • , обеспечивающий доступ к локации;
    • демонтажные манипуляции с использованным фильтром;
    • установка нового компонента.

    Замена

    1. После открытия капота LADA Granta отверткой Phillips открутите два винта, расположенные на поверхности изоляционного материала кузова.
    2. Фильтр расположен прямо за двигателем. Элемент зафиксирован в вертикальном положении.
    3. Для обеспечения свободы доступа отодвигаем уплотнительную резинку и снимаем патрубок вакуумного усилителя (это помеха при установке фильтра обратно).
    4. После перемещения шумоизоляционного материала обеспечивается доступ к пластиковой крышке элемента. Снимается при открытии имеющейся защелки.
    5. Извлекаем фильтр из пазов, потянув за специальный «язычок».
    6. Предполагается, что при установке элемент будет слегка сжат (для удобства).

    Важно! Фильтр устанавливается только в одном положении, которое обозначено на соответствующей боковой части отметкой, нанесенной в виде надписи с логотипом в виде стрелки.

    Итак, теперь вы знаете, как менять фильтр.

    Мощность

    Замена салонного фильтра на отечественную LADA Granta выглядит очень просто. Если использовать отвертку с заданным профилем наконечника, то на всю «операцию» потребуется не более 15 минут временного ресурса. Момент, требующий небольшой концентрации внимания, — установка «свежего» фильтра в намеченном месте. Это связано с обеспечением достаточного пространства для доступа.

    Своевременно заменять салонный фильтр в LADA Granta, не пренебрегая рекомендацией выполнять эту процедуру не реже одного раза в полгода. Это позволит добиться завидной чистоты воздушной среды в салоне и исключить появление неприятных сюрпризов при работе такого сложного агрегата, как система кондиционирования.

    Принцип работы, способ замены. Процесс замены ремня ГРМ на ладу Гранта натяжитель ремня ГРМ 8 клапанов

    Вчера к нам приехал один из наших постоянных клиентов на недавно приобретенной Калине второго поколения с заменой ремня ГРМ, ролика и помпы плюс все жидкости, но об этом в другой статье.Этот движок также был установлен на Гранту, поэтому данная статья будет актуальна и для нее. По спидометру 60 000 и я считаю, что для этого двигателя это оптимальный интервал замены, хотя во всех справочниках написано около 75 000.

    Сразу оговоримся, что при обрыве ремня ГРМ на этой машине гнет клапан. Рекомендуется проверять состояние ремня каждые 15000 километров.

    Для работы нам понадобится набор ключей и головок, а также шестигранник на 5 и ключ для натяжного ролика.Вся процедура занимает около полутора часов.

    Двигатель аналогичен восьмому.

    Сначала снимаем защиту, сливаем тосол и можно для удобства снимать правое переднее колесо. Далее ослабляем контргайку натяжителя ремня генератора. Откручиваем шпильку натяжителя головкой на 10 и снимаем ремень.

    Откручиваем четыре болта с шестигранником на 5 и снимаем верхнюю защитную крышку ремня ГРМ.

    Устанавливаем верхнюю мертвую точку (ВМТ).Закручиваем коленвал за болт крепления шкива по часовой стрелке до совпадения метки со звездочками распредвала и картером ГРМ.

    Выкрутить болт крепления шкива коленчатого вала. Блокируем колеса упорами, затягиваем ручник, включаем пятую передачу и легким движением ключа с полутораметровым удлинением трубы откручиваем этот болт.

    Снимите защитную шайбу.

    На звездочках коленчатого вала отметки должны совпадать с выходом масляного насоса.

    Хвала конструкторам АвтоВАЗа, наконец-то на двигателях появились ролики с индикатором натяжения, теперь нет необходимости натягивать его на глаз и проверять натяжение перекручиванием ремня, не прошло и тридцати лет с момента изобретения такого дизайн. Откручиваем болт натяжного ролика и демонтируем последний, а также снимаем старый ремень ГРМ. На фото видно, что ремень натянут, так как метки натяжения разошлись, при контроле за состоянием ремня ГРМ, если вы это видите, вам просто нужно его подтянуть.

    Для замены помпы необходимо снять звездочку распредвала, а также открутить несколько болтов внутреннего кожуха и снять его.

    Три болта вниз и замена помпы. Зеленая стрелка указывает отверстие под болт натяжного ролика.

    Поменяв водяную помпу, приступаем к установке нового ремня ГРМ.

    Ставим на место кожух и звездочку распредвала. Проверяем совпадение всех надписей, они были упомянуты выше.Ставим натяжной ролик, но болт не затягиваем. Надеваем новый ремень, соблюдаем направление вращения, сначала на звездочке коленвала, распредвале, натяжном ролике и помпе, последние можно поменять местами. Натягиваем ремень ГРМ. Специальным ключом поверните ролик против часовой стрелки, как указано на его корпусе …

    … до совпадения отметок и затяните болт.

    Проверяем коленвал на два оборота и еще раз проверяем совпадение меток и натяжение ремня.

    Устанавливаем все детали в порядке, обратном снятию, заливаем антифриз и запускаем. Нет ничего проще.

    Удачи на дорогах. Ни гвоздя, ни жезла!


    Итак, вы обнаружили дефект или требуется плановый ремонт. Замена осуществляется поэтапно только при остывшем моторе:

    1. Отсоедините аккумулятор от вашей Lada Granta.
    2. Снимите датчик положения коленчатого вала. Поместите датчик в чистое место, например на полку, без стальных опилок или масла.
    3. Поместите поршень первого цилиндра в верхнюю мертвую точку.
    4. Проверните коленчатый вал до тех пор, пока метка на его шкиве не совместится с выступом на крышке привода.
    5. Снимите заглушку со смотрового стекла (находится на картере сцепления) и проверьте положение вала. Если вы все сделали правильно, в окошке появится отметка напротив слота. Зафиксируйте маховик отверткой (она должна быть зажата между зубцами).
    6. Выкрутите шкив привода генератора, снимите его с оси и снимите шайбу.
    7. Снимите крышку привода ГРМ.
    8. Ослабьте натяжной ролик (он должен вращаться).
    9. Снимите ремень со всех шкивов и снимите.
    10. Если помимо установки ремня ГРМ нужно снять натяжной ролик и заменить его новым, то откручиваем крепежный болт, а затем снимаем ролик непосредственно с ним.
    11. Перед установкой нового ролика проверьте, действительно ли нужна замена. Для этого возьмитесь за металлический центр этого механизма и поверните пластиковую деталь.В исправном узле движется плавно, без заеданий.
    12. Осмотрите насос и начните сборку механизма газораспределения. Установите ролик в верхнее отверстие на блоке цилиндров, но не затягивайте полностью болт, фиксирующий эту часть привода.
    13. Установите ремень так, чтобы он правильно двигался на всех шкивах и роликах. Для того, чтобы ремень ложился правильно, после наложения на шкив коленчатого вала (предварительно его нужно установить на место) подтяните обе части детали.Постарайтесь равномерно распределить нагрузку.
    14. Дальняя часть ремня ГРМ должна лежать на шкиве помпы и заходить за натяжной ролик (на этом этапе сверьтесь со схемой), а ближняя должна аккуратно ложиться на зубчатую часть распредвала.
    15. Слегка поверните шкив распределительного вала (в направлении меньшего хода), чтобы зубцы ремня совпали с выемками на нем. С помощью гаечного ключа поверните натяжной ролик против часовой стрелки.

    После замены проверьте натяжение ремня ГРМ.Чрезмерная нагрузка в ней на Lada Grant чревата выходом из строя помпы системы охлаждения. Кроме того, если ремень будет слишком натянут, он может очень быстро выйти из строя.

    Ослабленный ремень может привести к сбою фаз газораспределения. Поверните коленчатый вал вправо, чтобы синхронизирующие метки совпали. Затем соберите шкив генератора. Помните, что на модели Лада Грант при снятом ремне проворачивать валы категорически запрещено. Настройка выполняется только тогда, когда замена уже произведена.

    Все последние модели переднеприводных автомобилей, выпускаемые автомобильным заводом в Тольятти, имеют зубчатый ремень в механизме ГРМ. Lada Granta полностью относится к этим моделям.

    Автомобиль комплектуется несколькими модификациями двигателей, которые могут иметь 8 или 16 клапанов в ГБЦ. Многие владельцы обслуживают и ремонтируют данную модель самостоятельно, поэтому им будет полезно узнать, как поменять ремень ГРМ на Лада Гранта с 8 клапанами.

    моторов Lada Granta с 8 клапанами в ГБЦ имеют индекс 11183 и 11186. Первый из них начали выпускать в 2004 году, второй позже, а именно в 2011 году. Мощность агрегата «83» составляет 82 лошади, на 87 л.с. для модификации «86». Двигатель 11186 — это улучшенная модель двигателя «83». В нем используется облегченная шатунно-поршневая группа. Удалось добиться уменьшения массы поршневой группы почти на 30%. Головка блока цилиндров подвергается специальной термообработке, что увеличивает ее прочность и износостойкость.

    А также получил некоторые изменения в системе охлаждения силового агрегата. Юбки облегченных поршней покрыты графитовой смазкой, что позволяет избежать появления задиров на цилиндрах непрогретого двигателя. Степень сжатия «86» двигателя составила 10,5 против 9,6 у модификации «83». Прокладка ГБЦ у нового двигателя теперь тоньше, она равна 0,43 мм против 1,2 у старой модели. Был увеличен диаметр впускных клапанов, что улучшило наполнение цилиндров топливовоздушной смесью.

    Клапан гнет

    Эта проблема, к сожалению, присутствует на Lada Granta. Он появился с начала производства первых автомобилей с передним приводом ВАЗ 2108. Позже рабочий объем силового агрегата этой модели был увеличен, он стал равным 1,5 литра. Индекс двигателя стал 21083, у которого поршни имеют выемку в головке. Это позволило исключить встречу поршней с клапанами при обрыве зубчатого ремня в ремне ГРМ или при его неправильной установке.Именно этот силовой агрегат был взят за основу двигателя для Гранты, поэтому клапаны не гнулись.

    Модернизация этого мотора до модели 11186 предусматривает установку облегченных деталей шатунно-поршневой группы. Поршень стал короче по высоте, что не позволяет делать выемки в головке во избежание встречи с клапаном. Поэтому обрыв зубчатого ремня всегда сопровождается повреждением клапанов на 8-ми клапанной Гранте, иногда шатунов, поршней.Эта проблема сопровождает все последующие модификации двигателей для Lada Grant.

    Порядок замены

    Многие владельцы данного автомобиля предпочитают проводить эту операцию в специализированных мастерских, но некоторые делают это сами. В этой процедуре нет ничего сверхсложного, нет необходимости приобретать специальное оборудование или приспособления. Заменить зубчатый ремень в гараже можно самостоятельно. Вам потребуется подготовить набор гаечных ключей, монтажную лопату, домкрат, опору для тела, противооткатные упоры, перчатки и тряпки.Плоскогубцы с круглым концом подходят в качестве ключа для регулировки натяжного ролика.

    Замена ремня ГРМ на Лада Грант производится примерно в следующей последовательности:

    1. Автомобиль устанавливается над смотровой ямой или на ровной поверхности, трос ручного тормоза затягивается, под задние колеса устанавливаются колодки.
    2. Открыть капот моторного отсека, отсоединить клеммы от АКБ.
    3. Приводной ремень генераторной установки будет мешать работе, поэтому его снимают.
    4. Теперь на «5» с шестигранным номером откручиваем четыре винта, которыми крепится передний защитный кожух привода ГРМ.
    5. Чтобы случайно не повредить датчик положения коленчатого вала, его следует снять с головки блока цилиндров и отложить в сторону. Не допускайте попадания металлических опилок на датчик, они могут исказить его показания в будущем.
    6. Далее необходимо установить поршень первого цилиндра в положение верхней мертвой точки.
    7. Снятию зубчатого ремня препятствует приводной шкив генератора на коленчатом валу, который необходимо снять.Для этого оторвите колесные болты правого переднего колеса, приподнимите кузов автомобильным домкратом.
    8. Под кузов установлена ​​подставка, колесо снято, защитный щиток на брызговике.
    9. Нужен помощник для снятия шкива коленвала. Попросите его включить пятую передачу и сильно нажать на педаль тормоза. Некоторые специалисты вставляют мощную отвертку в люк на крышке КПП между зубьями маховика.
    10. Приложив усилие к головке «17» откручиваем болт, снимаем шкив с коленвала.
    11. Опять нужен пятый шестигранник, которым нужно открутить три винта нижнего корпуса ГРМ, после чего можно снять защиту.
    12. Теперь необходимо ослабить болт крепления натяжного ролика, лучше всего гаечный ключ на «15». После этого ролик повернется, ослабит натяжение приводного ремня, который легко снимается с зубчатых колес и вынимается из моторного отсека.

    Важно! После этого нельзя проворачивать коленвал двигателя так, чтобы поршни не соприкасались с клапанами.

    Обычно заменяют ремень вместе с натяжным роликом и насосом охлаждающей жидкости, поэтому их необходимо снимать с блока цилиндров. Под роликом находится регулировочная шайба, которая при сборке устанавливается обратно. При снятии помпы в заранее подготовленную емкость заливается определенное количество антифриза. Установка нового ремня ГРМ производится в обратной последовательности. Обратите внимание, что вам необходимо проверить положение всех меток совмещения на коленчатом и распределительном валах, блоке цилиндров и картере ГРМ.

    Установочные метки

    Это важная процедура при замене ремня ГРМ, поэтому к ней нужно отнестись серьезно. Этот двигатель имеет четыре метки синхронизации. Две на шестернях коленчатого и распределительного валов, одна на блоке цилиндров в районе коленчатого вала, последняя на металлическом защитном кожухе. Еще две отметки расположены на маховике и картере коробки передач. Они будут хорошо видны при снятии резиновой заглушки. Отметки на маховике и кожухе коробки будут указывать на положение поршня первого цилиндра в верхней мертвой точке.

    Поверните коленчатый вал ключом на «19» по часовой стрелке до совпадения всех отметок на механизме. Коническая канавка или отметка прилива на шкиве распределительного вала будет горизонтальной и совмещена с выступом на кожухе. Метка на шкиве коленчатого вала будет выглядеть строго вертикально и совпадать с меткой на блоке цилиндров.

    Напряжение

    Установленный новый зубчатый ремень необходимо натянуть до требуемых параметров. Перед этим обязательно еще раз проверьте положение меток совмещения, если с ними все в порядке, можно натянуть привод.Для этого поверните натяжной ролик против часовой стрелки до совпадения отметок на нем. Одна отметка в виде выреза находится на внешней обойме, вторая — на внутренней в виде выступа. Повернуть натяжной ролик можно специальным ключом-круглогубцами.

    Некоторые мастера вставляют сверла подходящего диаметра в отверстия на подвижной части ролика. Между ними отвертку как рычаг и поверните зажим до совпадения меток. Затем можно затянуть винт, фиксирующий натяжной ролик.После того, как все работы проделаны, необходимо вручную провернуть коленвал на несколько оборотов, следя за тем, чтобы метки не сместились. Затем вы можете установить защитную крышку.

    Сколько времени нужно на замену

    Заводская инструкция по эксплуатации автомобиля рекомендует замену зубчатого ремня при пробеге 75 тыс. Км. Эта норма не всегда выполняется собственниками; для этого есть веские причины. Время до замены диска зависит от многих факторов.Это качество используемых деталей, условия эксплуатации автомобиля, техническое состояние двигателя. При каждом техническом обслуживании следует проверять натяжение и состояние привода ГРМ. При появлении трещин, расслоения или других повреждений ремень меняют.

    При большом пробеге машины происходит естественный износ шкивов коленчатого и распределительного валов, это значительно сокращает срок службы всего привода ГРМ. А также привод боится попадания моторного масла в зону срабатывания ремня.Смягчает ее структуру, зубы легко срезаются. Если машина долгое время стояла на месте, также лучше заменить привод в связи с его старением. Большинство владельцев специалисты рекомендуют менять ремень после пробега 50 тыс. Км.

    Какой комплект купить

    Кроме зубчатого ремня обзаводятся натяжным роликом, насосом охлаждающей жидкости. Основным поставщиком резинотехнических изделий является завод РТИ в Балаково. Хорошо зарекомендовали себя товары компаний GATES, BOSCH, DAYCO, CONTITECH.При замене насоса в системе охлаждения двигателя вам понадобится антифриз для доливки.

    Служит для своевременного открытия и закрытия арматуры в головке блока. Такой механизм есть и на Lada Grant. Однако существует два типа привода — цепной и ременной. Если говорить о «Гранте», то здесь применяется второй тип. Надо сказать, что такой привод тише, но менее надежен. Цепь всегда сложнее порвать, чем ремень. Однако, если вы соблюдаете интервал замены, вы можете не столкнуться с перерывом.А в сегодняшней статье мы уделим внимание замене ремня ГРМ «Лада Грантс».

    Как это работает?

    Принцип работы этого элемента довольно прост. Сначала расскажем о локации. И этот элемент находится сбоку от шкива коленвала. Поскольку у «Гранты» двигатель поперечный, ремень находится сбоку от правого переднего колеса. В отличие от цепи, он не требует смазки и поэтому может устанавливаться открыто. Ремень имеет с внутренней стороны специальные зубья.Благодаря им элемент взаимодействует сразу с несколькими частями:

    Таким образом, когда первый вал вращается в цепной реакции, остальные элементы также вращаются. А поскольку ремень гибкий, его натягивают специальным роликом для качественного зацепления. Таким образом, два вала вращаются синхронно. Недопустимо, чтобы ремень перескакивал через один или несколько зубцов. В противном случае настройки впуска и выпуска мгновенно теряются. Это сразу же отразится на характере поведения автомобиля.Автомобиль утроится, потребляет больше топлива и не потянет.

    Как часто менять?

    По регламенту замену ремня ГРМ на Лада Грант с 8-клапанным двигателем требуется каждые 75 тысяч километров. Однако производитель рекомендует проверять его состояние каждые 15 тысяч километров. Часто бывает, что ремень потерял натяжение или приобрел признаки износа раньше положенного срока.

    Признаки износа

    Как понять, что данный элемент вышел из строя? Первый признак, свидетельствующий о необходимости замены ремня ГРМ на «Гранте» — это значительный износ материала.Обычно это происходит из-за плохой работы подшипника промежуточного ролика или отклонения его положения. Так, при повышенной влажности ремень может прыгать на один или несколько зубцов.

    Важно внимательно проверить внешнее состояние. Итак, ремень необходимо заменить при наличии на нем остатков тканей, трещин или расслоений. Чем больше таких дефектов, тем выше вероятность того, что элемент внезапно сломается. Не используйте слишком жесткий ремень. Об этом будет свидетельствовать характерный блеск элемента.Из-за этого не обеспечивается качественный контакт со шкивом коленчатого вала двигателя. Какой марки выбрать новый ремень? Приобретать оригинал не обязательно. Есть несколько хороших аналогов:


    Но не стоит покупать слишком дешевые аналоги. В противном случае никто не может гарантировать, что такой ремень прослужит указанные производителем 75 тысяч километров.

    Подготовка

    Для работы нам понадобится стандартный набор инструментов, новый ремень с роликом, а также роликовый ключ.Не будет лишним купить новый ремень генератора, так как мы его тоже будем снимать.

    Работы на котловане проводить не нужно. Для удобства достаточно открутить правое переднее колесо. Итак, вам понадобится дополнительный колесный ключ и домкрат. Перед подъемом установите стабилизаторы поперечной устойчивости под машиной.

    Начало работы

    Итак, сначала нам нужно снять пластиковую защитную крышку. Это можно сделать с помощью шестигранного ключа на 5 штук. Крышка крепится четырьмя винтами.Если на «Гранту» установлен мотор 11183, то здесь для этого понадобится ключ на 10. Им просто нужно открутить три болта крепления. Далее снимается датчик положения коленвала. Крепежный винт откручивается ключом на 10. ДПКВ также демонтирован.

    Установка меток

    Теперь важно установить коленвал и распредвал по меткам. Для этого включите нейтраль. Снимаем резиновую накладку на картере (ближе к сцеплению). Нам нужно совместить отметки в прорези шкалы и на маховике.Затем последний закрепляется отрицательной отверткой. Сам коленчатый вал можно вращать шпонкой на 17 или 19 (в зависимости от конкретного типа мотора). Лучше выполнять эту операцию вдвоем. Пока один вращает вал, второй фиксирует положение меток. Главное, чтобы они точно совпадали.

    Что дальше?

    Затем вам нужно будет снять ремень генератора. Только так можно добраться до ремня ГРМ «Лада Грантс». Ослабляем натяжитель и снимаем привод генератора.Ключом на 13 нужно ослабить нижний болт крепления и открутить гайку верхнего крепления. Болт тоже можно снять. Корпус генератора прижимается к двигателю с помощью проволоки и фиксируется.

    Замена ремня

    Когда маховик зафиксирован, с помощью ключа на 19 или 17 отверните болт, который удерживает шкив привода генератора. Шкив демонтируется вместе с шайбой.

    • Если это двигатель серии 11183, ослабьте стопорную гайку ключом на 17.Сам ролик вращается по часовой стрелке.
    • На других двигателях используется головка 15. Он используется для откручивания болта примерно на три оборота. Тогда ролик самостоятельно освободит ремень.

    Осталось снять старый ремень и установить новый. ГРМ на «Ладе Грант» с 8-клапанным двигателем производится в обратном порядке. Чтобы затянуть внешнюю часть ролика, поверните его против часовой стрелки. В этом случае две метки (прямоугольные) должны совпадать друг с другом. После установки элемента стоит еще раз проверить метки.

    Что касается ремня генератора, то он устанавливается в следующей последовательности:

    • Сначала монтируется сам генератор.
    • Далее ремень надевается на шкивы.
    • Включив пятую передачу, откатывают машину назад.

    Вот и все. Замена ремня прошла успешно. Вы можете приступить к полноценной эксплуатации автомобиля.

    О моментах затяжки

    При замене ремня ГРМ на автомобиле Лада Грант важно использовать динамометрический ключ.Так мы точно будем знать, что болты и все соединения правильно затянуты и, что самое главное, не перетянуты. В зависимости от типа детали на ключе выставляются следующие значения:


    Обратите внимание: при замене ремня ГРМ на «Лада Грант» с 8-клапанным двигателем сначала отрегулируйте натяжение на ролике. И после этого болт крепления затягивается.

    Вывод

    Итак, мы выяснили, как производится замена ремня ГРМ на Лада Гранта.Как видите, эту операцию можно выполнить самостоятельно. В общей сложности на замену уйдет около двух часов. Но если работа выполняется не в первый раз, то время можно сократить вдвое.

    Сроки замены Лада Гранта 8 клапанов требуется раз в 75 тыс. Км пробега. Если проигнорировать плановую замену ремня, натяжного ролика, а иногда и помпы (помпы охлаждающей жидкости), то можно нарваться на серьезный ремонт двигателя Лада Гранта. Ведь обрыв ремня ГРМ практически всегда приводит к повреждению клапанов, седел клапанов и даже поршней.Поэтому к ГРМ нужно относиться очень осторожно. Раз в 15 тысяч обязательно осмотреть ремень на предмет обрывов, трещин, отслоения или смазывания.

    Подробная схема привода ГРМ Лада Гранта подробнее .

    • 1 — шкив зубчатый коленвала
    • 2 — зубчатый шкив насоса охлаждающей жидкости
    • 3 — натяжной ролик
    • 4 — задняя защитная крышка
    • 5 — зубчатый шкив распределительного вала
    • 6 — ремень ГРМ
    • A — выступ на задней защитной крышке
    • В — отметка на шкиве распредвала
    • С — отметка на крышке масляного насоса
    • D — отметка на шкиве коленчатого вала.

    Чтобы заменить ремень ГРМ, мы должны снять ремень генератора или вспомогательный ремень для Гранта с кондиционером. Шестигранником «5» открутите четыре винта крепления передней верхней крышки привода ГРМ и снимите пластиковый кожух.

    Чтобы не повредить датчик положения коленчатого вала, снимите и его. При выключенном зажигании отожмите фиксатор колодки жгута проводов и отсоедините колодку от разъема датчика. Головкой на «10» откручиваем болт крепления датчика.

    Вынимаем датчик из приливного отверстия крышки маслонасоса и откладываем в место, где нет стальных опилок, способных впоследствии нарушить работу датчика.

    Перед демонтажем ремня необходимо проверить фазу газораспределения двигателя — установить поршень 1-го цилиндра в положение ВМТ (верхняя мертвая точка) такта сжатия. Головкой «17» поверните коленчатый вал по часовой стрелке за болт крепления ведущего шкива генератора до тех пор, пока метка 1 на зубчатом шкиве распределительного вала не совместится с приливом 2 на задней крышке привода ГРМ.

    Чтобы убедиться, что коленчатый вал находится в правильном положении, снимите резиновую заглушку смотрового стекла в верхней части картера сцепления. Риск 2 на маховике должен располагаться напротив прорези 1 шкалы, которая видна в окошке крышки картера сцепления.

    Перед тем, как открутить болт крепления шкива привода генератора, просим помощника зафиксировать коленвал от проворачивания, вставив отвертку через окошко в картере сцепления между зубьями маховика.

    Головкой «17» отверните болт крепления ведущего шкива генератора, снимите шкив и шайбу.

    С помощью шестигранника «5» открутите три винта, крепящие переднюю нижнюю крышку привода ГРМ. Снимаем крышку.

    С помощью гаечного ключа на 15 ослабьте затяжку болта натяжного ролика.

    Это вращает натяжной ролик и ослабляет натяжение ремня. Снимите ремень ГРМ со шкивов коленчатого и распределительного валов.Вытаскиваем ремень из моторного отсека Гранты.

    Внимание! После снятия ремня ГРМ нельзя поворачивать коленчатый вал и распределительные валы, чтобы поршни не застряли в клапанах. Размеры ремня ГРМ Лада Гранта с 8-клапанным двигателем — ширина 17 мм, количество зубьев 113.

    Для снятия натяжителя ремня ГРМ отверните болт и снимите натяжитель вместе с болтом.

    Вращаем пластмассовый зажим ролика, удерживая его за эксцентрик.Ролик должен вращаться тихо, равномерно и без заеданий. В противном случае ролик необходимо заменить.

    Заодно проверить исправность насоса охлаждающей жидкости можно покрутив и покачав его за шкив. Устанавливаем натяжной ролик на место, полностью не затягивая болт его крепления. Для различных модификаций двигателя в головке блока цилиндров делаются два резьбовых отверстия под болт натяжного ролика. Вверните болт крепления ролика в верхнее отверстие головки блока цилиндров.На фото ниже отверстие обозначено красной стрелкой.

    Установить ремень ГРМ Grant в обратном порядке. Перед установкой ремня убедитесь, что установочные метки коленчатого и распределительного валов совпадают. Ремень надеваем на зубчатый шкив коленчатого вала, затем стягиваем обе ветви ремня, надеваем заднюю ветвь на шкив насоса охлаждающей жидкости и запускаем ее через натяжной ролик, а переднюю ветвь надеваем на шкив распределительного вала.

    При необходимости поверните шкив распределительного вала в направлении наименьшего хода, пока зубцы ремня не совпадут с канавками шкива.Чтобы натянуть ремень, поверните натяжной ролик против часовой стрелки. Для этого вставьте стержни (диаметр 4 мм, расстояние между стержнями 18 мм) в пазы внешнего диска ролика специальным ключом (для наглядности показано на снятом ролике).

    Такой ключ применялся для регулировки натяжения ремня на всех переднеприводных ВАЗах, купить его можно в любом магазине автозапчастей.

    Также для регулировки натяжения ремня ГРМ Лада Гранта можно использовать плоскогубцы для снятия стопорных колец.Натягиваем ремень, поворачивая натяжной ролик против часовой стрелки до совпадения выреза внешнего диска ролика с прямоугольным выступом его внутренней втулки, и затягиваем болт крепления ролика с моментом 34–41 Нм.

    Чрезмерное натяжение ремня сокращает срок службы ремня и насоса охлаждающей жидкости и подшипников промежуточных роликов. Недостаточное натяжение ремня также приводит к его преждевременному выходу из строя и может стать причиной нарушения фаз газораспределения. Поворачиваем коленвал на два оборота по часовой стрелке.Проверяем натяжение ремня и совпадение меток ГРМ коленвала и распредвала. При снятом шкиве привода генератора удобно проверить правильность положения коленчатого вала, совместив метку 1 на зубчатом шкиве коленчатого вала с выступом 2 крышки масляного насоса. Фото для наглядности ниже.

    Если вы не уверены в своих силах, то работу по замене ремня на Лада Гранта можно доверить автосервису. Для двигателя с 8-клапанным механизмом ГРМ это дешевле, чем для версии с 16-клапанным двигателем.

    Когда надо поменять ремень ГРМ на лад гранта. Когда менять ремень ГРМ на ладу Грант Как проверить ремень ГРМ на Гранте

    Приветствую всех! Уверен, что данная статья будет очень полезна владельцам Lada Granta с двигателем 21116, устанавливаемым на автомобили с комплектацией «норма». Раньше этой статьи было 3, я их удалил и решил написать эту, чтобы не путать хронологию событий!

    Начнем с того, что моей машинке исполнился год.В этом году было мало и мало приятного. Я пробежал 31 тысячу километров. Основной пробег по МО Кашира, Ступино, Москва, несколько выездов в Тулу.

    Давно мучает странный стук двигателя на холодном. Особой паники не вызвал, так как двигатель прогрелся и постукивания пропали. А на 29000 км постукивания перестали пропадать после прогрева, и даже при трогании издавал треск. Генератор, выхлопная система, ШРУС, передний бампер и это далеко не полный список того, что я проверял.Помпа и автоматический натяжитель ремня ГРМ остались, открыли крышку, но ничего подозрительного не увидел. Я пошел в сервис, чтобы увидеть своих друзей более опытным взглядом. Насос сказал по звуку, открыл ГРМ и наверняка ремень ГРМ проходит по шкивам. Больше всего я боялся этой диагностики, так как запчастей на Ладу Грант нет вообще. Полазил по форумам и Drive2, нашел пару случаев, когда от приоры ставили помпу, говорили, что отличается только шириной шкива, да и то не сильно.

    Так вот надо было купить:

    Водяной насос 2170;

    Автоматический ролик натяжителя ремня ГРМ 2190;

    Ремень ГРМ 2190;

    К моему удивлению, ремень ГРМ на Грант был практически в каждом магазине, с роликом и помпой для засада грант, как и положено, сроки доставки заказа неизвестны.

    Попросил в магазине показать помпу от девятки и приоры, разницы не сразу заметил кроме ширины шкива и взял на себя горе от девятки.

    Почему нельзя поставить помпу от девятки на двигатель Лада Гранта 21116:

    Если беглым взглядом взглянуть на помпу ВАЗ-21116 и ВАЗ-2109 \ 14, уверяю, вы не заметите разницы , у помпы ВАЗ-2109 \ 14 будет немного другое рабочее колесо и не будет маленького резьбового отверстия для притягивания ГРМ, но это не проблема, самое главное отличие в зубьях шкива На ВАЗ- Двигатель 21116, шкив перекочевал с приоры ВАЗ-21126, только стал немного уже.На Приоре шкив идет с закругленными зубьями, а на ВАЗ-2109 \ 14 — с прямоугольными, а уж тем более они на пару миллиметров выше, установив эту помпу на двигатель ВАЗ-21116, вы толкнете ремень грм и он прослужит в десять раз меньше. На момент покупки я этого не знал и купил от девятки.

    Каток, который я купил от приоры Pilenga PT-P 1570, на глаз оказался таким же, за исключением отверстия под болт сбоку подушки двигателя. Когда я снял собственное видео, я понял, что есть большая разница! Во первых родной каток 21116 большего диаметра, а во вторых он уже есть.Пластиковый корпус ролика приора шире и цепляется за двигатель, решается это растиранием лишнего болгаркой или как у меня болгаркой. Отличие есть еще в одной детали, толщине металлического корпуса у ролика. каток шире, чем у приоры, а потому если собираетесь делать ставку от приоры все равно надо ставить шайбу. Вывод мой не оптимистичный: так как каток у приоры меньшего диаметра, чем у гранты, необходимо при растяжении катка тянуть дальше метки и тем самым фактически лишать его диапазона автоматической регулировки.

    Замена ремня ГРМ, ролика и помпы. Попытка №1

    Собрал все купленные детали в пакет:

    Натяжитель автоматический роликовый 21126 (2170) Pilenga PT-P 1570;

    Водяной насос ВАЗ-2109 \ 14 ТЗА 210010-75

    Итого 2540 руб.

    Раньше мне самому не приходилось менять ГРМ, некогда было учиться и я решил загнать в сервис. Там все было разобрано. Достали помпу, люфт есть, но не так критично! Почему прогнулся ремень ГРМ? Пока не ясно.

    Подшипник тоже в отличном состоянии, ремень тоже! Сунул в багажник родные запчасти, поставил новые. Завожу машину и ура! Стук ушел, ремень сидит как перчатка! Я заплатил 2000 рублей и счастливый поехал домой.

    В общей сложности замена расходников ГРМ обошлась мне в 4500 рублей, спасибо ребятам с АвтоВАЗа.

    Вы наверное думали, что все нормально, помпу заменили и машина теперь как новая. Нет, нет и нет.

    Приехал домой и решил осмотреть подкапотное пространство, все нормально кроме перетянутого ремня генератора ну нечего отрегулировать натяжение, проверить и ехать домой (запомните этот момент).

    Утром начал заводиться и опять бл * стук появился, попробовал тронуться, потом тоже треск! Разочарованный, я приступил к работе. На работе много размышлений на эту тему и тут натыкаюсь на форум и картинки в интернете! Показывает фото водяных насосов и шкивов от приоры и девятки и показывает разницу! Просто у меня в голове ураган мыслей. После работы лечу домой, открываю ремень ГРМ, и да … ремень явно глушен.На лицевой стороне видны отпечатки зубов … снова меняются.

    Замена ремня ГРМ, ролика и помпы. Попытка №2

    В этот раз дождался выходных, момент нахождения не той помпы был в четверг. До субботы накатал чуть больше 200 км. В общей сложности проехал около 400 км. В этот раз я решил все поменять сам. Снова пошел в магазин и купил помпу и ремень ГРМ.

    Сложил детали в сумку и поехал домой, день был солнечный, решил даже не загонять их в гараж.

    Водяной насос ТЗА 21121307010-75

    Ремень ГРМ ВАЗ 21116 (2190) Оригинал 5670XS

    Итого 1030р + 740р = 1770 руб.

    Описывать процесс замены помпы и ремня ГРМ не буду, так как есть много литературы по ремонту и эксплуатации которой, кстати, сам пользуюсь.

    Чем отличается водяной насос ВАЗ-21116 от ВАЗ-21126.

    Они отличаются только шириной шкива, да и то немного.Ролик оставил его семье, с Приоровским не рисковал, тем более, что состояние его было идеальным.

    В качестве ключа для натяжения ролика я использовал съемник стопорных колец с плоскими губками. Метки времени выставили сразу и без проблем.

    Увидел у кого-то на Drive2, что помпа от приоры цепляется при плотно затянутом ГРМ, этого не наблюдал, на глаз даже определил небольшой зазор между шкивом помпы и кожухом.

    Стук и треск двигателя при трогании с места.

    Разобрались с ГРМ, завели двигатель, ремень сидит как вкопанный, в машине однозначно понравилась помпа от приоры! =) НО! При трогании был стук и треск … улыбка исчезла с лица, но появилась через 10 минут ковыряния в подкапотном пространстве! Помните, я сказал вам запомнить момент, когда я ослабил натяжение ремня генератора! Так! Первый раз в сервисе поменял ГРМ, ремень генератора мне очень сильно натянули и он давил на генератор и звук соответственно пропал! Придя домой, я снял напряжение и утром снова появился звук! Вот и вся загадка!

    Теперь решение: мой взгляд устремился в пустое отверстие, в которое должен сидеть нижний болт крепления генератора к кронштейну (длинный болт), болта там нет! Блин, я знал, что найду откуда треск и что это не конструктивная особенность машины! Стал смотреть и понимать, болт почему то открутился и улетел.Конечно, за спиной были грехи, когда я забыл подтянуть детали, но это было раза 3-4 в моей жизни, здесь это невозможно, так как я никуда не торопился и ковырялся в поисках удовольствия!

    Поставил новый болт, поставил контрольную шайбу, теперь думаю никуда не денется! Как я раньше сам этого не замечал ?! Завелась и тишина, машина работает как новая! Вау, а она меня трахнула.

    В этой статье есть еще одна неразгаданная загадка! Почему ремень ГРМ ходил по шкивам, я бы не сказал, что моя помпа сильно убита.Ну ладно теперь все работает тьфу-тьфу. Живу за городом, до автомагазинов на общественном транспорте проблематично, хорошо, что есть Daewoo Matiz 1.0 Best, выручает.

    Купил на Гранту одновременно. Пробег на Матизе 24540 км, только масло и фильтры. Почему у узбеков лучше, чем у нас?

    В общей сложности при всех косяках смена ГРМ обошлась мне в 6270 руб … жесть. Машина пробегала всего 30 000 км.

    Ну почему молчат французы и японцы? Рено + Ниссан айыыы! Почему на полках магазинов нет запчастей? Почему ремень ГРМ пробежал по шкивам на 30 000 км?

    Выпуск отечественной модификации Lada Grant осуществляется уже несколько лет.Автомобиль завоевал значительный авторитет благодаря приемлемому качеству и уровню характеристик, а также наличию нескольких различных версий оборудования.

    Сегодня разберемся, когда менять ремень ГРМ, а также какой ремень ГРМ лучше.

    Некоторые общие положения ремня

    ГРМ в любом двигателе служит для обеспечения своевременного всасывания приготовленной смеси и выхода выхлопных газов. Состав этого узла подразумевает наличие таких элементов: распределительный вал

      и коленчатый вал
    • ;
    • Сами клапаны с сальниками, пружинами, направляющими втулками и другими деталями.

    Какой ремень ГРМ лучше? Отдельно в указанном механизме позиционируется ременной механизм, выполняющий роль связующего звена между распределительным валом (или двумя) и коленчатыми валами. Именно ременная передача способна обеспечить синхронизацию работы элементов, входящих в комплект ГРМ.

    Найти этот важный элемент на моторе не составит особого труда. Для этого достаточно открыть крышку капота Lada Granta и перед вами появится закрытый специальным кожухом.Эта защита предотвращает загрязнение и попадание посторонних предметов и грязи.

    Конструкция ременного механизма включает резиновую основу и рабочую внутреннюю поверхность, выполненную в виде зубцов с определенным шагом.

    Какой заводской регламент АвтоВАЗа по замене?

    Автомобили модельного ряда Lada Granta комплектуются различными вариантами силового агрегата. Некоторые из них не обходятся без проблем при неприятной поломке ременной передачи.Это вызвано столкновением поршней с клапанами, в результате чего последние погнуты, и мотор требует ремонта.

    Возможность изгиба (в случае поломки) отсутствует на версии двигателя 11183-50, которая оснащена стандартным оборудованием.

    Еще не маловажный вопрос: когда менять ремень ГРМ? Чтобы исключить эту неприятную ситуацию, производитель намеренно регламентировал периодичность обязательной замены указанного «расходного материала».Ответ на вопрос, сколько поменять ремень ГРМ от компании производителя — через 15 тысяч километров пробега. Это требование распространяется как на 8-клапанные двигатели, так и на их 16-клапанные модификации.

    Даже не смотря на оснащение модификации «21116» мотором с импортной головкой, в случае обрыва ремня его ожидает аналогичная печальная участь.

    Производитель не рекомендует самостоятельно выполнять процедуру проверки состояния ремня и его замены.А потому, когда пришла пора менять ремень ГРМ, стоит обратиться в сервисный центр. В случае выявления факта рукописного выполнения указанной операции велика вероятность лишения владельца возможности гарантийного обслуживания. На самостоятельную замену производитель дает разрешение на:

    • салонный фильтр;
    • аналогичный элемент для системы впуска.

    Однако самостоятельно многие автовладельцы все же проводят замену, но не все новоиспеченные водители знают, сколько нужно менять ремень ГРМ, и какой ремень ГРМ лучше остальных.

    Многие владельцы Lada Granta, особенно оснащенных 16-клапанными версиями силовых агрегатов, рекомендуют не ждать заветной отметки в 60 тыс. Км. Это связано с возможностью использования некачественных комплектующих, способных спровоцировать износ заменяемых элементов после пробега 20 тыс. Км.

    Этот факт побуждает многих «Грантаводов» прибегать к использованию продукции хорошего качества, и многие из них на вопрос, какой ремень ГРМ лучше, отвечают именно от производителя «Гейтс».Но отметим, что бывают подделки запчастей этой марки, в связи с чем рекомендуется останавливаться на приобретении товаров только у проверенных поставщиков.

    Если вы решили заменить компонент самостоятельно, не следует пренебрегать некоторыми из следующих рекомендаций. В частности, не забывайте соблюдать интервал, через сколько менять ремень ГРМ.

    После зацепки ремня необходимо его правильное натяжение. Это делается с помощью специального ключа. Некоторые «лидеры» возразят, мол, без него можно.Однако здесь очень проблематично решиться гарантировать качественный результат.
    Усилие, прикладываемое к ветви ремня (при повороте на угол 90 градусов), расположенной между двумя валами (обычно известными: распредвалы и коленчатые валы), не должно превышать 20 Нм, но и не должно быть меньше 15 Нм. Если в указанном интервале параметров нет «попадания», то это свидетельствует о неправильном натяжении ремня. Следствие одно — новая регулировка!

    Какие признаки износа ремня?

    Указанные факторы позволят точно определить момент начала повреждения ремня Lada Granta, что предотвратит неожиданное наступление его выхода из строя (обрыва).Когда менять ремень ГРМ, как понять, что он изношен?

    1. Среди основных признаков значительный износ материала. Этот факт легко спровоцирует пробуксовку или поломку «расходника» при незначительной нагрузке на двигатель или в условиях повышенной влажности воздуха.
    2. Появление износа часто спровоцировано нарушением правильного положения ролика по отношению к шкиву. Это подтверждается повышенным нагревом подшипника и торчащими в стороны тканевыми остатками изношенных кордов, которые используются для усиления резиновой основы ремня.
    3. Следующим признаком будет факт наличия трещин и расслоения. Чем больше таких дефектов, тем выше вероятность быстрого обрыва ремня.
    4. Если на задней поверхности появляется излишняя твердость, то наличие блеска может выдать ее. Этот фактор, связанный с потерей эластичности, указывает на потерю достаточного контакта между ремнем и шкивами.
    5. В процессе эксплуатации возможно удлинение поверхности ремня, что может спровоцировать его прыжки на зубья шкива вала.Замена ремня в этом случае однозначна.
    6. Выход из строя ролика, как прямое свидетельство неправильного положения ремня по отношению к его рабочей плоскости.

    Какие последствия обрыва?

    По договоренности никаких проблем с двигателем Lada Granta в 8-ми клапанной версии при обрыве ременной передачи не возникает только в версии 11183-50 агрегата. Остальные двигатели могут выйти из строя при указанном неприятном происшествии.
    В связи с этим среди Грантаводов развернулся спор о преимуществах двигателей LADA Granta с 16 и 8 клапанами, и в каком агрегате их больше.Ваша точка зрения тоже будет очень интересной.

    При обрыве ременной передачи распредвал останавливается в положении, соответствующем непосредственно моменту поломки. Коленчатый вал, напротив, может продолжать вращаться. Это заставляет поршни сталкиваться с клапанами, которые в данный момент находились в открытом положении. Далее последний гнется, но иногда происходит поломка днища поршня. Народным способом «кулак дружбы»!

    Основываясь на этом факте, специалисты склонны рекомендовать изменение комплекта ГРМ необходимого периода действия, ранее заявленного производителем.

    выводы

    Теперь вы знаете, сколько времени занимает замена ремня ГРМ. Несомненно, обрыв ремня LADA Granta — источник небывалых проблем. Это обстоятельство не означает, что нужно бездействовать. Ниже приведены некоторые рекомендации, цель которых — минимизировать указанный риск.

    1. Будьте очень осторожны при проверке ремня на износ. Данную операцию рекомендуется проводить через 10-15 тыс. Км.

    2. Не забывайте проверять состояние сальников.Дефект проявляется в виде характерных пятен под днищем автомобиля.

    3. Мигание лампы, регистрирующей давление масла в двигателе LADA Granta, может указывать на проблему. Если этот факт проявляется, мы срочно выключаем двигатель и принимаем меры по поиску источника поломки.

    4. Используйте только оригинальные запчасти, хотя процедуру контроля их состояния никто не отменял.

    Сроки замены Лада Гранта 8 клапанов требуется раз в 75 тыс. Км пробега.Если проигнорировать плановую замену ремня, натяжного ролика, а иногда и помпы (помпы охлаждающей жидкости), то можно нарваться на серьезный ремонт двигателя Лада Гранта. Ведь обрыв ремня ГРМ практически всегда приводит к повреждению клапанов, седел клапанов и даже поршней. Поэтому к ГРМ нужно относиться очень осторожно. Раз в 15 тысяч обязательно осмотреть ремень на предмет обрывов, трещин, отслоения или смазывания. Подробная схема привода ГРМ Лада Гранта подробнее .

    • 1 — шкив зубчатый коленвала
    • 2 — зубчатый шкив насоса охлаждающей жидкости
    • 3 — натяжной ролик
    • 4 — задняя защитная крышка
    • 5 — зубчатый шкив распределительного вала
    • 6 — ремень ГРМ
    • A — выступ на задней защитной крышке
    • В — отметка на шкиве распредвала
    • С — отметка на крышке масляного насоса
    • D — отметка на шкиве коленчатого вала.

    Чтобы заменить ремень ГРМ, мы должны снять ремень генератора или вспомогательный ремень для Гранта с кондиционером.Шестигранником «5» открутите четыре винта крепления передней верхней крышки привода ГРМ и снимите пластиковый кожух.

    Чтобы не повредить датчик положения коленчатого вала, снимите и его. При выключенном зажигании отожмите фиксатор колодки жгута проводов и отсоедините колодку от разъема датчика. Головкой на «10» откручиваем болт крепления датчика.

    Вынимаем датчик из приливного отверстия крышки маслонасоса и откладываем в место, где нет стальных опилок, способных впоследствии нарушить работу датчика.

    Перед демонтажем ремня необходимо проверить фазу газораспределения двигателя — установить поршень 1-го цилиндра в положение ВМТ (верхняя мертвая точка) такта сжатия. Головкой «17» поверните коленчатый вал по часовой стрелке за болт ведущего шкива генератора до тех пор, пока метка 1 на зубчатом шкиве распределительного вала не совместится с приливом 2 на задней крышке привода ГРМ.

    Чтобы убедиться, что коленчатый вал находится в правильном положении, снимите резиновую заглушку смотрового стекла в верхней части картера сцепления.Риск 2 на маховике должен располагаться напротив прорези 1 шкалы, которая видна в окошке крышки картера сцепления.

    Перед тем, как открутить болт крепления шкива привода генератора, просим помощника зафиксировать коленвал от проворачивания, вставив отвертку через окошко в картере сцепления между зубьями маховика.

    Головкой «17» откручиваем болт крепления ведущего шкива генератора, снимаем шкив и шайбу.

    С помощью шестигранника «5» открутите три винта, крепящие переднюю нижнюю крышку привода ГРМ. Снимаем крышку.

    С помощью гаечного ключа на 15 ослабьте затяжку болта натяжного ролика.

    Это вращает натяжной ролик и ослабляет натяжение ремня. Снимите ремень ГРМ со шкивов коленчатого и распределительного валов. Вытаскиваем ремень из моторного отсека Гранты.

    Внимание! После снятия ремня ГРМ нельзя поворачивать коленчатый вал и распределительные валы, чтобы поршни не застряли в клапанах.Размеры ремня ГРМ Лада Гранта с 8-клапанным двигателем — ширина 17 мм, количество зубьев 113.

    Для снятия ролика натяжителя ремня газораспределительного механизма отверните болт его крепления и снимите натяжной ролик вместе с болтом.

    Вращаем пластмассовый зажим ролика, удерживая его за эксцентрик. Ролик должен вращаться тихо, равномерно и без заеданий. В противном случае ролик необходимо заменить.

    Заодно проверить исправность насоса охлаждающей жидкости можно покрутив и покачав его за шкив.Устанавливаем натяжной ролик на место, полностью не затягивая болт его крепления. Для различных модификаций двигателя в головке блока цилиндров делаются два резьбовых отверстия под болт натяжного ролика. Вверните болт крепления ролика в верхнее отверстие головки блока цилиндров. На фото ниже отверстие обозначено красной стрелкой.

    Установить ремень ГРМ Grant в обратном порядке. Перед установкой ремня убедитесь, что установочные метки коленчатого и распределительного валов совпадают.Ремень надеваем на зубчатый шкив коленчатого вала, затем стягиваем обе ветви ремня, надеваем заднюю ветвь на шкив насоса охлаждающей жидкости и запускаем ее через натяжной ролик, а переднюю ветвь надеваем на шкив распределительного вала.

    При необходимости поверните шкив распределительного вала в направлении наименьшего хода, пока зубцы ремня не совпадут с канавками шкива. Чтобы натянуть ремень, поверните натяжной ролик против часовой стрелки. Для этого вставьте стержни (диаметр 4 мм, расстояние между стержнями 18 мм) в пазы внешнего диска ролика специальным ключом (для наглядности показано на снятом ролике).

    Такой ключ применялся для регулировки натяжения ремня на всех переднеприводных ВАЗах, купить его можно в любом магазине автозапчастей.

    Также для регулировки натяжения ремня ГРМ Лада Гранта можно использовать плоскогубцы для снятия стопорных колец. Натягиваем ремень, поворачивая натяжной ролик против часовой стрелки до совпадения выреза внешнего диска ролика с прямоугольным выступом его внутренней втулки, и затягиваем болт крепления ролика с моментом 34–41 Нм.

    Чрезмерное натяжение ремня сокращает срок его службы, а также срок службы насоса охлаждающей жидкости и подшипников промежуточных роликов. Недостаточное натяжение ремня также приводит к его преждевременному выходу из строя и может стать причиной нарушения фаз газораспределения. Поворачиваем коленвал на два оборота по часовой стрелке. Проверяем натяжение ремня и совпадение меток ГРМ коленвала и распредвала. При снятом шкиве привода генератора удобно проверить правильность положения коленчатого вала, совместив метку 1 на зубчатом шкиве коленчатого вала с выступом 2 крышки масляного насоса.Фото для наглядности ниже.

    Если вы не уверены в своих силах, то работу по замене ремня на Лада Гранта можно доверить автосервису. Для двигателя с 8-клапанным механизмом ГРМ это дешевле, чем для версии с 16-клапанным двигателем.

    Ремень ГРМ на 8-клапанном гранате является связующим звеном между распредвалом и коленчатым валом. Ремень ГРМ Grant 8 действует как гибкое соединение, обеспечивающее бесшумную работу (железная цепь в старых двигателях создавала приличный шум).

    Обрыв ремня ГРМ на Гранте сопровождается его постепенным разрушением. Полное разрушение ремня в момент движения автомобиля приводит к столкновению поршней с клапанами, в результате чего последние получают разного рода повреждения, чаще всего гнутся. Единственный способ избежать поломки клапанов — преждевременно заменить ремень ГРМ, момент которого занесен в сервисную книжку автомобиля.

    Двигатели Lada Grants 11183, в отличие от двигателей других моделей ВАЗ, требуют замены ремня ГРМ каждые 60 тыс. Км.Замена ремня с таким пробегом является исключительной рекомендацией производителя автомобиля.

    Для достижения максимальной безопасности и целостности механизмов двигателя автомобиля рекомендуется заменять его каждые 40-50 тыс. Км. Именно на этом этапе ролики и помпа начинают изнашиваться.

    В большинстве случаев обрыв ремня ГРМ происходит не в результате полного износа его конструкции, а именно выхода из строя (заклинивания) роликов или помпы.

    В том случае, если все же порвался ремень ГРМ Лада Гранта 8 клапанов, необходимо использовать следующие инструменты для замены:

    Ключ на «10»; ключ на «17»; монтажное полотно; специальный ключ для регулировки натяжения ремня ГРМ.

    Работы по замене ремня ГРМ на 8-клапанном двигателе выполняются согласно приведенным ниже инструкциям. Что касается 16-клапанного двигателя, то инструкция практически идентична 8-клапанному.

    Замена ремня ГРМ на 8-клапанном двигателе начинается непосредственно со снятия клемм с АКБ, после чего уже снимаем ремень привода генератора. Для замены ремня необходимо иметь полный доступ к необходимым агрегатным узлам. Для этого необходимо снять переднее правое колесо.

    Замену ремня предшествует разборка самого механизма ГРМ, а именно снятие его передней верхней крышки. Почему проводится такое мероприятие? Необходимо установить первый поршень в ВМТ (верхняя мертвая точка).

    Регулировка гайки натяжного ролика


    Именно соответствующая регулировка натяжного ролика, а точнее использование ремня ГРМ Лада Гранта в фиксированном натяжении, определяет ресурс ремня ГРМ Лада Гранта.

    Для демонтажа изношенного или порванного ремня ГРМ ослабьте гайку натяжного ролика, в результате чего ремень будет приведен в ослабленное положение.После этого можно переходить к следующему этапу.

    Важно: не пытайтесь просто разрезать ремень, чтобы не открутить болты натяжения. В этом случае вы не сможете установить новый ремень на валы.

    Шкив привода генератора: открутить болт крепления шкива главного генератора


    Отвинтить болт шкива генератора можно обычными ключами, которые указаны выше в списке необходимых инструментов. Если болт не выходит из шкива генератора, то необходимо выполнить следующие действия:

    Удаление пробки в картере сцепления

    Зубья маховика фиксируются монтажной лопаткой, наличие которой обосновано перечнем необходимых инструментов.

    После выполнения этих действий болт шкива генератора перестанет вращаться, так как коленчатый вал будет зафиксирован монтажной лопаткой.

    Снятие шкива генератора

    Демонтаж шкива генератора должен производиться сразу после снятия монтажного ножа. После демонтажа шкив необходимо положить на чистую поверхность. Мусор в орудии может вызвать его заклинивание.

    Демонтаж нижней крышки ГРМ

    Процесс демонтажа нижней крышки ГРМ осуществляется снятием трех болтов крепления.Такая конструкция используется в двигателях моделей Grants 21116, а также 11186.

    Демонтаж ремня ГРМ

    Последний этап — демонтаж ремня ГРМ с последующим определением состояния натяжного ролика. Процесс демонтажа ремня происходит в следующем порядке:

    Снятие ремня ГРМ с шкива ГРМ

    Снятие ремня с коленчатого вала.

    Именно на втором этапе демонтируется ремень ГРМ Гранта вместе с натяжным роликом.Проводим визуальный осмотр ролика, в частности определяем внешнее состояние и уровень люфта механизма.

    Во время сборки нижней крышки привода ГРМ необходимо отрегулировать натяжение самого ремня.

    Причины преждевременного обрыва ремня на Лада Грант остаются загадкой, в основе которой лежит не только невысокое качество материала, из которого изготовлен ремень, но и плохое качество сборки агрегатных узлов, через которые осуществляется синхронизация ГРМ. ремень проходит.

    Среди других причин преждевременного обрыва ремня ГРМ можно отметить стремление производителя автомобилей не отставать от Евро 3/4. Именно желание подогнать автомобиль под эти стандарты привело к вышеупомянутым негативным моментам в повседневной эксплуатации автомобиля.

    Несмотря на заявления производителя о качестве Гранты, ремня ГРМ и пороге его личного пробега в 200 000 тыс. Км, он уже разорван на 70 — 80 тыс. Км. Хорошая и стоящая замена — роликовый ремень Gates.

    Именно на Lada Granta из приоры ремень ГРМ подойдет Lada Granta и не вызовет преждевременного выхода из строя. Цена ремня ГРМ на Гранте позволяет менять его каждые 50 000 тысяч км, что, в свою очередь, снизит вероятность возникновения других статей расходов, связанных с ремонтом клапанов двигателя.

    В этой статье мы затронем проблемы, которые может вызвать некачественный или изношенный ремень ГРМ Лада Гранта 8 клапанов и 16 клапанов. Несмотря на свою простоту, эта деталь играет огромную роль в работе двигателя автомобиля.

    При работе силового агрегата неважно 16 ячеек или 8 ячеек, ремень постепенно изнашивается и если его своевременно не заменить, он может полностью разрушиться и порваться. Этого нельзя допускать, так как это может привести к такому опасному явлению, как изгиб клапанов и разрушение поршневой системы. В инструкции, которая идет в комплекте с автомобилем Лада Грант с двигателем 16-кл и восьмиклапанным, рекомендуемый срок замены составляет 60 тыс. Км.пробег. Но по мнению многих профессионалов, этот показатель немного завышен и достигать его не стоит, а менять необходимо через 50 тысяч километров.

    Еще одна причина для более быстрой замены ремня заключается в том, что такие детали, как насос и промежуточные ролики, рассчитаны на пятьдесят тысяч километров пробега. Тогда их использование рискованно. Чрезмерное использование этих узлов может привести к поломке ременной передачи со всеми негативными последствиями для системы.Но в любом случае, через сколько километров менять ремень и какой лучше выбрать — ваше личное дело.

    Для чего нужен ремень ГРМ?


    Ремень ГРМ на автомобиле Лада Гранта необходим для того, чтобы синхронизировать работу распредвала и коленвала. В инструкции к автомобилю на 16 и 8 ячеек регламентирован срок замены. Однако, тем не менее, большинство автомобилистов мало знают об этом и могут даже не знать его местонахождение, не беспокоясь о том, как его правильно поменять.Располагается он просто, нужно лишь приподнять крышку капота машины. На наиболее видном месте находится зубчатый ремень, охватывающий множество шкивов. Открыв инструкцию, прилагаемую к автомобилю, вы также легко найдете раздел с описанием этого устройства. Ремень ГРМ взаимодействует не только с коленчатым валом и с распределительным валом, но и с некоторыми другими системами. Такая нагрузка значительно сокращает срок службы ремня, что дает возможность его порвать.

    Ремень меняем сами


    Замена ремня ГРМ по истечении указанного срока на двигателях Лада Гранта объемом 16 и 8 кл — несложный процесс, и сделать это своими руками сможет даже начинающий автомобилист.Главное, внимательно следовать всем пунктам инструкции и ничего не упустить.

    Необходимые инструменты



    Этапы работы



    Следующий важный этап — правильное натяжение ремня привода ГРМ Лада Гранта с агрегатами на 16 ячеек и 8 ячеек.


    Внимание! Натяжной ролик не должен двигаться или отклоняться, сколь угодно сильно в ту или иную сторону, это будет доказательством того, что он находится в хорошем состоянии и работает правильно.Это значит, что его поломка исключена.

    Видео «Замена ремня ГРМ на автомобилях ВАЗ»


    В данном видео показано, как производится замена ремня ГРМ на автомобилях семейства ВАЗ. в том числе и на Lada Granta. Рассказывается не только о том, как правильно менять ремень, но и о том, какой из них нужен, чтобы не допустить поломки.

    Отечественный автомобиль Lada Granta выпускается несколько лет. И, благодаря хорошему качеству изготовления и нескольким различным комплектациям, ему удалось завоевать доверие многих водителей.Сегодня мы поговорим о замене ремня ГРМ на Лада Гранта.

    Общая информация ремень ГРМ

    В любом автомобиле газораспределительный механизм позволяет своевременно впускать и выпускать соответственно рабочую смесь и выхлопные газы. В состав этого механизма входят распределительный вал, а также различные детали привода клапанов, а также сами клапаны с пружинами, а также втулки направляющего типа.

    Если говорить о ремне ГРМ, то это особый элемент, который работает как звено.Благодаря ему обеспечивается синхронная работа распредвала и коленчатого вала.

    Найти такой ремень совсем не сложно. Вам этого будет достаточно, после чего вашему взору предстанет пояс. Правда, этот «спецагрегат» будет защищен специальным кожухом, который должен предотвращать попадание грязи и защищать от других механических воздействий.

    Внешне ремень ГРМ имеет зубчатую внутреннюю поверхность и резиновую основу. В отличие от других типов ремней, он охватывает сразу несколько шкивов.

    Кроме двух названных валов, ремень объединяет еще несколько узлов, например, водяной насос (помпу) и так далее.

    Повреждение роликов или насоса свидетельствует о повышенном износе ремня, что многократно сокращает срок его службы.

    Технический регламент завода АвтоВАЗ на замену ремня

    Автомобили семейства Lada Granta оснащаются, как мы уже говорили, различными модификациями двигателей.У одних нет проблемы с тем, что при обрыве ремня ГРМ гнутся клапаны, у других есть подобная особенность.

    Только двигатель 11183-50 не гнет клапана при обрыве ремня ГРМ, такой мотор устанавливается на Лада Грант в стандартной комплектации. Подробнее о том, в каких двигателях, при обрыве ремня ГРМ, обрывается клапан.

    Для исключения возникновения нештатной ситуации производитель рекомендует заменить ремень. один раз на семьдесят пять тысяч километров … Но за его состоянием придется чаще следить — при прохождении каждого ТО, то есть через 15 тысяч километров. Это утверждение верно как для 8-клапанных двигателей, так и для 16-клапанных двигателей. Даже не смотря на то, что в ней собрана импортная ГБЦ, ей тоже придется делать дорогостоящий ремонт из-за обрыва ремня!

    Естественно, производитель не рекомендует производить замену ремня самостоятельно, равно как и проверку.Если вы попытаетесь выполнить все работы самостоятельно, то велика вероятность, что вам откажут в последующем гарантийном обслуживании. Рекомендуется самостоятельно менять только фильтр (,).

    Большинство владельцев Lada Granta, особенно владельцы 16-клапанных двигателей (ремонт намного дороже 8-клапанного аналога) советуют не ждать положенных 75 тысяч километров. Дело в том, что некачественные комплектующие могут привести к тому, что износ начнется через 20 тысяч километров пробега.

    Большинство владельцев используют при замене хорошо зарекомендовавшие себя продукты Gates. Но они любят подделывать этот бренд, поэтому старайтесь покупать у проверенных временем поставщиков!

    K015670XS — номер детали для 16-клапанных двигателей.

    Если вы решили заменить ремень самостоятельно, то есть несколько рекомендаций, которые стоит учесть.

    Например, после установки ремня вам также необходимо будет правильно его натянуть. Делается это с помощью специального ключа. Некоторые заметят, что можно обойтись подручными средствами, но тогда никто не гарантирует результата.

    Усилие, которое характерно для поворота ремня на 90 градусов между шкивами коленчатого и распределительного валов, не должно превышать 20 Нм, но не должно быть ниже 15 Нм. Все остальные индикаторы сообщат вам, что ремень был неправильно натянут, и потребуется дальнейшая регулировка.

    Знаки износа ремня

    Как мы уже отмечали, необходимо регулярно контролировать состояние ремня ГРМ.

    Это позволит вам заметить его повреждение еще до того, как он полностью выйдет из строя, повредив детали двигателя.

    1. Первым признаком будет значительный износ материала. Если это так, то вы рискуете поскользнуться или сломаться при значительной нагрузке на автомобиль, а также при повышенной влажности.
    2. Далее следует, что износ происходит, как правило, при отклонении положения натяжного ролика и шкива, а также при значительной температуре подшипника или его неудовлетворительной работе. Это можно заметить по тому, что материал будет изнашиваться, а остатки ткани будут торчать из него.
    3. Третий признак указывает на наличие трещин или расслоение. Чем больше таких повреждений, тем выше шанс, что ремень очень скоро порвется.
    4. Проблемы также характерны для ситуации, когда задняя поверхность ремня имеет низкую эластичность и значительную твердость. Он также придаст поясу характерный блеск. Это предотвратит хороший контакт со шкивом.
    5. Во время работы ремень может удлиниться. Если этот параметр стал слишком большим, то стоит заменить ремень на новый, тем более, что его упругая способность значительно снизится.
    6. И, конечно же, если положение ремня отклоняется от указанного положения, то это расскажет вам о ситуации, когда компоненты натяжного ролика могут выйти из строя.

    Снятый для осмотра ремень ГРМ все еще выглядит, но хозяин решил его заменить

    В этом случае ремень все еще в хорошем состоянии.

    Последствия обрыва ремня ГРМ

    Погиб 4 клапана после обрыва ремня ГРМ

    Как мы уже говорили, только один мотор не должен иметь серьезных проблем после обрыва ремня ГРМ — 11183-50 … А вот у остальных моделей могут быть значительные поломки, что повлечет за собой значительные финансовые вложения! На нашем сайте между гроверами Grant развернулась битва за то, что нам также интересно ваше мнение.

    Дело в том, что при обрыве ремня распредвал останавливается в том положении, в котором он был в тот момент. Но коленчатый вал продолжает двигаться. В результате поршни с большой силой ударяли по клапанам, которые в тот момент находились в открытом состоянии. Клапаны прогибаются от этого удара, и в редких случаях поршень может даже быть проколот, хотя это бывает очень редко.Эту ситуацию в народе называют «кулаком дружбы»!

    выводы

    Конечно, обрыв ремня ГРМ на Лада Гранта может доставить массу проблем.

    Но это вовсе не означает, что мы ничего не можем сделать. Вот несколько рекомендаций, которые помогут снизить риск такого повреждения до минимума.

    Первый пункт должен быть тщательно связан с проверкой состояния ремня. Некоторые рекомендуют проверять состояние через 10 или 20 тысяч километров.Также старайтесь следить за состоянием сальников. Под капотом даже заглядывать не надо, так как при их износе на асфальте появятся характерные пятна.

    Мигание аварийной лампы, указывающее на проблему с давлением и уровнем масла, также расскажет о проблемах. Если это произошло, то необходимо немедленно выключить двигатель и найти причину такого «поведения» машины.

    При замене ремня ГРМ следует использовать только оригинальные запчасти.Но даже брендовые детали нужно будет постоянно контролировать.

    Второй метод с использованием подвешенного колеса описан выше. Когда отметки совпадут, нужно снять резиновую заглушку, расположенную на коробке передач, и открыть смотровое окошко. В нем виден маховик, риск на нем тоже должен совпадать с прорезью на корпусе. Следующим шагом будет снятие ремня со шкива привода генератора. Для этого ослабьте нижний крепежный болт этого блока, а верхний болт открутите и вытащите.

    Затем корпус генератора можно сдвинуть вперед и снять ремень со шкивов. Сразу же, воспользовавшись моментом, можно осмотреть снятый ремень на предмет дефектов и повреждений, а при необходимости поменять. Затем следует операция по ослаблению болта крепления шкива коленчатого вала. Часто бывает, что просто так накидным ключом это сделать невозможно, особенно после заводской затяжки. Есть несколько способов.

    1. Вставьте плоскую мощную отвертку или монтировку в смотровое окошко маховика, заблокировав его.Удерживая отвертку правой рукой, левой отверните болт шкива гаечным ключом на 17 мм.
    2. Если есть помощник, процедура значительно упрощается. Один будет включать 4-ю передачу, нажимать и удерживать педаль тормоза, второй в это время откручивает шкив. Делать это намного удобнее, обе руки свободны для работы.
    3. Некоторые автомобилисты накладывают гаечный ключ на болт шкива и прижимают его к какому-либо корпусу или элементу подвески, после чего проворачивают коленвал стартером на нейтраль.Метод довольно опасный, допустимо использовать в самом крайнем случае, когда другими способами открутить болт невозможно.

    После откручивания болта снимается шкив и протирается рабочая часть тряпкой. Затем нужно ослабить болт натяжного ролика, натяжение ремня ослабнет и его можно будет снимать. Так как ролик тоже надо менять, его нужно открутить. Последним снимается нижняя крышка механизма, которая крепится к двигателю тремя болтами.

    На этом разборка устройства завершена. Перед установкой нового ролика и ремня ГРМ нужно убедиться, что приводной вал помпы вращается свободно и не заклинивает. В противном случае придется принимать решение о замене насоса охлаждающей жидкости.

    Сборка механизма

    Процесс сборки осуществляется в обратной последовательности, только в самом начале нужно убедиться, что ранее поставленные метки находятся на своих местах. Затем надевается новый натяжной ролик и новый ремень ГРМ надевается на шестерни, начиная снизу, от коленчатого вала.Поддерживая ремень рукой с небольшим натяжением, наденьте его на шестерню распределительного вала так, чтобы все зубцы совпали, а затем затяните натяжным роликом.

    В его корпусе есть 2 отверстия, в которые можно вставить специальную вилку или плоскогубцы, с их помощью и растянуть. Затем затяните роликовый болт со средним усилием. Чтобы убедиться, что ремень правильно установлен и натянут, необходимо сделать пару полных оборотов коленвала, желательно не стартером, а ключом.Затем совместите метки и еще раз проверьте положение меток в смотровом окошке маховика.

    Есть один нюанс: опасность на шестерне распредвала может отклониться на пару мм в ту или иную сторону от отметки на корпусе, это вполне допустимо. Если ремень установлен неправильно, расхождение составит 1 см, это сразу заметно. Необходимо снова ослабить его натяжение и переставить ремень на один зуб вправо или влево, а затем повторить операцию.Когда новый ремень будет успешно установлен и натянут, сборку можно будет снова собрать.

    При установке ремня привода генератора следует помнить, что на ВАЗ 2190 нет натяжного механизма. Поэтому корпус агрегата перемещают максимально близко к блоку цилиндров, ремень надевается на его шкив полностью , а частично на коленчатом валу, после чего его нужно будет провернуть на пол-оборота, чтобы расходник встал на место. Дальнейшая сборка не проблема, после чего можно заводить мотор.Такими деталями отличается операция по такой замене 16-клапанного двигателя Лада Грант.

    1. Распредвалов два, метки нужно будет совместить, а потом проверить на двух шестернях.
    2. Необходимо поменять 2 ролика: натяжной и обводной.
    3. Новый ремень нужно будет аккуратно надеть на две верхние шестерни, пропустив его мимо обводного ролика, процесс несколько более кропотливый.

    При замене рекомендуется обращать внимание на чистоту внутренней части пространства механизма газораспределения.Как правило, там скапливаются пыль, грязь, отходы старой ленты в виде черного порошка и так далее. Правильно будет тщательно протереть корпус мотора, шестерни и защитный кожух изнутри.

    Вся процедура довольно проста. Зная, на сколько нужно менять расходники ГРМ и имея минимальный набор приспособлений, каждый может это сделать самостоятельно.

    Процесс замены топливного фильтра на Лада Грант Перечень работ ТО 2 и их стоимость для автомобиля Lada Granta

    Facebook

    Твиттер

    В контакте с

    одноклассники

    Google+

    Сравнение производительности mScarlet-I, mRuby3 и mCherry в качестве акцепторов FRET для mNeonGreen

    Abstract

    Фёрстеровский резонансный перенос энергии (FRET) стал чрезвычайно мощным инструментом для профилирования внутри- и межмолекулярных взаимодействий.Благодаря слиянию генетически кодируемых флуоресцентных белков (FP) исследователи смогли обнаружить олигомеризацию белков, активацию рецепторов и транслокацию белков среди других биофизических явлений. Недавно были разработаны два ярких мономерных красных флуоресцентных белка, mRuby3 и mScarlet-I. Эти белки обладают значительно улучшенными физическими свойствами по сравнению с предыдущими поколениями мономерных красных FP, что должно способствовать более широкому внедрению зеленого / красного FRET. Здесь мы оцениваем способность этих двух белков, наряду с mCherry, действовать в качестве акцептора FRET для яркого, мономерного, зелено-желтого FP mNeonGreen, используя методы интенсивной FRET и 2-фотонной флуоресцентной микроскопии с визуализацией времени жизни (FLIM) FRET.Сначала мы определили, что mNeonGreen является стабильным донором для 2-фотонных экспериментов FLIM в различных условиях визуализации. Затем мы проверили способность красных FP действовать как акцепторы FRET, используя тандемную конструкцию mNeonGreen-Red FP. С помощью этих конструкций мы обнаружили, что mScarlet-I и mCherry способны эффективно использовать FRET с mNeonGreen в спектроскопии и FLIM FRET. Напротив, mNeonGreen и mRuby3 FRET с гораздо меньшей эффективностью, чем предсказано в тех же анализах. Мы исследуем возможные объяснения этой низкой производительности и определяем, что свойства созревания белка mRuby3 являются основным фактором.В целом, мы обнаружили, что mNeonGreen является отличным донором FRET, и mCherry и mScarlet-I, но не mRuby3, действуют как практические приемники FRET, причем более яркий mScarlet-I выполняет mCherry в интенсиометрических исследованиях, а mCherry выполняет mScarlet-I. в случаях, когда постоянная эффективность в популяции имеет решающее значение.

    Образец цитирования: McCullock TW, MacLean DM, Kammermeier PJ (2020) Сравнение эффективности mScarlet-I, mRuby3 и mCherry в качестве акцепторов FRET для mNeonGreen.PLoS ONE 15 (2): e0219886. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886

    Редактор: Вадим Э. Дегтяр, Калифорнийский университет в Беркли, США

    Поступила: 3 июля 2019 г .; Принято к печати: 23 января 2020 г .; Опубликовано: 5 февраля 2020 г.

    Авторские права: © 2020 McCullock et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и ее файлах с вспомогательной информацией.

    Финансирование: Этот проект поддержан Национальным институтом здравоохранения (https://www.nih.gov/), финансирующим R00NS094761, и премией Фонда молодых исследователей NARSAD (https://www.bbrfoundation.org/). гранты-призы / нарсад-молодой-исследователь-гранты) DMM и Университет Рочестера (https://www.rochester.edu/) за промежуточное финансирование П.J.K .. T.W.M. была частично поддержана Фондом Джона Р. Мерлина Рочестерского университета. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

    Введение

    Генетически кодируемые флуоресцентные белки (FP) обладают огромным прогрессом в базовой и трансляционной биологии. Начиная с клонирования Aequorea victoria green FP [1], начались масштабные и постоянные усилия по увеличению количества доступных FP с различными физическими и спектральными свойствами.В настоящее время существует огромное разнообразие FP во всех частях видимого спектра и даже в некоторых частях ультрафиолетового и инфракрасного спектров. Эти новые белки были либо клонированы из других организмов [2–4], либо разработаны путем эволюции уже идентифицированных FP [4–11]. Этот постоянно расширяющийся каталог FP был рассмотрен другими [12–14], и были созданы новые усилия и архивы для организации этой информации, такие как база данных FPbase [15].

    По мере расширения каталога FP увеличиваются и потенциальные применения.Особо следует отметить использование FP в качестве биосенсоров, которые могут измерять сигнальные события, клеточные метаболиты, pH, напряжение и многое другое [16]. Многие из этих биосенсоров используют Förster Resonance Energy Transfer (FRET) как часть своего механизма отчетности, производя изменение эмиссии акцептора при возбуждении донора, когда изменяется интересующее количество. FRET также зависит от ориентации и расстояния [17], что означает, что величина передачи энергии (описываемая как эффективность FRET) может использоваться для изучения либо устойчивого состояния, либо динамических изменений во взаимодействиях с белками.Большая часть работы с использованием FP для FRET была выполнена с использованием пар Cyan / Yellow FP из-за их яркости, но эти белки страдают от большого перекрытия в их спектрах излучения, что делает интерпретацию результатов излишне сложной, среди других усложняющих факторов. Пары зеленого / красного FP предлагают большее разделение их спектров излучения, сохраняя при этом высокую степень спектрального перекрытия между излучением донора и поглощением акцептора, что обеспечивает эффективную передачу энергии. Зеленые / красные FP также имеют больший радиус Ферстера, чем большинство пар белков Cyan / Yellow, что позволяет использовать FRET на больших расстояниях.Возможность обнаружения FRET на больших расстояниях часто приводит к большему динамическому диапазону и чувствительности. Кроме того, клеточная токсичность для синего света была хорошо документирована в различных системах [18–22], что подчеркивает необходимость в лучших парах FRET с зеленым и красным смещением. Исторически сложилось так, что использование зеленого / красного FRET было ограничено из-за неблагоприятных флуоресцентных свойств красного белка [23–26], но сообщается, что несколько недавно разработанных мономерных красных флуоресцентных белков обладают улучшенным поглощением, яркостью и стабильностью, что указывает на то, что они могут действовать как высококачественный FRET. акцепторы для зеленых ФП.

    Цель данного исследования — охарактеризовать эти недавно выпущенные красные FP как приемники FRET в надежде помочь более широкому внедрению Green / Red FRET. Здесь мы исследуем способность красных FP следующего поколения, mRuby3 и mScarlet-I, а также mCherry действовать в качестве акцептора FRET для зелено-желтого донора FP mNeonGreen. mRuby3 [10] — это новейшая итерация серии красных FP на Ruby [8, 9], первоначально разработанная на основе eqFP611 [3]. Серия красных FP mScarlet [11] была разработана из синтетической генной матрицы, основанной на нескольких встречающихся в природе красных FP.В результате этой стратегии были получены три мономерных красных FP: яркий вариант mScarlet, быстро созревающий вариант mScarlet-I и вариант с быстрым временем жизни mScarlet-H. Для этого исследования мы используем mScarlet-I из-за его быстрого созревания, поскольку более медленное созревание менее идеально для исследований слитых белков. mCherry [6], широко используемый мономерный красный FP, разработанный из DsRed [2], включен в это исследование в качестве стандарта. В качестве донорной молекулы мы выбрали mNeonGreen [4], невероятно яркий и стабильный зелено-желтый FP, полученный в результате мономеризации тетрамерного желтого флуоресцентного белка LanYFP [4].

    Материалы и методы

    Культивирование клеток и трансфекция

    клеток HEK293A (ATCC; Манассас, Вирджиния) поддерживали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) с добавлением 1X GlutaMAX TM , 100 единиц / мл пенициллия, 100 мкг / мл стрептомицина (ThermoFisher Scientific; Waltham, MA) и 10 % термоинактивированной фетальной телячьей сыворотки (Atlas Biologicals; Fort Collins, CO). Чтобы вызвать экспрессию флуоресцентных белков, клетки временно трансфицировали с использованием трансфекции полиэтиенимином (PEI).Для всех трансфекций указанные количества ДНК и PEI смешивали вместе в среде DMEM, не содержащей добавок, в течение 30 минут перед добавлением к клеткам в указанный момент времени. Для экспериментов FLIM клетки высевали на покровные стекла номер 1 (Warner Instruments; Hamden, CT) в 12-луночные планшеты (Nest Scientific USA; Rahway, NJ) за 48 часов до экспериментов. Затем клетки трансфицировали за 24 часа до начала экспериментов с использованием 0,6 мкг кДНК для указанной конструкции и 1,6 мкг PEI в 1 мл среды.Для конфокальных экспериментов клетки высевали в пластиковые культуральные чашки диаметром 35 мм (Corning; Corning, NY) за 48–72 часа до экспериментов с последующей трансфекцией 1 мкг кДНК с использованием 2,4 мкг PEI в 2 мл среды в течение 24–36 часов. до начала визуализации. Для спектральных экспериментов по FRET и иммуноблоттингу клетки помещали в 10-сантиметровые пластиковые чашки для культивирования и позволяли расти до 70% конфлюэнтности. Затем клетки трансфицировали 4 мкг кДНК с использованием 7,8 мкг PEI за 24 часа до начала экспериментов.

    Плазмиды и клонирование

    Все конструкции, используемые в этой рукописи, получены из плазмиды pKanCMV-mClover3-mRuby3 (плазмида № 74252), доступной на Addgene.org (Addgene; Уотертаун, Массачусетс). NG-mRuby3 был создан путем удаления mClover3 и всех, кроме последних 5 аминокислот линкера, из pKanCMV-mClover3-mRuby3 с помощью обратной ПЦР, и на его место была вставлена ​​полная кодирующая последовательность mNeonGreen с помощью клонирования In-Fusion (Takara Bio; Mountain Вью, Калифорния). NG-mScarlet-I, NG-mScarlet и NG-mCherry были созданы путем удаления mRuby3 из NG-mRuby3 с помощью обратной ПЦР и вставки mScarlet-I, mScarlet или mCherry с использованием клонирования In-Fusion (Takara Bio). NG-Stop был создан с использованием того же продукта обратной ПЦР, что и NG-mScarlet-I и NG-mCherry, путем лигирования тупых концов с использованием NEBs KLD Mix (New England Biolabs; Ipswich, MA).NG-P2A-mRuby3 был получен из NG-mRuby3 с использованием обратной ПЦР и лигирования тупым концом для вставки последовательности P2A между линкером и mRuby3. Конструкцию mRuby3-GGSGG-NG получали с использованием мультифрагментной реакции In-Fusion с использованием продуктов ПЦР mRuby3 и mNeonGreen, где линкер GGSGG был присоединен к 3’-концу mRuby3 и 5’-концу продукта mNeonGreen с помощью ПЦР. mClover3-Stop получали удалением mRuby3 из вектора pKanCMV-mClover3-mRuby3 с помощью обратной ПЦР и последующего лигирования тупых концов.Аминокислотные последовательности для всех описанных здесь конструкций доступны в таблице S1. Ген mNeonGreen был получен из плазмиды pmNeonGreen-NT (Allele Biotechnology; Сан-Диего, Калифорния), ген mScarlet-I был получен из плазмиды Lck-mScarlet-I (Addgene, плазмида № 98821), и был получен ген mCherry. из плазмиды pmCherry-N1 (Takara Bio). Продукты реакции трансформировали, подвергали скринингу и амплифицировали в XL10-Gold Ultracompetent E . coli клеток (Agilent Technologies; Санта-Клара, Калифорния).Плазмиды выделяли с использованием набора E.Z.N.A Plasmid MiniPrep Kit (Omega Bio-teck; Norcross, Джорджия) или набора ZymoPure II Plasmid Midiprep Kit (Zymo Research; Ирвин, Калифорния) в соответствии с рекомендациями производителя. Все конструкции проверяли секвенированием по Сэнгеру (Eurofins Genomics; Louisville, KY) и хранили при концентрации 1 мкг / мкл в морозильной камере -20 ° C. Все плазмиды и конструкции, созданные для этой рукописи, можно бесплатно получить по запросу.

    Spectral FRET

    Для спектральных экспериментов FRET клетки использовали через 24–36 часов после трансфекции.Единичную 10-сантиметровую чашку с клетками, экспрессирующими интересующую конструкцию, промывали буфером для визуализации (136 мМ NaCl, 560 мкМ MgCl 2 , 4,7 мМ KCl, 1 мМ Na 2 HPO 4 , 1,2 мМ CaCl 2 , 10 мМ HEPES, 5,5 мМ глюкозы) несколько раз и осаждали. Затем осадки клеток ресуспендировали в 500 мкл буфера для визуализации и переносили в одноразовые акрилатные кюветы (Spectrocell Inc; Ореланд, Пенсильвания). Сканирование излучения проводилось при длине волны 490–750 нм с использованием длины волны возбуждения 470 нм с использованием флуоресцентного спектрофотометра Cary Eclipse (Agilent Technologies).Клетки ресуспендировали энергичным пипетированием непосредственно перед сканированием. Данные были собраны в программном пакете Cary Eclipse Scan Application (Agilent Technologies) и экспортированы в Microsoft Excel (Microsoft Corporation) для анализа. Чтобы оценить эффективность FRET по сканированию выбросов, линейное размешивание было выполнено в Igor Pro (WaveMetrics Inc; Lake Oswego, штат Орегон) с использованием сканирования излучения только донора и только акцептора для определения вкладов донора и акцептора. Из-за высокого уровня согласованности между NG-Stop и зарегистрированным спектром для очищенного mNeonGreen (S1 фиг.), Очищенный спектр mNeonGreen использовался только в качестве сканирования донора для линейного несмешивания.Для каждого из акцепторов были созданы пользовательские сканы только акцепторов на основе экспериментально собранных данных и их сообщенного очищенного спектра (как обсуждается на S1 Рис.). Все необработанные сканы, используемые для спектрального FRET, доступны на S1 Fig. После определения веса донора и акцептора эффективность FRET была оценена с использованием следующего уравнения [27]: (1) где E — эффективность FRET, W A и W D — веса компонентов излучения только донора и только акцептора, рассчитанные посредством линейного несмешивания, а QY A и QY D — квантовый выход акцептора. и донор соответственно.

    Флуоресцентная микроскопия для визуализации на весь срок службы (FLIM)

    Для экспериментов FLIM клетки использовали через 1 день после трансфекции, если не указано иное. За 30 минут до начала экспериментов среду заменяли буфером для визуализации и давали нагреться до комнатной температуры. Покровные стекла переносили в специально изготовленную камеру и устанавливали на предметный столик многофотонного и сканирующего конфокального микроскопа Olympus FluoView 1000-MP (Olympus; Токио, Япония). Возбуждение образцов достигалось с помощью фемтосекундного импульсного лазера Mai Tai Ti: Sapphire (Spectra-Physics; Санта-Клара, Калифорния), настроенного на 950 нм.Флуоресцентные затухания собирали с использованием водно-иммерсионного объектива XLPlan N 25x (NA 1,05) (Olympus) с разрешением 256×256 и временем задержки пикселей 20 мкс. Данные передавались с помощью микроскопа на установку FLIM, состоящую из двух детекторов H7422P Hamamatsu (Hamamatsu; Hamamatsu City, Япония) и карты счета одиночных фотонов с временной корреляцией (Becker and Hickl; Берлин, Германия). Для разделения донорной и акцепторной эмиссии использовали дихроик BrightLine FF552-Bi02-25×36 (Semrock; Rochester, NY). Излучение света в детектор донора дополнительно фильтровали с помощью фильтра BrightLine FF01-510 / 42-25, а излучение в детектор акцептора фильтровали с помощью фильтра BrightLine FF01-609 / 54-25 (Semrock).Микроскоп управлялся с помощью программного пакета FV10-ASW (Olympus), а система FLIM контролировалась с помощью программного пакета VistaVision от ISS (ISS Inc; Шампейн, Иллинойс). Анализ уменьшения времени жизни отдельных ячеек был выполнен с помощью VistaVision на ISS, а последующие времена жизни были проанализированы в Microsoft Excel (Microsoft Corporation; Редмонд, Вашингтон). Вкратце, клетки были изолированы в отдельные интересующие области (ROI), и данные о распаде для каждого пикселя в области выше порога суммировались для создания кривой затухания флуоресценции клеток.Затем эти кривые затухания были подогнаны, и времена жизни были извлечены с использованием нелинейной регрессии в режиме подгонки хвоста. Почти все кривые затухания были хорошо описаны с помощью одной экспоненциальной аппроксимации (как было определено с помощью анализа хи-квадрат, а также на глаз). Срок службы был извлечен из этих подгонок и использован для расчета эффективности FRET с использованием следующего уравнения [28]: (2)

    Где E — эффективность FRET, 𝜏 DA — время жизни донора в присутствии акцептора, а 𝜏 D — время жизни только частиц донора (в данном случае среднее время жизни NG-Stop). .Для экспериментов, в которых было предварительно проведено фотообесцвечивание акцептора, клетки отбеливали сканированием лазером с длиной волны 559 нм при 100% мощности в течение 15 минут при тех же параметрах, что и данные о времени жизни.

    Конфокальная микроскопия

    Для экспериментов с конфокальной микроскопией клетки использовали через 1 день после трансфекции. За 30 минут до начала экспериментов среду заменяли буфером для визуализации и давали нагреться до комнатной температуры. Затем изображения были собраны на том же микроскопе, что и данные FLIM, с использованием сканера SIM и обычных лазерных линий 488 нм и 559 нм.Конфокальные изображения с широким полем поля были получены с помощью водно-иммерсионного объектива XLUMPlanFl 20X (NA 0,95) (Olympus) с разрешением 2048×2048. Образец возбуждали, и излучение собиралось в каждом канале индивидуально, чтобы предотвратить просачивание. Зеленое излучение собирали через фильтр 505–540 нм, а красное излучение собирали через фильтр 575–675 нм. Все параметры визуализации были согласованы во всех экспериментах, чтобы облегчить сравнение. Данные были собраны в программном пакете FV10-ASW (Olympus) и экспортированы в программный пакет Fiji [29] для анализа, как описано в основном тексте и S3 Fig, с использованием плагина Coloc2.

    Иммуноблоттинг

    Образцы для иммуноблоттинга собирали через 24 часа после трансфекции. Клетки извлекали из чашки для культивирования и дважды промывали DPBS, не содержащим кальция и магния (Corning). После клеточного лизиса в присутствии ингибиторов протеазы концентрацию белка оценивали с использованием набора Pierce TM BCA Protein Assay Kit (ThermoFisher Scientific), и 10 мкг общего белка загружали в 16% гель SDS-PAGE. После электрофореза белки переводили в 0.Нитроцеллюлозная мембрана 2 мкм (BioRad; Hercules, CA). Присутствие белка mNeonGreen проверяли с помощью моноклонального мышиного антитела против mNeonGreen [32F6] (Chromotek; Planegg-Martinsried, Германия) в разведении 1: 1000 и визуализировали с использованием вторичного антитела осла против мышиного IgG DyLight 680 (ThermoFisher Scientific). при разведении 1: 5000. Эту же мембрану дополнительно исследовали на наличие mClover3 с использованием кроличьих антител против GFP (ThermoFisher Scientific, A11122) в разведении 1: 1000 и визуализировали с помощью вторичных антител козьего анти-кроличьего IgG DyLight 800 (ThermoFisher Scientific) при 1 : 10000 разведение.Обнаружение было выполнено с использованием системы визуализации Odyssey 3 (Li-cor Biosciences; Lincoln, NE).

    Статистика

    Чтобы избежать предположений относительно распределения данных, вся статистическая значимость в этой рукописи была определена с помощью теста перестановок, реализованного с помощью специального скрипта Python с использованием библиотеки MLxtend [30] с использованием метода аппроксимации с 1 000 000 перестановок. Для случаев, когда между двумя сравниваемыми наборами данных было меньше 10 точек данных, использовался точный метод.

    Результаты

    Физические свойства и спектр белков в этом исследовании

    Для этого исследования мы использовали мономерный желто-зеленый флуоресцентный белок mNeonGreen, чтобы проверить способность двух новых красных флуоресцентных белков, mRuby3 и mScarlet-I, а также mCherry действовать как акцепторы FRET. Флуоресцентные и физические свойства этих белков перечислены в таблице 1. mNeonGreen — один из самых ярких флуоресцентных белков на сегодняшний день с высоким квантовым выходом и коэффициентом экстинкции, благодаря чему его сигналы легко наблюдать.Кроме того, mNeonGreen также обладает высокой фотостабильностью [4] и быстро созревает, что делает его идеальным донором FRET. И mRuby3, и mScarlet-I имеют высокие коэффициенты экстинкции, что делает их отличными приемниками FRET. По сравнению с mCherry эти белки также предлагают значительно более высокий квантовый выход, что указывает на то, что будет легче обнаруживать события передачи энергии, используя испускание одного из этих двух белков. Спектр поглощения и излучения mNeonGreen накладывается на спектр mRuby3, mScarlet-I и mCherry на рис. 1A – 1C.Для каждого красного флуоресцентного белка значения интеграла перекрытия (J (λ)) и радиуса Ферстера (R 0 ) с mNeonGreen перечислены в таблице 1. На основе этих фотофизических свойств ожидается, что все три красных FP будут FRET с mNeonGreen. Предполагая идентичное расположение между донором и акцептором, ожидается, что mRuby3 будет обеспечивать наивысшую эффективность FRET, а mCherry — самую низкую эффективность FRET с mNeonGreen.

    Рис. 1. Спектр mNeonGreen, mRuby3, mScarlet-I и mCherry.

    Абсорбция (пунктирные линии) и спектр излучения (сплошные линии) очищенного mNeonGreen (зеленые линии), наложенные на спектр очищенного mRuby3 (A) , mScarlet-I (B) и mCherry (C) .Спектры были получены из эталона, указанного в таблице 1.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g001

    тандемные конструкции mNeonGreen-RFP показывают низкую производительность mRuby3

    Чтобы проверить способность красных FP действовать как акцепторы FRET, мы сконструировали тандемные конструкции FP, состоящие из полной кодирующей последовательности mNeonGreen (NG), за которой следует короткий аминокислотный линкер (SGLSKGEE), а затем полная кодирующая последовательность красного FP (рис. 2A с аминокислотными последовательностями, доступными в таблице S1 в дополнительной информации).Хотя линкер из 8 аминокислот является относительно коротким, включение полного c-конца mNeonGreen (который кажется неструктурированным или отсутствует в структуре mNeonGreen [31]) создает эффективный линкер из 17 аминокислот. Также была создана конструкция mNeonGreen-Stop, которая содержит полную кодирующую последовательность mNeonGreen, линкер из 8 аминокислот, а затем стоп-кодон, действующий как донорская контрольная конструкция. Чтобы определить, будет ли mNeonGreen FRET с красными FP в этих конструкциях, мы временно трансфицировали каждую конструкцию в клетки HEK293 и измерили эмиссию акцепторного FP при возбуждении с длиной волны, которая будет возбуждать только донора.Когда клетки, экспрессирующие конструкции NG-Stop, возбуждаются светом с длиной волны 470 нм, был получен спектр, сравнимый с тем, что сообщалось для очищенного mNeonGreen (рис. 2В, рис. S1 в дополнительной информации). При анализе тандемных конструкций NG-красный FP появляется второй пик, соответствующий красному FP. Примерный спектр для конструкций NG-mRuby3, NG-mScarlet-I и NG-mCherry показан на рис. 2C, 2D и 2E, соответственно, розовым цветом, вместе с рассчитанными донорными (зеленый) и акцепторными компонентами (красный), определенными посредством линейного несмешивания, а также соответствие (черная пунктирная линия), полученное при добавлении рассчитанных донорных и акцепторных компонентов.Обратите внимание, что во всех случаях подгонка без микширования точно воспроизводила следы необработанных данных. Используя донорные и акцепторные компоненты, эффективность FRET каждой конструкции можно оценить с помощью уравнения. 1 (Рис. 2F, с необработанными кривыми, доступными на S1 Рис.). При трех независимых трансфекциях для каждой конструкции конструкция NG-mScarlet-I и NG-mCherry продемонстрировала эффективность FRET 29 ± 0,5% и 22 ± 0,8% соответственно. Удивительно, но конструкция NG-mRuby3 показала оценочную эффективность FRET в 16 ± 0,1%.Такая низкая производительность по сравнению с NG-mScarlet-I или NG-mCherry была весьма неожиданной, учитывая физические и спектральные свойства, указанные для mRuby3 [10], которые предсказывали, что он будет лучшим акцептором FRET из трех красных FP для mNeonGreen.

    Рис. 2. Спектральный FRET каждой тандемной конструкции mNeonGreen-Red FP.

    (A) Мультяшная схема тандемных конструкций mNeonGreen-Red FP, используемых для экспериментов FRET. (B) Сканирование среднего излучения клеток, экспрессирующих NG-Stop (черный), при возбуждении при 470 нм, наложенное на представленный спектр очищенного mNeonGreen зеленого цвета (n = 3 независимых трансфекции).Пример необработанного спектра излучения (розовый) тандема (C) NG-mRuby3, (D) NG-mScarlet-I и (E) NG-mCherry при возбуждении на длине волны 470 нм. Пунктирная черная линия показывает сумму донорного (зеленого) и акцепторного (красный) компонентов, вычисленную путем линейного несмешивания. (F) Эффективности FRET, рассчитанные из спектра для каждой конструкции (n = 3). *** = P <0,0005 между указанными условиями.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g002

    mNeonGreen — подходящий донор для двухфотонного FLIM

    Чтобы подтвердить наши спектральные результаты FRET, мы обратились к более точному методу 2-Photon Fluorescent Lifetime Imaging (FLIM). Сначала мы попытались определить, является ли mNeonGreen подходящим донором для экспериментов с 2-фотонным FLIM. Донор FRET с хорошим поведением мог бы легко возбуждаться двухфотонным лазером, быть стабильным при различных мощностях двухфотонного лазера и демонстрировать стабильное моноэкспоненциальное время жизни [32]. Насколько нам известно, существует только один отчет о производительности mNeonGreen с использованием двухфотонного освещения [33].Это исследование продемонстрировало, что флуоресцентные белки с синим смещением имеют тенденцию работать лучше при двухфотонном возбуждении, чем более желтые флуоресцентные белки со смещением, но не исключили возможность использования mNeonGreen в двухфотонных исследованиях. Используя свет с длиной волны 950 нм и конструкцию NG-Stop, мы оценили эффективность mNeonGreen в 2-фотонном FLIM в различных условиях, используя коррелированный по времени подсчет одиночных фотонов. При различных мощностях лазера mNeonGreen обеспечивает стабильный срок службы 3,05 ± 0,01 нс в течение 50 кадров сбора данных (рис. 3A).Этот срок службы был стабильным до 300 кадров сбора данных для всех, кроме самой высокой протестированной мощности лазера, 25 Вт / см 2 , в которой время жизни линейно уменьшалось до 87 ± 4,5% от своего начального значения после 300 кадров (рис. 3B). Напротив, значительное фотообесцвечивание наблюдалось при мощности лазера выше 15 Вт / см 2 (рис. 3C) с обесцвечиванием 20 Вт / см 2 и 25 Вт / см 2 примерно 48 ± 14% и 94 ± 3% интенсивность образца соответственно через 300 кадров. Примеры следов распада одной ячейки, собранные в последовательных интервалах из 50 кадров, показаны при 15 Вт / см 2 (Фиг.3D) и 25 Вт / см 2 (Фиг.3E).Нормализация следов затухания к пиковой интенсивности для примера 2 25 Вт / см демонстрирует сокращение срока службы и ухудшение качества данных в процессе сбора данных на этой мощности (рис. 2F). Чтобы служить в качестве сравнения, мы повторили эти эксперименты с использованием EGFP (S2 рис). EGFP обеспечивает стабильный срок службы 2,63 ± 0,01 нс при различных мощностях лазера. Подобно mNeonGreen, этот срок службы был стабильным для 300 кадров захвата для каждой мощности лазера, отличной от 25 Вт / см 2 .Кроме того, уровни мощности выше 15 Вт / см 2 также вызывали значительное фотообесцвечивание более 300 кадров, хотя и в меньшей степени, чем то, что наблюдалось с mNeonGreen (S2 Рис). Учитывая эти данные, мы пришли к выводу, что mNeonGreen является подходящим донором для двухфотонных экспериментов FLIM, когда время жизни достигается при мощности лазера 15 Вт / см 2 или меньше. Для всех дальнейших экспериментов FLIM данные собирались при мощности лазера 5–10 Вт / см 2 для 100–150 кадров в зависимости от яркости кюветы.

    Рис. 3. mNeonGreen хорошо работает при различных мощностях лазера для двухфотонной съемки FLIM во временной области.

    (A) Данные о продолжительности жизни, собранные для отдельных клеток HEK293, экспрессирующих цитозольный mNeonGreen при различной мощности лазера до 25 Вт / см 2 после 50 кадров. Черные полосы указывают средний доверительный интервал ± 95%. (B) Lifetime и (C) интенсивность образцов, снятых на протяжении 300 кадров при различной мощности лазера. * = P <0,05, ** = P <0.005, и *** = P <0,0005 по сравнению с набором данных 2 , сопоставленным с кадром, 5 Вт / см. N для каждого образца составляет 5 Вт / см 2 : 11 ячеек, 10 Вт / см 2 : 10 ячеек, 15 Вт / см 2 : 14 ячеек, 20 Вт / см 2 : 9 ячеек, 25 Вт / см 2 : 11 ячеек. (D) Пример кривых спада времени жизни, полученных при 15 Вт / см 2 на 300 кадрах. (E) Пример спада времени жизни и нормированного спада (F) , полученного при 25 Вт / см 2 на 300 кадрах.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g003

    Измерения FLIM-FRET подтверждают плохую работу mRuby3

    При использовании FLIM FRET определяется как уменьшение времени жизни донора в присутствии акцептора [28]. Этот метод имеет преимущество определения состояния FRET между mNeonGreen и красным FP независимо от излучения красных FP, что позволяет нам определять эффективность FRET для каждой конструкции без необходимости учитывать различия между каждым красным FP.В ходе нескольких независимых трансфекций конструкция mNG-Stop продуцировала время жизни только донора 3,05 ± 0,02 нс (фиг. 4A). Когда mScarlet-I или mCherry присутствуют в тандемах, время жизни mNeonGreen сокращается до 2,22 ± 0,06 нс и 2,23 ± 0,03 нс соответственно (рис. 4A). Это приводит к эффективности FRET конструкции NG-mScarlet-I 27 ± 2% и эффективности 27 ± 1% для конструкции NG-mCherry (рис. 4B). Анализ конструкции NG-mRuby3 показывает даже худшую производительность mRuby3, чем то, что было оценено с помощью спектрального FRET (рис. 2F).Среднее время жизни конструкции NG-mRuby3 составляло 2,92 ± 0,03 нс (рис. 4A), в результате чего эффективность FRET составляла всего 4 ± 0,9% (рис. 4B). Действительно, 35 клеток после 3 независимых трансфекций (более половины всех взятых образцов клеток) продемонстрировали время жизни в диапазоне от того, что было собрано для конструкции NG-Stop, тогда как никакие клетки, экспрессирующие NG-mScarlet-I или NG-mCherry, не имели времени жизни в этом диапазоне. (Рис. 4A). Примерные кривые распада, представляющие среднее значение для каждой конструкции, показаны на фиг. 4C, а примерные карты времени жизни клеток HEK293, экспрессирующих каждую конструкцию, показаны на фиг. 4D.

    Рис. 4. Время жизни тандемных конструкций mNeonGreen-Red FP.

    (A) Время жизни mNeonGreen в индивидуальных клетках, экспрессирующих тандемную конструкцию слияния mNeonGreen-красный белок. Черные полосы указывают средний доверительный интервал ± 95%. (B) Расчеты эффективности FRET для каждой тандемной конструкции. *** = P <0,0005 по сравнению с NG-Stop, а # означает P <0,0005 по сравнению с NG-Stop и P <0,0005 по сравнению с NG-mRuby3. NG-mScarlet-I и NG-mCherry статистически не различаются (P = 0.75) (C) Пример кривых распада для каждого тандема, представляющий среднее время жизни всех клеток для каждой конструкции. (D) Пример тепловых карт срока службы для одного кадра для каждой конструкции. N для каждой конструкции имеет следующий вид: NG-Stop: 68 клеток, NG-mRuby3: 63 клетки, NG-mScarlet-I: 64 клетки и NG-mCherry: 64 клетки.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g004

    Конфокальная визуализация демонстрирует более низкую, чем ожидалось, красную флуоресценцию для конструкции mNeonGreen-mRuby3

    Для дальнейшего исследования плохой работы mRuby3 как акцептора FRET мы обратились к конфокальной микроскопии, чтобы проанализировать поведение каждой тандемной конструкции.Присутствие mNeonGreen и красных FP было независимо исследовано путем последовательного возбуждения лазерами 488 нм и 559 нм, при этом излучения каждого канала собирались отдельно для предотвращения просачивания. Примеры изображений с широким полем клеток, экспрессирующих каждую конструкцию, показаны на фиг. 5A. Качественно на объединенном изображении зеленого и красного каналов можно увидеть, что клетки, экспрессирующие конструкцию NG-mRuby3, имели широко варьирующуюся интенсивность зеленой и красной флуоресценции. Интересно, что регулярно наблюдались клетки, которые, по-видимому, содержат высокие уровни mNeonGreen и низкие уровни mRuby3 или наоборот, наряду с клетками, которые, по-видимому, содержат оба белка.Эта гетерогенность также была отмечена в конструкциях NG-mScarlet-I и NG-mCherry, но с гораздо меньшей частотой (рис. 5A). Этот результат был довольно неожиданным, учитывая, что конструкции были разработаны для экспрессии mNeonGreen и красного FP стехиометрически и в тандеме. Теоретически можно ожидать, что выражение таких тандемных конструкций приведет к фиксированному отношению интенсивности зеленого к красному, где интенсивность красного изменяется в зависимости от яркости красного FP, а интенсивность зеленого изменяется из-за изменений в степени FRET.Чтобы проверить это предсказание и количественно оценить неоднородность для каждой конструкции, мы исследовали интересующие области (ROI), содержащие одну ячейку, извлекли интенсивность зеленого и красного для этой ячейки после вычитания фона и построили полученные интенсивности на уровне пикселей. Затем полученные зелено-красные графики интенсивности для каждой ячейки были подогнаны с помощью линейной регрессии. Пример этого рабочего процесса показан на рис. S3. Хотя абсолютное значение этого наклона будет различным для каждой пары флуорофоров и для разных условий визуализации, изменения этого наклона от клетки к клетке в одних и тех же условиях визуализации будут указывать на неоднородность каждая конструкция.Как и ожидалось от тандемной конструкции и на основе качественных оценок изображений (рис. 5A), гистограммы наклонов для отдельных клеток, экспрессирующих конструкции NG-mCherry и NG-mScarlet-I, показали разумное распределение и узкий разброс наклонов (рис. 5C и 5D). Это указывает на то, что большинство клеток, экспрессирующих эти конструкции, содержат фиксированное соотношение mNeonGreen к красному FP. Напротив, гистограмма наклонов для клеток, экспрессирующих NG-mRuby3, не была столь же равномерно распределена (фиг. 5B). Действительно, большинство клеток, экспрессирующих эту конструкцию, имеют наклон, близкий к 0, предполагая, что эти клетки содержат измеримые уровни mNeonGreen, но низкие уровни флуоресцентного mRuby3.Интересно, что это отсутствие обильной красной флуоресценции не происходит из-за недостатка белка mRuby3, поскольку вестерн-блоттинг клеток, трансфицированных NG-mRuby3, дает такую ​​же картину полос, как и клетки, трансфицированные NG-mScarlet-I и NG-mCherry (S4 Фиг.). Важно отметить, что в клетках, трансфицированных NG-mRuby3, нет полосы меньшего размера мономера, что указывает на то, что наши тандемные конструкции, как правило, не повреждены и исключает возможность получения mNeonGreen без mRuby3. Взятые вместе, эти данные обеспечивают механистическое объяснение наших данных FLIM, в которых все клетки, экспрессирующие конструкции NG-mScarlet-I и NG-mCherry, демонстрируют устойчивый FRET, тогда как подавляющее большинство конструкций NG-mRuby3 — нет.Кроме того, они предполагают, что низкая производительность NG-mRuby3 может быть связана с плохим созреванием акцептора по сравнению с NG-mScarlet-I и даже NG-mCherry.

    Рис. 5. Конфокальная микроскопия тандемных конструкций.

    (A) Примеры изображений конструкций NG-Red FP при прямом возбуждении лазерами с длиной волны 499 нм или 559 нм. Гистограммы наклонов корреляций интенсивности красного / зеленого для отдельных клеток, экспрессирующих (B), NG-mRuby3 (n = 1077 клеток), (C), NG-mScarlet-I (n = 1745 клеток) и ( D) NG-mCherry (n = 1557 клеток).

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g005

    mRuby3 демонстрирует поведение, аналогичное в нескольких конфигурациях, и поведение, подобное медленно созревающему варианту mScarlet

    Чтобы лучше определить, является ли поведение mRuby3 специфическим для нашей системы или присущим самому mRuby3, мы разработали несколько дополнительных тандемных конструкций. Во-первых, мы поменяли ориентацию тандема, чтобы увидеть, является ли mRuby3 более толерантным к с-концевому слиянию, и заменили линкер на глицин-сериновый линкер немного меньшего размера (GGSGG).Эта конструкция mRuby3-GGSGG-NG преформирована аналогично исходной конструкции NG-mRuby3, давая среднее время жизни 2,96 ± 0,02 нс (фиг. 6A), что соответствует эффективности FRET 4 ± 1% (фиг. 6B). Конфокальный анализ этой конструкции (рис. 6C и 6D) также выявляет фенотип, аналогичный NG-mRuby3, где большинство клеток имеют наклон, близкий к 0, что указывает на то, что большинство клеток имеют детектируемую флуоресценцию mNeonGreen, но не имеют флуоресценции mRuby3. Затем мы вставили оптимизированную пептидную последовательность самосплайсинга (пептид P2A) [34] между NG и mRuby3 в конструкции NG-Ruby3.Эта последовательность вызывает событие пропуска рибосомы во время трансляции, что приведет к высвобождению полипептида NG из рибосомы во время трансляции, прежде чем повторно инициировать трансляцию части конструкции mRuby3, в результате чего два отдельных белка транслируются с одного и того же транскрипта. Примечательно, что мы сконструировали конструкцию так, чтобы большая часть дополнительной пептидной последовательности P2A была присоединена к NG, с единственным добавлением к mRuby3, являющимся N-концевым пролином после успешного расщепления. Клетки, экспрессирующие NG-P2A-mRuby3, имели среднее время жизни 3.09 ± 0,01 нс (фиг. 6A), и время жизни было статистически неотличимо от времени жизни клеток, экспрессирующих NG-Stop, собранных в тот же день. Этот результат ожидался, поскольку NG и mRuby3 в этих клетках больше не должны быть связаны друг с другом, и действительно, вестерн-блот-анализ этой конструкции подтверждает, что пептид P2A расщепляется с высокой эффективностью (S4 фиг.). К сожалению, хотя эта конструкция показывает только незначительные улучшения в поведении mRuby3, как определено конфокальным анализом (рис. 6C и 6E), который по-прежнему показывает высокую долю клеток с почти нулевым наклоном, но также показывает вторичный, ненулевой пик.

    Рис. 6. Поведение отдельных тандемных конструкций, содержащих mRuby3 и mScarlet.

    (A) Время жизни отдельного набора экспрессирующих NG-Stop клеток со временем жизни 2 новых тандемных конструкций, содержащих mRuby3, и конструкции, содержащей mScarlet. Черные полосы указывают средний доверительный интервал ± 95%. *** = P <0,0005 по сравнению с NG-Stop. NG-Stop и NG-P2A-mRuby3 статистически не различаются (P = 0,65). N для измерений времени жизни каждой конструкции имеет следующий вид: NG-Stop: 64 клетки, mRuby3-GGSGG-NG: 66 клеток, NG-P2A-mRuby3: 69 клеток и NG-mScarlet: 77 клеток. (B) Средняя эффективность FRET для каждой из новых тандемных конструкций. (C) Пример слияния конфокальных изображений клеток HEK293, экспрессирующих каждую из новых тандемных конструкций. Объединенные гистограммы наклонов клеток, экспрессирующих (D) mRuby3-GGSGG-NG, (E) NG-P2A-mRuby3 и (F) NG-mScarlet. N для конфокальных измерений каждой конструкции имеет следующий вид: mRuby3-GGSGG-NG: 2302 клеток, NG-P2A-mRuby3: 1548 клеток и NG-mScarlet: 1150 клеток.

    https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0219886.g006

    В то время как mScarlet-I и mCherry созревают с периодом полураспада 36 и 15 минут соответственно, mRuby3, как сообщается, имеет полупериод созревания 136,5 минут. Чтобы проверить, может ли большая разница во времени созревания привести к фенотипу, который мы видим для mRuby3, мы мутировали mScarlet-I в тандеме NG-Scarlet-I в яркий, но медленно созревающий вариант Scarlet, mScarlet, введя мутацию I74T. Сообщается, что этот медленно созревающий вариант имеет период полувыведения 132.4 минуты в тех же условиях, что и измерения созревания mRuby3. Клетки, экспрессирующие NG-mScarlet, характеризовались сильно варьирующимся временем жизни, составляющим в среднем 2,67 ± 0,05 нс, что приводило к средней эффективности FRET 13 ± 2% (фиг. 6A и 6B). В конфокальном режиме клетки, экспрессирующие этот NG-Scarlet, также демонстрируют гетерогенный фенотип (рис. 6C), но большинство клеток демонстрируют ненулевой наклон, указывающий на то, что большинство клеток демонстрируют как зеленую, так и красную флуоресценцию (рис. 6F).

    Наконец, мы обратились к анализу поведения mRuby3 с помощью эволюционно отличного зеленого FP, mClover3.Используя тандемную конструкцию mClover3-mRuby3, доступную от Addgene, мы создали конструкцию mClover3-Stop, которая служит только контролем донора, и проанализировали способность mRuby3 действовать как акцептор для mClover3 с помощью FLIM. В дополнение к использованию другого зеленого FP, эта конструкция также использует линкер из 12 аминокислот, а не эффективные линкеры из 17 или 15 аминокислот, которые мы использовали до сих пор (таблица S1). Клетки, экспрессирующие mClover3-Stop, демонстрируют стабильное моноэкспоненциальное время жизни 3,11 ± 0,01 нс (S5 фиг.).Когда mRuby3 присутствует в конструкции, чтобы действовать как акцептор, это время жизни сокращается до 2,81 ± 0,05 нс в среднем (S5 Рис.). Это приводит к средней эффективности FRET 10 ± 2%. Также стоит отметить, что, как и NG-mScarlet, mClover3-mRuby3 имеет большой диапазон времени жизни. Учитывая, что спектральные и физические свойства mClover3 очень похожи на mNeonGreen, это, по-видимому, указывает на небольшое улучшение производительности от имени mRuby3 либо за счет линкера сортировщика, либо за счет включения mClover3 вместо mNeonGreen.Несмотря на это, по-прежнему наблюдается высокая гетерогенность в выражении этого тандема (S5 Fig), что указывает на то, что основные проблемы с mRuby3 все еще присутствуют.

    Экспрессия mNeonGreen-mRuby3 в течение более длительных периодов времени улучшает его производительность

    Наши предыдущие данные показали, что плохие акцепторные свойства mRuby3 частично могут быть связаны с неэффективным созреванием. Чтобы проверить это в дальнейшем, мы провели эксперименты FLIM в течение пяти дней после временной трансфекции конструкцией NG-mRuby3.Как видно на фиг. 7A, среднее время жизни mNeonGreen в конструкции NG-mRuby3 снижается с 2,92 ± 0,03 нс через 1 день после трансфекции (DPT) до 2,41 ± 0,09 нс 5 DPT. Это приводит к изменению средней эффективности FRET с 4 ± 0,9% 1 DPT до эффективности 21 ± 3% эффективности 5 DPT трансфекции (рис. 7B). Примеры карт продолжительности жизни отдельных клеток, экспрессирующих NG-mRuby3 2–5 DPT, показаны на фиг. 7C, а примерная карта продолжительности жизни для 1 DPT показана на фиг. 4D. Примеры флуоресцентных кривых затухания для каждой DPT доступны на S6 Рис.С течением времени количество ячеек, показывающих время жизни в пределах диапазона NG-Stop, также уменьшалось. Однако можно было наблюдать даже 5 клеток DPT, у которых время жизни донора было примерно таким же, как у них. Это указывает на то, что, хотя неэффективное созревание в клетках млекопитающих может быть частью причины плохой работы mRuby3 в предыдущих экспериментах, вероятно, это не единственный способствующий фактор. Чтобы гарантировать, что изменения, наблюдаемые с течением времени для конструкции NG-mRuby3, были вызваны изменениями, происходящими с белком mRuby3, а не с mNeonGreen, время жизни mNeonGreen конструкций NG-mRuby3 определяли до и после фотообесцвечивания акцептора на 5 DPT (рис. 7D). .Независимо от продолжительности жизни каждой клетки до фотообесцвечивания акцептора, все клетки показали время жизни, аналогичное времени жизни конструкции NG-Stop после фотообесцвечивания акцептора. Фиг. 7F показывает примерные карты времени жизни двух клеток, экспрессирующих NG-mRuby3, через 5 дней после трансфекции до и после фотообесцвечивания акцептора, а примерные следы флуоресцентного распада можно найти на фиг. S6. Эти результаты демонстрируют, что время жизни mNeonGreen оставалось стабильным в течение 5 дней. это указывает на то, что изменения, которые претерпела конструкция NG-mRuby3, были вызваны изменениями, происходящими с белком mRuby3.

    Рис. 7. FRET NG-mRuby3 через 1–5 дней после трансфекции.

    (A) Время жизни клеток, экспрессирующих конструкцию NG-mRuby3, через 1–5 дней после трансфекции (DPT) 1 DPT реплицируется из фиг. 3A для справки. Черные полосы указывают средний срок службы ± 95% доверительный интервал. Зеленая заливка указывает диапазон продолжительности жизни, наблюдаемый для конструкции NG-Stop. *** = P <0,0005 по сравнению с 1 DPT, и # = P <0,0005 по сравнению с 1 DPT и P <0,0005 по сравнению с днем ​​ранее.N для каждого условия выглядит следующим образом: 2 DPT: 30 ячеек, 3 DPT: 34 ячейки, 4 DPT: 35 ячеек и 5 DPT: 31 ячейка. (B) Средняя эффективность FRET для NG-mRuby3 1–5 DPT. (C) Примеры карт продолжительности жизни, собранные каждый день тестирования. (D) Данные о времени жизни клеток, экспрессирующих NG-mRuby3, через 5 дней после трансфекции до и после фотообесцвечивания акцептора (n = 15). *** = P <0,0005 после фотообесцвечивания по сравнению с до фотообесцвечивания. (E) Примеры карт продолжительности жизни одних и тех же клеток до и после фотообесцвечивания акцепторов.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.g007

    Обсуждение

    Разработка и проверка ярких мономерных пар зеленый / красный FP значительно увеличит общее распространение зеленого / красного FRET. Яркие флуорофоры упрощают обнаружение и повышают соотношение сигнал / шум. Использование зеленого и красного флуорофоров имеет несколько явных преимуществ, включая снижение токсичности источника возбуждения, большее спектральное разделение, большие радиусы Ферстера и лучшую проницаемость тканей для длин волн возбуждения и излучения.Эти преимущества позволяют проводить более новые, более точные и точные исследования с меньшим количеством вмешивающихся факторов, чем то, что можно было бы сделать с парами FRET голубой / желтый. mNeonGreen — идеальный донор для экспериментов Green / Red FRET. Его спектр возбуждения и излучения со смещением желтого цвета обеспечивает высокую степень перекрытия с красными FP, а также возможность возбуждения синим светом с меньшей энергией, чем голубой, или более смещенным синим зеленым светом FP. Кроме того, mNeonGreen необычайно ярка при однофотонном освещении, что позволяет легко наблюдать за его сигналами.Сообщается, что как mScarlet-I, так и mRuby3 имеют одни из самых высоких коэффициентов экстинкции среди любых красных FP, а также являются одними из самых ярких мономерных красных FP на сегодняшний день. Эти факты указывают на то, что из них должны получиться отличные акцепторы FRET, что сделает зеленый / красный FRET более доступным для исследователей. В этом исследовании мы стремились проверить это предсказание с помощью различных оптических методов.

    Мы проверили способность этих двух новых красных FP — mRuby3 и mScarlet-I — вместе с mCherry действовать как акцепторы FRET для mNeonGreen, используя подход тандемных белков.Первоначально мы использовали интенсиометрический спектральный FRET для оценки эффективности FRET между mNeonGreen и красными FP (рис. 2). В этом анализе NG-mScarlet-I продемонстрировал самую высокую эффективность FRET, за ним следовали NG-mCherry, а затем NG-mRuby3 (рис. 2F). Это было удивительно, учитывая, что сообщаемые свойства mRuby3 предсказывают, что он будет лучшим акцептором для mNeonGreen. В частности, mRuby3 имел самую высокую степень перекрытия между его спектром возбуждения и спектром излучения mNeonGreen, и он имеет самый высокий коэффициент экстинкции из трех красных FP в этом исследовании (таблица 1).Эти эксперименты также продемонстрировали преимущества этих новых белков по сравнению с mCherry, поскольку mScarlet-I производил почти в 3 раза больше интенсивности, чем mCherry, несмотря только на 7% разницу в оценочной эффективности, а mRuby3 производил почти в 1,5 раза больше интенсивности mCherry, несмотря на NG- mRuby3 демонстрирует более низкую эффективность FRET, чем NG-mCherry. Это отражает разницу в коэффициенте экстинкции и квантовом выходе между этими двумя белками и mCherry и демонстрирует, что mScarlet-I является лучшим общим акцептором, который обеспечит больший сигнал и больший динамический диапазон для интенсивных экспериментов FRET на основе зеленого-красного.

    Чтобы подтвердить эти результаты, мы обратились к более точной методике FLIM. Преимущество FLIM состоит в том, что необходимо наблюдать только за донором, что устраняет необходимость корректировать наши данные с учетом различий в физических свойствах акцепторов, о которых сообщают другие. Кроме того, наша установка FLIM позволяет анализировать отдельные клетки, чтобы получить более подробный профиль поведения тандемной конструкции. После определения mNeonGreen в качестве подходящего донора для экспериментов 2-Photon FLIM (рис. 3), мы использовали этот метод для измерения эффективности FRET каждого тандема в исследовании (рис. 4).Мы обнаружили, что как mScarlet-I, так и mCherry были способны эффективно обрабатывать FRET с помощью mNeonGreen почти в одинаковой степени, но mRuby3 не мог вызвать значительную FRET (рис. 4A и 4B). Было несколько удивительно видеть, что mCherry предварительно сформирован так же хорошо, как mScarlet-I в качестве акцептора FRET в наших экспериментах с FLIM, несмотря на значительно более низкий коэффициент экстинкции. Это может быть демонстрацией быстрого созревания mCherry, что может позволить получить максимально возможное количество полностью развитых тандемов.Для дальнейшего исследования плохой работы mRuby3s мы использовали конфокальную микроскопию, чтобы выявить большую гетерогенность в способе экспрессии тандема NG-mRuby3 (рис. 5A и 5B), при этом многие клетки демонстрируют либо красную, либо зеленую флуоресценцию без другой. Это было несмотря на анализ вестерн-блоттинга, предполагающий, что большинство клеток должно экспрессировать полноразмерный тандемный белок (S4, фиг.). Такое поведение было постоянным для трех дополнительных конструкций mRuby3 (рис. 6). Изменение ориентации конструкций и укорочение линкера между ними (Ruby3-GGSGG-NG), по-видимому, практически не повлияло на работу mRuby3 в качестве акцептора или на наблюдаемую гетерогенность в конфокальном режиме (рис. 6).Лишь незначительные улучшения наблюдались в конфокальной конструкции с конструкцией NG-P2A-mRuby3, которая позволила бы mRuby3 созревать без ковалентной связи с NG (конформация, которая препятствовала FRET, но позволяла нам оценить поведение mRuby3 как независимого белка). Примечательно, что это поведение было похоже на то, что наблюдалось с медленно созревающим вариантом Scarlet, mScarlet (рис. 6), предполагая, что низкая производительность mRuby3 может быть связана с его более длительным временем созревания. Учитывая эти результаты, были проведены эксперименты с конструкцией NG-mRuby3 через несколько дней после трансфекции, и действительно было обнаружено, что предоставление конструкции NG-mRuby3 большего времени для созревания улучшает ее характеристики в качестве акцептора FRET (фиг. 7).

    Теоретически более высокий коэффициент экстинкции и квантовый выход mRuby3 предсказывает, что он должен превзойти mCherry и mScarlet-I. Однако, что шокирует, мы обнаружили противоположный результат (Рис. 2 и Рис. 4). Даже в самых идеальных испытанных условиях (через 4 или 5 дней после трансфекции) тандем NG-mRuby3 все еще не достиг эффективности FRET тандемов NG-mScarlet-I и NG-mCherry (рис. 7). Это контрастирует с предыдущим сообщением об очень хорошем преформировании аналогичной конструкции mNeonGreen-mRuby3, достигающей почти 40% эффективности как в клетках HEK293, так и в клетках Hela [10].На данный момент причины этого несоответствия неясны, хотя сходство в длине и составе линкеров, времени трансфекции и типах клеток предполагает, что это не связано с различием в составе используемых тандемных конструкций или различиями в условиях, в которых были проведены эксперименты (для каких условий сообщалось). Это несоответствие также сохраняется для конструкции mClover3-mRuby3 (S5 Fig), опять же, по неизвестным причинам. Кроме того, в ходе наших экспериментов мы обнаружили, что спектр излучения mRuby3 в этом тандеме был слегка смещен влево на 6 нм по сравнению с тем, что сообщается очищенным mRuby3 [10] (S1 Рис).Об этом открытии ранее не сообщалось, и, хотя этот сдвиг был незначительным, его необходимо было скорректировать, чтобы должным образом соответствовать нашим данным. Причина этого спектрального сдвига остается неясной, но может быть просто результатом того, что mRuby3 имеет несколько иное поведение в клетках по сравнению с очищенной системой. Это также может быть связано с фотохромным поведением, о котором ранее сообщалось для mRuby3 [11]. Какой бы ни была причина, непредсказуемые изменения в спектре очень важны для экспериментов с FRET, поскольку они могут привести к изменениям интенсивности флуоресценции, которые могут быть ошибочно интерпретированы как изменения в состоянии FRET.Возможно, что это поведение также повлияло на наши спектральные эксперименты с FRET (рис. 2) и могло объяснить несоответствие между вычисленными эффективностями FRET для конструкции NG-mRuby3 в спектральных анализах FRET и FLIM.

    Хотя к настоящему времени опубликовано несколько исследований с использованием mRuby3, исследования, в которых использовался его предшественник, mRuby2, в целом показали положительные результаты [4, 9–11, 35, 36]. Хотя в исследовании, аналогичном нашему, с использованием зеленого FP mClover в качестве донора сообщается о гораздо более низкой, чем ожидалось, эффективности при использовании mRuby2 в качестве акцептора [37].Общность между нашим и их исследованиями заключается в использовании линий клеток млекопитающих. Это вместе с нашими данными, представленными здесь, предполагают, что низкая или медленная эффективность созревания серии Ruby является основным фактором низкой производительности mRuby3 через 1-3 дня после трансфекции. Проблемы созревания также могут сочетаться с вариабельностью скорости оборота белка от клетки к клетке или проблемами стабильности белка, и комбинация этих факторов, вероятно, объясняет высокую степень гетерогенности, которую мы наблюдаем в конфокальном режиме с нашими конструкциями mRuby3, а также с вариантом с медленным созреванием. mScarlet (Рис. 5 и Рис. 6).

    В целом мы обнаружили, что и mCherry, и mScarlet-I действуют как отличные акцепторы для mNeonGreen в нашей модельной системе, причем каждый белок предлагает определенные преимущества в зависимости от используемых систем обнаружения. Кроме того, мы продемонстрировали, как факторы, выходящие за рамки классически рассматриваемых параметров FRET (квантовый выход донора, спектральное перекрытие и коэффициент экстинкции акцептора), могут непредсказуемо влиять на системы FRET. Именно один из этих «неклассических» факторов, время созревания, заставляет нас сделать вывод, что использование mRuby3 (и, возможно, медленно созревающего mScarlet) следует проводить с особой осторожностью там, где мы столкнулись с недостатками (гетерогенная экспрессия и низкая производительность). вскоре после начала экспрессии) будут смягчены или перевешены потенциальными преимуществами mRuby3.Также важно учитывать, что каждый из этих белков может вести себя по-разному в разных системах. Это остается возможным объяснением различий между нашими данными и данными, сообщенными другими, а наши противоречивые данные подчеркивают важность хорошо продуманного тестирования и контроля, особенно при разработке более сложной системы FRET.

    Заключение

    В этом исследовании мы проверяем жизнеспособность mNeonGreen в качестве донора FRET и mRuby3, mScarlet-I и mCherry в качестве акцепторов FRET с тандемной модельной системой FP.Мы обнаружили, что mNeonGreen хорошо работает в качестве донора FRET как в интенсиометрических, так и в 2-фотонных экспериментах FLIM. При тестировании красных FP в качестве акцепторов для mNeonGreen мы обнаружили, что и mScarlet-I, и mCherry легко могли выполнять FRET с помощью mNeonGreen. Эти белки преобразуются одинаково хорошо в экспериментах FLIM, но mScarlet-I превосходит mCherry в интенсиометрическом исследовании из-за своего более высокого квантового выхода. Однако, когда обнаружение FRET измеряется независимо от интенсивности излучения акцептора, например, в нашей системе FLIM, mCherry демонстрирует равную эффективность FRET, но более последовательное выражение, что делает его лучшим выбором по сравнению с mScarlet-I в этом сценарии.Напротив, мы обнаружили, что mRuby3 плохо работает как акцептор FRET в нашей модельной системе, несмотря на то, что, по прогнозам, он является лучшим акцептором FRET из трех белков. Основным фактором этой плохой производительности является медленное созревание mRuby3, хотя стабильность белка и межклеточная гетерогенность в обмене белка также могут способствовать или усугублять эту проблему.

    В целом, мы обнаружили, что mNeonGreen является отличным донором желто-зеленого цвета, а mScarlet-I — одним из лучших универсальных акцепторов для экспериментов FRET с зеленым-красным с использованием флуоресцентных белков.

    Дополнительная информация

    S1 Рис. Построение сканирования излучения, используемого для спектрального FRET.

    (A) Сканирование излучения нескольких независимых трансфекций NG-Stop при возбуждении на длине волны 470 нм, наложенное на зарегистрированное излучение чистого mNeonGreen. Среднее значение этих сканирований показано на рис. 2В. Из-за согласованности NG-Stop с чистым спектром mNeonGreen чистый спектр mNeonGreen использовался в качестве донорного спектра для линейного несмешивания. Сканирование эмиссии акцептора из нескольких независимых трансфекций (B), NG-mRuby3, (D), NG-mScarlet-I и (F) NG-mCherry, достигнутое путем возбуждения акцептора непосредственно с использованием света 530 и 540 нм, с наложенным чистым спектром красного FP в каждом состоянии.Среднее значение каждого состояния показано рядом с сообщенным чистым спектром для каждого акцептора, показанным в (C) , (E) и (G) соответственно. Сканирование mScarlet-I и mCherry в конструкциях NG-mScarlet-I и NG-mCherry точно воспроизводило восходящий ход и пик очищенных mScarlet-I и mCherry, причем основное различие между наблюдаемым спектром и спектром чистого белка заключалось в более быстром распаде хвост спектра на высоких длинах волн. Напротив, сканирование mRuby3 в конструкции NG-mRuby3 выявило спектр излучения, который был на 6 нм смещен по сравнению с тем, что сообщалось для очищенного mRuby3.Из-за различий, наблюдаемых с каждым из красных акцепторных белков и различных уровней фона, были созданы индивидуальные акцепторные эмиссионные спектры, которые служат в качестве акцепторной эмиссии для линейного перемешивания, показанного в (C) , (E) и ( G) как черная пунктирная линия. Необработанные кривые, использованные для определения эффективности (H), NG-mRuby3, (I), NG-mScarlet-I и (J), NG-mCherry, показаны, что соответствует графику эффективности на рис. 2F.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s001

    (TIF)

    S2 Рис. Характеристики EGFP при визуализации с помощью 2-Photon FLIM.

    (A) Данные о продолжительности жизни, собранные для отдельных клеток HEK293, экспрессирующих цитозольный EGFP при различной мощности лазера до 25 Вт / см 2 после 50 кадров. Черные полосы указывают средний доверительный интервал ± 95%. (B) Lifetime и (C) интенсивность образцов, снятых на протяжении 300 кадров при различной мощности лазера.* = P <0,05, ** = P <0,005 и *** = P <0,0005 по сравнению с набором данных 2 , сопоставленным с рамкой 5 Вт / см. N для каждого образца составляет 5 Вт / см 2 : 10 ячеек, 10 Вт / см 2 : 10 ячеек, 15 Вт / см 2 : 10 ячеек, 20 Вт / см 2 : 9 ячеек, 25 Вт / см 2 : 10 ячеек.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s002

    (TIF)

    S4 Рис. Иммуноблот тандемных конструкций NG-Stop и NG-Red FP.

    10 мкг общего белка, полученного из клетки, временно трансфицированной данной конструкцией, через один день после трансфекции загружали в 16% гель SDS-PAGE, и mNeonGreen визуализировали с использованием антитела (A), против mNeonGreen и (B) анти-GFP (для обнаружения конструкций, содержащих mClover3).NG-Stop имеет полосу, близкую к расчетной молекулярной массе 27 кДа. Каждый из тандемов, кроме NG-P2A-mRuby3, показывает яркую полосу при полном прогнозируемом весе тандемных конструкций, 54 кДА. Важно отметить, что только NG-Stop и NG-P2A-mRuby3 показывают полосы, соответствующие мономерному mNeonGreen. NG-mCherry, NG-mScarlet-I, NG-mScarlet и mClover3-mRuby3 демонстрируют продукты между ожидаемым полным тандемом и мономером mNeonGreen, которые, вероятно, связаны с гидролизом основной цепи красных FP во время лизиса клеток и последующей денатурации белка, ранее сообщалось о DsRed-подобных красных FP [38].Обратите внимание, что полоса, которая появляется между 75 и 100 кДа в (A) , присутствует на всех дорожках, указывая на то, что это неспецифическая мишень для антитела mNeonGreen.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s004

    (TIF)

    S5 Рис. Характеристики mRuby3 в качестве акцептора FRET для GFP, такого как зелено-желтый FP mClover3.

    (A) Конфокальное изображение слияния клеток HEK293, экспрессирующих mClover3-mRuby3, демонстрирует, что mClover3-mRuby3 также демонстрирует высокую гетерогенность экспрессии, аналогичную той, что наблюдалась с другими конструкциями mRuby3.(B) Время жизни клеток HEK293, экспрессирующих mClover3-Stop (условие только для донора) и mClover3-mRuby3. Каждый символ представляет собой измерение одной ячейки. Черные полосы указывают средний доверительный интервал ± 95%. N для каждого образца имеет следующий вид: mClover3-Stop: 65 клеток и mClover3-mRuby3: 71 клетка. *** = P <0,0005 по сравнению с mClover3-Stop. (C) Средняя эффективность FRET mClover3-mRuby3.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s005

    (TIF)

    S6 Рис.Пример кривых затухания из временного ряда NG-mRuby3.

    (A) Пример кривых затухания флуоресценции отдельных клеток, экспрессирующих NG-mRuby3 через 2–5 дней после трансфекции (DPT), представляющий среднее значение для каждого состояния. Кривая NG-Stop и кривые NG-mRuby3 1 DPT с рис. 3C также показаны для справки. (B) Пример кривых затухания флуоресценции для отдельной клетки, экспрессирующей NG-mRuby3 5 DPT, до и после фотообесцвечивания акцептора. Кривая NG-Stop с рис. 3C повторяется здесь для справки.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s006

    (TIF)

    S1 Стол. Аминокислотные последовательности конструкций, использованных в этой рукописи.

    Цветные аминокислотные последовательности для каждой конструкции показаны выше. Для NG-P2A-mRuby3 сайт расщепления находится между остатками глицина и пролина, обнаруженными непосредственно перед последовательностью mRuby3, и обозначен знаком |.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0219886.s008

    (TIF)

    Благодарности

    Мы хотели бы поблагодарить Дэвида Юла и Эндрю Войтовича за полезные комментарии в ходе исследования, а также за щедрый обмен оборудованием.

    Ссылки

    1. 1. Prasher DC, Eckenrode VK, Ward WW, Prendergast FG, Cormier MJ. Первичная структура зеленого флуоресцентного белка Aequorea victoria. Ген. 1992. 111 (2): 229–33. pmid: 1347277
    2. 2. Мац М.В., Фрадков А.Ф., Лабас Ю.А., Савицкий А.П., Зарайский А.Г., Маркелов М.Л. и др. Флуоресцентные белки небиолюминесцентных видов Anthozoa. Биотехнология природы. 1999. 17 (10): 969–73. pmid: 10504696
    3. 3. Wiedenmann J, Schenk A, Rocker C, Girod A, Spindler KD, Nienhaus GU.Ярко-красный флуоресцентный белок с быстрым созреванием и пониженной тенденцией к олигомеризации из Entacmaea quadricolor (Anthozoa, Actinaria). Proc Natl Acad Sci U S. A. 2002; 99 (18): 11646–51. Epub 2002/08/20. pmid: 12185250; PubMed Central PMCID: PMC129323.
    4. 4. Shaner NC, Lambert GG, Chammas A, Ni Y, Cranfill PJ, Baird MA и др. Яркий мономерный зеленый флуоресцентный белок, полученный из Branchiostoma lanceolatum. Природные методы. 2013; 10 (5): 407–409. Epub 2013/03/26. pmid: 23524392; PubMed Central PMCID: PMC3811051.
    5. 5. Алие Н., Фаббретти А., Лупиди Г., Цекоа Т., Спурио Р. Разработка вариантов цвета зеленого флуоресцентного белка (GFP) для термостабильности, чувствительности к pH и улучшения кинетики складывания. Прикладная микробиология и биотехнология. 2015; 99 (3): 1205–16. Epub 2014/08/13. pmid: 25112226.
    6. 6. Shaner NC, Campbell RE, Steinbach PA, Giepmans BN, Palmer AE, Tsien RY. Улучшенные мономерные красные, оранжевые и желтые флуоресцентные белки, полученные из Discosoma sp. красный флуоресцентный белок.Биотехнология природы. 2004. 22 (12): 1567–72. Epub 2004/11/24. pmid: 15558047.
    7. 7. Bayle V, Nussaume L, Bhat RA. Комбинация нового мутантного зеленого флуоресцентного белка TSapphire и варианта mOrange DsRed для создания универсального анализа FRET-FLIM in planta. Физиология растений. 2008. 148 (1): 51–60. Epub 2008/07/16. pmid: 18621983; PubMed Central PMCID: PMC2528103.
    8. 8. Кредель С., Освальд Ф., Ниенхаус К., Дойшл К., Рокер С., Вольф М. и др. mRuby, яркий мономерный красный флуоресцентный белок для мечения субклеточных структур.PLoS One. 2009; 4 (2): e4391. Epub 2009/02/06. pmid: 114; PubMed Central PMCID: PMC2633614.
    9. 9. Лам AJ, St-Pierre F, Gong Y, Marshall JD, Cranfill PJ, Baird MA и др. Улучшение динамического диапазона FRET с помощью ярко-зеленых и красных флуоресцентных белков. Природные методы. 2012; 9: 1005. https://www.nature.com/articles/nmeth.2171#supplementary-information. pmid: 22961245
    10. 10. Баджар Б.Т., Ван Э.С., Лам А.Дж., Ким Б.Б., Джейкобс С.Л., Хоу Е.С. и др. Повышение яркости и фотостабильности зеленых и красных флуоресцентных белков для визуализации живых клеток и отчетов FRET.Научные отчеты. 2016; 6: 20889. https://www.nature.com/articles/srep20889#supplementary-information. pmid: 26879144
    11. 11. Биндельс Д.С., Хаарбош Л., ван Верен Л., Постма М., Визе К.Э., Мастоп М. и др. mScarlet: яркий мономерный красный флуоресцентный белок для визуализации клеток. Природные методы. 2017; 14 (1): 53–6. Epub 2016/11/22. pmid: 27869816.
    12. 12. Rodriguez EA, Campbell RE, Lin JY, Lin MZ, Miyawaki A, Palmer AE и др. Набор инструментов для выращивания и свечения флуоресцентных и фотоактивных белков.Направления биохимических наук. 2017; 42 (2): 111–29. Epub 2016/11/07. pmid: 27814948; PubMed Central PMCID: PMC5272834.
    13. 13. Кремерс Дж. Дж., Гилберт С. Г., Крэнфилл П. Дж., Дэвидсон М. В., Поршневой DW. Краткий обзор флуоресцентных белков. Журнал клеточной науки. 2011; 124 (2): 157–60. pmid: 21187342
    14. 14. Чудаков Д.М., Мац М.В., Лукьянов С, Лукьянов К.А. Флуоресцентные белки и их применение в визуализации живых клеток и тканей. Физиологические обзоры. 2010. 90 (3): 1103–63.pmid: 20664080.
    15. 15. Lambert TJ. FPbase: база данных флуоресцентных белков, редактируемая сообществом. Природные методы. 2019; 16 (4): 277–8. pmid: 30886412
    16. 16. Greenwald EC, Mehta S, Zhang J. Генетически закодированные флуоресцентные биосенсоры освещают пространственно-временную регуляцию сигнальных сетей. Химические обзоры. 2018; 118 (24): 11707–94. pmid: 30550275
    17. 17. Фогель С.С., Талер С., Кушик С.В. Причудливый FRET. STKE науки: среда знаний о трансдукции сигналов.2006; 2006 (331): re2. Epub 2006/04/20. pmid: 16622184.
    18. 18. Wall AC, Джиус Дж. П., Буглевич DJ, Бэнкс AB, Като Т.А. Окислительный стресс и эндоредупликация, вызванные воздействием синего света на клетки CHO. Мутационные исследования. 2019; 841: 31–5. Epub 2019/05/30. pmid: 31138408.
    19. 19. Сибуя К., Онодера С., Хори М. Длина токсичной волны синего света меняется по мере роста насекомых. PLoS One. 2018; 13 (6): e0199266. Epub 2018/06/20. pmid: 296; PubMed Central PMCID: PMC6007831.
    20. 20.Arthaut LD, Jourdan N, Mteyrek A, Procopio M, El-Esawi M, d’Harlingue A и др. Накопление активных форм кислорода, вызванное синим светом, является следствием фотоцикла криптохрома дрозофилы. PLoS One. 2017; 12 (3): e0171836. Epub 2017/03/16. pmid: 28296892; PubMed Central PMCID: PMC5351967.
    21. 21. Наканиши-Уэда Т., Мадзима Х.Дж., Ватанабе К., Уэда Т., Индо ХП, Суэнага С. и др. Воздействие синего светодиода приводит к развитию внутриклеточных активных форм кислорода, перекисному окислению липидов и последующим клеточным повреждениям в культивируемых клетках пигментного эпителия сетчатки крупного рогатого скота.Свободно-радикальные исследования. 2013. 47 (10): 774–80. pmid: 23898883
    22. 22. Джоу MJ, Jou SB, Guo MJ, Wu HY, Peng TI. Генерация активных форм кислорода в митохондриях и увеличение кальция в астроцитах под действием видимого света. Ann N Y Acad Sci. 2004; 1011: 45–56. Epub 2004/05/06. pmid: 15126282.
    23. 23. Сигел А.П., Бэрд М.А., Дэвидсон М.В., Дэй Р.Н. Сильные и слабые стороны недавно созданных красных флуоресцентных белков, оцененных на живых клетках с помощью флуоресцентной корреляционной спектроскопии.Международный журнал молекулярных наук. 2013. 14 (10): 20340–58. Epub 2013/10/17. pmid: 24129172; PubMed Central PMCID: PMC3821618.
    24. 24. Шемякина И.И., Ермакова Г.В., Крэнфилл П.Дж., Бэрд М.А., Эванс Р.А., Суслова Е.А. и др. Мономерный красный флуоресцентный белок с низкой цитотоксичностью. Связь природы. 2012; 3: 1204. https://www.nature.com/articles/ncomms2208#supplementary-information. pmid: 23149748
    25. 25. Hoffman RM. Глава одиннадцатая — Визуализация живых клеток у живых животных с помощью флуоресцентных белков.В: Conn PM, редактор. Методы в энзимологии. 506: Academic Press; 2012. с. 197–224. https://doi.org/10.1016/B978-0-12-3-7.00035-4 pmid: 22341226
    26. 26. Кэмпбелл Р. Э., Тур О, Палмер А. Э., Штайнбах П. А., Бэрд Г. С., Захариас Д. А. и др. Мономерный красный флуоресцентный белок. Труды Национальной академии наук. 2002. 99 (12): 7877–82. pmid: 12060735
    27. 27. Lin F, Zhang C, Du M, Wang L, Mai Z, Chen T. Превосходная надежность метода ExEm-spFRET по сравнению с методом IIem-spFRET при измерении FRET живых клеток.Журнал микроскопии. 2018; 272 (2): 145–50. Epub 2018/10/20. pmid: 30338530.
    28. 28. Кушик С.В., Чен Х., Талер С., Пуль Х.Л., 3-й, Фогель С.С. Эталонные стандарты FRET Cerulean, Venus и VenusY67C. Biophys J. 2006; 91 (12): L99 – l101. Epub 2006/10/17. pmid: 17040988; PubMed Central PMCID: PMC1779932.
    29. 29. Schindelin J, Arganda-Carreras I, Frize E, Kaynig V, Longair M, Pietzsch T. и др. Фиджи: платформа с открытым исходным кодом для анализа биологических изображений. Природные методы.2012. 9 (7): 676–82. Epub 2012/06/30. pmid: 22743772; PubMed Central PMCID: PMC3855844.
    30. 30. Рашка С. MLxtend: предоставление утилит и расширений машинного обучения и обработки данных для стека научных вычислений Python. Журнал открытого программного обеспечения. 2018; 3 (24).
    31. 31. Клавель Д., Готтхард Дж., Фон Стеттен Д., Де Санктис Д., Паскье Х., Ламберт Г. Г. и др. Структурный анализ яркого мономерного желто-зеленого флуоресцентного белка mNeonGreen, полученного путем направленной эволюции.Acta crystallographica Раздел D, Структурная биология. 2016; 72 (Pt 12): 1298–307. Epub 2016/12/06. pmid: 27

      0; PubMed Central PMCID: PMC5137226.

    32. 32. Padilla-Parra S, Auduge N, Lalucque H, Mevel JC, Coppey-Moisan M, Tramier M. Количественное сравнение различных пар флуоресцентных белков для быстрого получения FRET-FLIM. Biophys J. 2009; 97 (8): 2368–76. Epub 22.10.2009. pmid: 19843469; PubMed Central PMCID: PMC2764072.
    33. 33. Молина Р.С., Тран Т.М., Кэмпбелл Р.Э., Ламберт Г.Г., Салих А., Шанер Н.С. и др.Гомологи зеленого флуоресцентного белка со смещением синего цвета ярче, чем усиленный зеленый флуоресцентный белок при двухфотонном возбуждении. Журнал писем по физической химии. 2017; 8 (12): 2548–54. pmid: 28530831
    34. 34. Ким Дж. Х., Ли С. Р., Ли Л. Х., Пак Х. Дж., Пак Дж. Х., Ли К. Я. и др. Высокая эффективность расщепления пептида 2А, полученного из тешовируса-1 свиньи, в линиях клеток человека, рыбок данио и мышей. PLoS One. 2011; 6 (4): e18556. Epub 2011/05/24. pmid: 21602908; PubMed Central PMCID: PMC3084703.
    35. 35. Mastop M, Bindels DS, Shaner NC, Postma M, Gadella TWJ Jr., Goedhart J. Характеристика спектрально разнообразного набора флуоресцентных белков как акцепторов FRET для mTurquoise2. Научный доклад 2017; 7 (1): 11999. Epub 2017/09/22. pmid: 28931898; PubMed Central PMCID: PMC5607329.
    36. 36. Джордж Абрахам Б., Саркисян К.С., Мишин А.С., Сантала В., Ткаченко Н.В., Карп М. Пары FRET на основе флуоресцентного белка с улучшенным динамическим диапазоном для измерения времени жизни флуоресценции.PLoS One. 2015; 10 (8): e0134436. Epub 2015/08/04. pmid: 26237400; PubMed Central PMCID: PMC4523203.
    37. 37. Мартин К.Дж., МакГи Э.Дж., Шварц Дж. П., Дрисдейл М., Брахманн С.М., Штук В. и др. Прием от лучшего донора; анализ пар долгоживущих донорских флуоресцентных белков для оптимизации динамических экспериментов FRET на основе FLIM. PLoS One. 2018; 13 (1): e0183585. Epub 2018/01/03. pmid: 29293509; PubMed Central PMCID: PMC5749721.
    38. 38. Гросс Л.А., Бэрд Г.С., Хоффман Р.С., Болдридж К.К., Цзянь Р.Ю.Структура хромофора в DsRed, красном флуоресцентном белке коралла. Труды Национальной академии наук. 2000. 97 (22): 11990–5. pmid: 11050230

    репортеров на основе FRET для прямой визуализации изменений концентрации и распределения абсцизовой кислоты в Arabidopsis

    1) Определите, способны ли трансгенные линии, экспрессирующие сенсоры, сообщать об эндогенных изменениях концентрации ABA. Этот эксперимент не является слишком обременительным, поскольку трансгенные линии уже существуют, и, как отмечает рецензент, «обработка проростков маннитом может вызвать эндогенный синтез АБК и может быть использована в качестве быстрого / простого эксперимента, чтобы доказать, что датчики полезны для измерения изменений эндогенных ABA содержание.”

    На основании недавних исследований, концентрация АБК в корнях и побегах увеличивается через несколько часов после стрессовых воздействий (Ikegami et al., 2009; Geng et al., 2013). В более ранних исследованиях с использованием вручную препарированных замыкающих клеток измерялось увеличение концентрации АБК в замыкающих клетках через 15 минут после пассивного обезвоживания листьев (Harris and Outlaw, 1991). ABAleon2.1 обнаружил увеличение эндогенной концентрации ABA в замыкающих клетках через 15 минут после падения влажности (рис. 9A, B) и через 4 часа после обработки 100 мМ NaCl (рис. 9C, D).Интересно, что 4 часа обработки 300 мМ сорбита не вызвали увеличения АБК в замыкающих клетках (рис. 9C, D). Когда пятидневные проростки обрабатывали в течение 6 часов, концентрация АБК в корнях индуцировалась как NaCl, так и сорбитом (рис. 9E-H). Эти эксперименты теперь описаны и обсуждаются в рукописи (Аннотация; Результаты; третий абзац раздела «Обсуждение», озаглавленного «Анализ изменений концентрации АБК и переноса АБК на большие расстояния у Arabidopsis»).

    2) Определите, проявляют ли трансгенные линии, экспрессирующие сенсоры, измененную чувствительность к экзогенной АБК.Поскольку сенсоры связываются с ABA и, возможно, с другими эндогенными белками, необходимыми для передачи сигнала ABA, возникает вопрос о том, проявляют ли растения, экспрессирующие сенсоры, измененную чувствительность к ABA. Опять же, этот эксперимент не слишком обременительный; например, можно использовать простые анализы ингибирования роста. Как отмечает рецензент, «я не думаю, что линии должны иметь 100% чувствительность ABA дикого типа, чтобы быть полезными. Было бы идеально, если бы это было так, но ключевым моментом является знание присущих им свойств и ограничений, а также предостережений, которые возникают вместе с при их использовании.”

    Мы благодарим рецензентов за предложение этих экспериментов. Фенотипические анализы были выполнены с двумя линиями ABAleon2.1 (линия 3 и линия 10), которые экспрессируют ABAleon2.1 на разных уровнях (рис. 5A). Эти линии сравнивали с линиями сверхэкспрессии Col-0 дикого типа, YFP-PYR1 и abi1-3 / YFP-ABI1 (Nishimura et al., 2010) в анализах чувствительности ABA (рис. 5). В тестах на закрытие устьиц, индуцированных АБК, обе линии ABAleon2.1 проявляли ответы на АБК, которые были сопоставимы с растениями дикого типа Col-0 (фиг. 5J).Однако обе линии ABAleon2.1 показали пониженную чувствительность к ABA в анализах прорастания семян, разрастания семядолей и роста проростков (рис. 5B-I). Интересно, что степень чувствительности ABA в обеих линиях коррелировала с уровнями экспрессии ABAleon2.1, которые были определены с помощью количественной флуоресцентной микроскопии (рис. 5A). По сравнению с abi1-3 / YFP-ABI1, чувствительность ABA растений ABAleon2.1 была аналогичной в анализах роста проростков (рис. 5D, E, I), но меньше влияла на анализы прорастания семян и увеличения семядолей (рис. 5B, C, FH).Более высокая интенсивность флуоресценции обеих линий ABAleon2.1 по сравнению с abi1-3 / YFP-ABI1 указывает на то, что ABAleon2.1 экспрессируется намного сильнее, чем YFP-ABI1. На основании того, что ABAleon2.1 не проявляет активности фосфатазы in vitro (Рисунок 1H) и что степень чувствительности ABA коррелирует с уровнями экспрессии ABAleon2.1, может возникнуть снижение чувствительности ABAleon2.1 растений (Рисунок 5). от ABAleon2.1 опосредованное удаление физиологически значимых концентраций ABA в определенных тканях.Мы считаем, что у любого метода есть свои ограничения, и что их полезно проанализировать, как сейчас, в этом исследовании. Актуальность, ограничение и возможный механизм снижения чувствительности ABAleon2.1 к АБК теперь описаны и обсуждаются в рукописи (Аннотация; раздел результатов, озаглавленный «Растения Arabidopsis, экспрессирующие ABAleon2.1, являются гипочувствительными к АБК; последний абзац раздела обсуждения, озаглавленный« Дизайн ABAleon » репортеры »).

    Хотя мы не обменивались рукописями с лабораторией Фроммера, краткие сообщения сообщают нам, что их репортеры сконструированы по-другому, имеют другой динамический диапазон и дополнительный диапазон определения концентрации ABA.Основываясь на этих различиях, два класса репортеров ABA, разработанные и проанализированные в наших лабораториях, могут быть использованы для различных аспектов биологии ABA и могут дополнять друг друга.

    Прочие вопросы:

    3) Авторы показывают очень четкую кривую титрования чувствительности к pH, показывающую независимость сенсора от pH при pH выше 7,0. Некоторое обсуждение ожидаемых изменений pH в ответ на ABA было бы полезно для рассмотрения этой зависимости pH в контексте полезности датчика .

    ABA, как известно, вызывает защелачивание цитоплазмы замыкающих клеток. Теперь мы обсудим предыдущую литературу, показывающую это, и обсудим стабильность ABAleon в этом диапазоне pH, как это предлагается (пятый абзац раздела «Обсуждение», озаглавленный «Анализ изменений концентрации ABA и переноса ABA на большие расстояния у Arabidopsis»).

    4) В Рис. 3A похоже, что сигнал как акцептора FRET, так и сигнала донора увеличивается после добавления ABA в защитную ячейку. Можно ожидать, что сигнал донора будет расти, а сигнал акцептора падать по мере увеличения уровня АБК.Означает ли это, что за период эксперимента произошел значительный синтез датчика?

    Исследование данных визуализации показало, что увеличение эмиссии акцепторов при анализе замыкающих ячеек на рис. 3A-C было вызвано небольшим смещением образца. Хотя известно, что ABA индуцирует экспрессию определенных PP2C и подавляет экспрессию определенных PYR / PYL / RCAR (Leonhardt et al., 2004; Santiago et al., 2009; Szostkiewicz et al., 2010), зависимая от ABA экспрессия ABAleon2 .1 маловероятно. ABAleon2.1 экспрессировался под контролем промотора pUBQ10, который не зависит от ABA (http://bar.utoronto.ca/efp/cgi-bin/efpWeb.cgi; Winter et al., 2007). Не ожидается, что значительные изменения в уровнях белка ABAleon2.1 произойдут в течение периода времени экспериментов, показанных на рисунке 3. В случае синтеза белка de novo , вновь синтезированные белки ABAleon2.1 не повлияют на логометрические измерения в временные рамки экспериментов на рисунке 3, поскольку время созревания mTurquoise составляет> 1 час (Goedhart et al., 2010). Мы добавили текст к подписи к рисунку, отметив, что небольшой дрейф образца способствовал сигналам флуоресценции на рисунке 3A.

    5) Существует довольно много работ, в которых пытались оценить уровни АБК в отдельных типах клеток, например, в рукописи из лаборатории Вейлера были сделаны оценки замыкающих клеток после стресса ( Harris et al. 1988 ). Я думаю, что более раннюю литературу по этой теме следует процитировать и обсудить во Введении и Обсуждении .

    Спасибо за этот комментарий. Этот раздел был включен во Введение: «В ответ на ограничение воды концентрация АБК увеличивается (Harris et al., 1988; Harris and Outlaw, 1991; Christmann et al., 2007; Forcat et al., 2008; Ikegami et al. , 2009; Geng et al., 2013) и уменьшаются при снятии стресса (Harris and Outlaw, 1991; Endo et al., 2008) ».

    Этот раздел был включен в Обсуждение: «В замыкающих клетках Vicia faba концентрации ABA были ∼ 0.7 фг / пара клеток в нестрессированных и ~ 17,7 фг / клеточная пара в стрессовых замыкающих клетках (Harris et al., 1988). По оценкам, концентрации АБК в замыкающих клетках, подвергнутых стрессу, находятся в диапазоне ~ 15 мкМ (Harris et al., 1988; Harris and Outlaw 1991). Экстраполяция этих значений, концентрация АБК в ненапряженных замыкающих клетках будет составлять ~ 500 нМ. Такие приближения будут согласовываться с частичным насыщением и сниженным ответом ABAleon2.1 в замыкающих клетках (Рисунок 3A-C) и с сильной экспрессией ABA-индуцированного репортера pRAB18-GFP (Рисунок 2 – рисунок в приложении 1).”

    В дополнение к запрошенным пунктам мы включили новый рисунок (Рисунок 8), на котором АБК-индуцированные ответы низкоаффинных АБАлеонов (ABAleon2.13, ABAleon2.14 и ABAleon2.15) были исследованы в зоне созревания корней. трансгенных растений Arabidopsis. Эти анализы демонстрируют полезность ABAleon2.15 (K ‘ d ∼ 600 нМ), который может дополнять ABAleon2.1 с высоким сродством (K’ d ∼ 100 нМ) (раздел результатов, озаглавленный «Отчеты о низком сродстве ABAleon2.15» Поглощение АБК корнями »).

    https://doi.org/10.7554/eLife.01739.023

    Ускоренная микроскопия FRET-PAINT | Молекулярный мозг

    Ускоренная диссоциация донорных цепей

    Экспериментальная схема FRET-PAINT и приборная установка кратко представлены на рис. 1а. В предыдущей работе мы использовали EMCCD (iXon Ultra DU-897 U-CS0- # BV, Andor) с максимальной частотой кадров 56 Гц и областью изображения 512 × 512. Однако из-за медленной диссоциации ДНК-зондов фактическая частота кадров составляла 10 Гц.В этой работе мы заменили EMCCD камерой sCMOS (ORCA-Flash 4.0 V2, Hamamatsu) с максимальной частотой кадров 400 Гц для того же размера области изображения. Однако из-за фотоиндуцированного повреждения ДНК-зондов, которое будет объяснено более подробно позже, максимальная используемая частота кадров составляла 200 Гц. Чтобы компенсировать короткое время экспозиции, интенсивность освещения следует увеличивать пропорционально частоте кадров. По той же причине фотоиндуцированного повреждения ДНК мы использовали мощность освещения 1,5 кВт / см 2 , всего 3.Увеличение в 3 раза с 460 Вт / см 2 , которые использовались в предыдущей работе.

    Рис. 1

    | Ускоренная диссоциация донорских цепей. ( a ) Схема микроскопии FRET-PAINT. Акцептор флуоресцирует только через FRET, а его сигнал улавливается высокоскоростной камерой sCMOS. Донорный сигнал отклоняется полосовым фильтром. ( b ) Нити ДНК, использованные в экспериментах: стыковочные (черные), донорные (синие) и акцепторные (красные) цепи. Длину донорной цепи контролировали путем усечения 5′-конца донорной цепи.Акцепторные и донорные флуорофоры помечены в обозначенных позициях. ( c-f ) Время диссоциации донорных цепей длиной 9 нуклеотидов ( c ), 8 нуклеотидов ( d ), 7 нуклеотидов ( e ) и 6 нуклеотидов ( f ). На левых панелях показаны характерные временные кривые FRET, в которых высокое и низкое состояния FRET соответствуют связанному и несвязанному состояниям, соответственно. Правые панели показывают гистограммы времен диссоциации. Время диссоциации было получено путем аппроксимации гистограмм экспоненциальной функцией затухания: 670 мс (9 нт), 63 мс (8 нт), 4.8 мс (7 нт) и 3,7 мс (6 нт)

    Чтобы полностью использовать увеличенную частоту кадров sCMOS-камеры, необходимо также увеличить скорость переключения ДНК-зондов; если диссоциация ДНК-зонда происходит медленно, то при более низких концентрациях зонда пятна одной молекулы начинают перекрываться, что ограничивает общую скорость визуализации. Были определены времена диссоциации донорных цепей разной длины. Были протестированы четыре различных донорских нити (рис. 1б, синий). На рис. 1c-f показаны характерные временные кривые (слева) и гистограммы времени диссоциации донорных цепей (справа).Полученное время диссоциации составляло 670 мс (9 нт), 63 мс (8 нт), 4,8 мс (7 нт) и 3,7 мс (6 нт). Время диссоциации донорных нитей 7 нт и 6 нт было измерено короче, чем время экспозиции камеры (5 мс), и его следует считать неточным. Мы выбрали донорные нити длиной 7 нт для частоты кадров 100 или 200 Гц, используемых в данной работе. Auer et al. ранее использовали донорные нити длиной 7 нт [11], но время диссоциации нити было намного больше (88 мс), чем у нас (4,8 мс).

    Улучшенное отношение сигнал / шум (SNR)

    Фоновый шум, исходящий от плавающих донорных и акцепторных нитей, ограничивает максимальную концентрацию зонда, которую можно использовать.Чтобы снизить фоновый шум и, как результат, увеличить максимальную концентрацию зонда для получения разумного отношения сигнал / шум (SNR), мы сначала попробовали разные пары донор-акцептор, кроме Alexa Fluor 488 (AF488, Invitrogen) -Cy5. (GE Healthcare), использованная в предыдущей работе. Что касается фонового шума, чем больше спектральное разделение излучения донора и акцептора, тем лучше отношение сигнал / шум. Сравнивались спектры поглощения и возбуждения красителей Alexa [12], атто [13, 14], красителей CF [15] и Cy [12], и CF488A (Biotium) и CF660R (Biotium) были выбраны в качестве кандидатов на замену AF488 и Cy5 соответственно.На рис. 2а сравниваются спектры возбуждения (пунктирные линии) и излучения (сплошные линии) AF488 (черный), CF488A (красный), Cy5 (пурпурный) и CF660R (фиолетовый). Спектры поглощения и излучения CF488A смещены в синий цвет по сравнению со спектрами AF488, тогда как их коэффициенты экстинкции аналогичны на пиках. С другой стороны, спектр излучения CF660R смещен в красную область по сравнению со спектром излучения Cy5. В качестве дополнительных усилий по улучшению отношения сигнал / шум мы также заменили длиннопроходный фильтр 640 нм (зеленая пунктирная линия) на полосовой фильтр 700/75 (зеленая сплошная линия).Поскольку полосовой фильтр имеет длину волны отсечки с красным смещением, чем длиннопроходный фильтр, некоторая часть сигнала акцептора теряется при замене, но мы ожидали, что уменьшение просачивания донора приведет к увеличению отношения сигнал / шум при высоком уровне донорной цепи. концентрации. Как и ожидалось из того факта, что CF488A имеет больший коэффициент экстинкции, чем AF488 при 473 нм, пара CF488A-Cy5 дала больше фотонов, чем пара AF488-Cy5 при той же мощности возбуждения (рис. 2b). Фоновый шум и, следовательно, отношение сигнал / шум были значительно улучшены за счет использования полосового фильтра вместо длиннопроходного.Фоновый шум и отношение сигнал / шум также были улучшены с парой CF488A-Cy5, чем с парой AF488-Cy5 (рис. 2c, d). Примечательно, что упомянутый выше процесс оптимизации почти полностью устранил донорское просачивание, и в результате зависимость отношения сигнал / шум от концентрации донора была очень слабой (рис. 2d). Вопреки нашим ожиданиям, мы обнаружили, что замена Cy5 на CF660R не улучшила SNR, потому что CF660R имеет более высокое прямое возбуждение, чем Cy5, на длине волны 473 нм (дополнительный файл 1: рисунок S1).Поскольку CF660R имеет более низкое прямое возбуждение, чем Cy5 на 488 нм, мы ожидаем, что CF660R может обеспечить лучшую производительность, если мы будем использовать лазер возбуждения 488 нм вместо лазера 473 нм в будущей работе. В данной работе мы использовали исключительно пару CF488A-Cy5 при возбуждении 473 нм.

    Рис. 2

    | Улучшенное отношение сигнал / шум (SNR). ( a ) Спектры возбуждения (штриховые линии) и излучения (сплошные линии) донорного (AF488, черный; CF488A, красный) и акцепторного (Cy5, пурпурный; CF660R, фиолетовый) флуорофоров.Вертикальная синяя пунктирная линия указывает длину волны возбуждения 473 нм, вертикальная зеленая пунктирная линия указывает длину волны отсечки длиннопроходного фильтра 640 нм, а зеленая сплошная линия указывает кривую пропускания полосового фильтра 700/75 м. ( b ) Сигнал акцептора пар AF488-Cy5 (черный) и CF488A-Cy5 (красный) при мощности возбуждения 1,5 кВт / см 2 , зарегистрированный камерой sCMOS и полосовым фильтром. Сигнал приемника пары AF488-Cy5 (синий) при мощности возбуждения 460 Вт / см 2 , зарегистрированный камерой EMCCD и длиннопроходным фильтром.Сигнал определяется как амплитуда двумерной гауссовой функции каждого пятна одной молекулы. Белые квадраты обозначают измеренные значения, а сплошные линии обозначают подогнанные кривые с функцией Гаусса. Пара CF488A-Cy5 дает более высокую интенсивность. ( c ) Фоновый шум пар AF488-Cy5 (черный) и CF488A-Cy5 (красный) при мощности возбуждения 1,5 кВт / см 2 с камерой sCMOS и полосовым фильтром. Фоновый шум пары AF488-Cy5 (синий) при мощности возбуждения 460 Вт / см 2 с камерой EMCCD и длиннопроходным фильтром.Фоновый шум определяется как FWHM гауссовой функции фонового сигнала. Белые квадраты обозначают измеренные значения, а сплошные линии обозначают подогнанные кривые с квадратным корнем из концентрации донорной цепи. Полосовой фильтр значительно снижает фоновый шум, а пара CF488A-Cy5 дает более низкий фоновый шум, чем пара AF488-Cy5. Горизонтальная зеленая пунктирная линия указывает фоновый шум без донорных и акцепторных цепей, который в основном вызван автофлуоресценцией, исходящей из покровного стекла.( d ) SNR пар AF488-Cy5 (черный) и CF488A-Cy5 (красный) при 1,5 кВт / см 2 Мощность возбуждения , записанная камерой sCMOS и полосовым фильтром, а также AF488-Cy5 пара (синяя) при мощности возбуждения 460 Вт / см 2 , записанная камерой EMCCD и длиннопроходным фильтром. SNR определяется как отношение сигнала к фоновому шуму. Белые квадраты обозначают рассчитанные значения, а сплошные линии обозначают подогнанные кривые с функцией, обратной квадратному корню от концентрации донорной цепи.Пара CF488A-Cy5 с камерой sCMOS и полосовым фильтром дает наивысшее SNR при высокой концентрации донорных цепей

    Характеристика скорости визуализации нового микроскопа

    Чтобы охарактеризовать улучшенную скорость визуализации нового микроскопа, мы сравнили скорость визуализации нового микроскопа FRET-PAINT по сравнению с предыдущим. В качестве модельной системы были отображены микротрубочки клеток COS-7. Для нового микроскопа использовались донорные нити длиной 7 нт и мощность возбуждения 1,5 кВт / см 2 , тогда как для старого микроскопа использовались нити донора 9 нт и мощность возбуждения 460 Вт / см 2 .На рис. 3а показано изображение сверхвысокого разрешения, полученное на старом микроскопе с частотой кадров 10 Гц и временем сбора данных 1 мин. Для визуализации использовали 30 нМ меченных AF488 донорных цепей и 20 нМ меченных Cy5 акцепторных цепей. На рис. 3b и c показаны изображения сверхвысокого разрешения, полученные с помощью нового микроскопа с частотой кадров 100 Гц для рис. 3b или 200 Гц для рис. 3c. Для визуализации общее время сбора данных составляло 1 мин, и использовали 300 нМ меченных CF488A донорных цепей и 300 нМ меченных Cy5 акцепторных цепей.Как видно из рисунков, новый микроскоп давал изображения более высокого качества, чем предыдущая установка FRET-PAINT, за более короткое время. Ширина поперечного сечения микротрубочек была подобна ранее сообщенному значению (дополнительный файл 1: рисунок S2) [11]. Чтобы показать улучшенное качество изображения более подробно, покадровые изображения областей, выделенных рамкой на фиг. 3a-c, также показаны на фиг. 3d-f соответственно. Чтобы количественно сравнить качество изображения на рис. 3a-c, мы сравнили разрешения изображения в зависимости от времени получения изображения (рис.3г). Разрешение было получено методом корреляции колец Фурье [16, 17]. Примечательно, что разрешение достигло предела (42 нм для 100 Гц, 46 нм для 200 Гц) через 20–30 с с новой установкой FRET-PAINT, тогда как разрешение все еще снижается даже через 60 с с предыдущей установкой FRET-PAINT. настраивать. В принципе, разрешение, определяемое методом кольцевой корреляции Фурье, зависит как от точности локализации, так и от плотности локализации [16,17,18,19]. Плотность локализации линейно пропорциональна времени визуализации (рис.3h), тогда как точность локализации не зависит от времени. Таким образом, мы можем сделать вывод, что для времени получения изображений в течение десятков секунд разрешение изображения определяется точностью локализации в новом микроскопе. С другой стороны, для того же времени получения изображения разрешение изображения определяется плотностью локализации в старом микроскопе. Плотность локализации как функция времени визуализации на рис. 3h дает еще один способ сравнить скорость визуализации микроскопов. Скорость локализации увеличена на 5.4 раза для изображения 100 Гц и 8 раз для изображения 200 Гц.

    Рис. 3

    | Характеристика скорости изображения нового микроскопа. В качестве модельной системы использовались изображения микротрубочек со сверхвысоким разрешением фиксированных клеток COS-7. ( a ) Изображение было восстановлено из 600 кадров, записанных с частотой кадров 10 Гц с помощью предыдущего микроскопа (камера EMCCD, фильтр длинного прохода, 460 Вт / см 2 мощность возбуждения, 30 нМ 9 нт AF488 донорные цепи, 20 нМ 10 нМ акцепторных цепей Cy5).( b , c ) Изображения были восстановлены из 6000 кадров, записанных с частотой кадров 100 Гц ( b ) или 12 000 кадров, записанных с частотой кадров 200 Гц ( c ) с новым микроскопом ( камера sCMOS, полосовой фильтр, мощность возбуждения 460 Вт / см ( 2 , 300 нМ 7 нМ донорных цепей CF488A, 300 нМ 9 нМ акцепторных цепей Cy5). Буфер для визуализации (10 мМ Трис-HCl, pH 8,0, 500 мМ NaCl, 1 мг / мл глюкозооксидазы, 5 мг / мл глюкозы, 0,04 мг / мл каталазы и 1 мМ Trolox) использовали для всей визуализации.Все изображения были восстановлены с помощью ThunderSTORM [23] с методом максимального правдоподобия. Общее время визуализации для всех изображений составляет 60 с. ( d f ) Цейтраферные изображения областей в рамке в a c в указанное время формирования изображения. ( g ) Разрешение изображения a c с использованием метода кольцевой корреляции Фурье в зависимости от времени визуализации. Белые квадраты обозначают измеренное значение, а сплошные линии обозначают подогнанные кривые с функцией экспоненциального затухания.( ч ) Плотность локализации как функция времени визуализации (100 Гц, черный; 200 Гц, красный; 10 Гц, синий). Плотность локализации определяется как количество событий локализации на 1 мкм 2 . Чтобы свести к минимуму влияние интересующей области, выбранной для анализа данных, плотность локализации была рассчитана из 10 различных областей 5 разных ячеек. Прямоугольники в квадрате указывают на среднее значение, а полосы ошибок указывают на стандартное отклонение. Скорость увеличения плотности локализации составила 21 (10 Гц), 114 (100 Гц) и 168 (200 Гц) локализации / мкм 2 / с.Мы получили увеличение в 5,4 раза для изображения 100 Гц и в 8 раз увеличение для изображения 200 Гц по сравнению со старым микроскопом.

    Автор: alexxlab

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.