Избыточная масса тела код по мкб: Ошибка 404. Файл не найден

Содержание

25. Рекомендации при избыточной массе тела (код МКБ-10 R63.5) и ожирении (код МКБ-10 E66)

25. РЕКОМЕНДАЦИИ

ПРИ ИЗБЫТОЧНОЙ МАССЕ ТЕЛА (КОД МКБ-10 R63.5) И ОЖИРЕНИИ (КОД МКБ-10 E66)

Различают 2 типа ожирения:

— центральное, абдоминальное (тип «яблоко») характеризуется особым отложением висцеральной жировой ткани в пределах верхней части туловища и живота. Чаще приводит к сердечно-сосудистым осложнениям и метаболическим нарушениям, таким как дислипидемии, гипергликемии, инсулинорезистентность;

— нижнее (тип «груша»). Ожирение типа «груша» связано с отложением жира в пределах нижних частей тела (бедро, голень). К типичным осложнениям для этого типа ожирения чаще относятся дегенеративные изменения в области опорно-двигательного аппарата и венозная недостаточность.

Риск сердечно-сосудистых заболеваний и метаболических нарушений определяется как высокий при окружности талии у женщин 88 см и выше, у мужчин 102 см и выше и повышенный при окружности талии у женщин 80 — 88 см и у мужчин.

94 — 102 см.

Цель — снижение индекса Кетле до 25 кг/м2, окружность талии для мужчин менее 94 см, для женщин — менее 80 см.

Промежуточная цель при ожирении, особенно при значительной степени ожирения — индекс Кетле ниже 30 кг/м2 (или на 10% от исходного на начальном этапе), окружность талии для мужчин менее 102 см, для женщин — менее 88 см.

Доказано, что даже небольшое снижение массы тела оказывает достоверное положительное влияние на состояние здоровья и способствует уменьшению числа осложнений.

Снижение веса на 10% сопровождается уменьшением общей смертности на 20%, смертности, обусловленной диабетом, на 30%, смертности от онкологических заболеваний, часто встречающихся при ожирении, на 40%, снижением уровня глюкозы в крови натощак при сахарном диабете II типа на 50%.

Отличным результатом считается снижение массы тела на 10% и более за 6 месяцев, хорошим 5% — 10%, стабилизация массы тела или снижение до 5% — удовлетворительным. При этом темп снижения веса должен быть весьма умеренным — не более 1 кг в неделю <20>.

———————————

<22> Проблемы ожирения в Европейском регионе ВОЗ и стратегия ее решения ВОЗ 2009.

Второй и не менее важной задачей является стойкое удержание нового сниженного веса — задача, для выполнения которой врачу приходится прилагать не меньше терапевтических усилий. И в этом вопросе важное значение имеют методы психотерапевтического воздействия и регулярность двигательной активности. <21>

———————————

<23> Глобальная стратегия по питанию, физической активности и здоровью ВОЗ; 2010.

Диетологическое консультирование занимает главное место в лечении ожирения. Только постепенное, длительное изменение характера питания, формирование более здоровых привычек, а не временное ограничение употребления определенных продуктов (особенно не рекомендуется голодание) может привести к успешному снижению веса.

Открыть полный текст документа

24.

РЕКОМЕНДАЦИИПРИ ИЗБЫТОЧНОЙ МАССЕ ТЕЛА (КОД МКБ-10 R63.5) И ОЖИРЕНИИ(КОД МКБ-10 E66)

(Раздел адаптирован и дополнен по методическим

рекомендациям «Диспансеризация определенных групп

взрослого населения» 3-го изд.: http://www.gnicpm.ru;

http://ropniz.ru/)

Различают 2 типа ожирения:

— нижнее (тип «груша»). Ожирение типа «груша» связано с отложением жира в пределах нижних частей тела (бедро, голень). Развитие мышц слабое. К типичным осложнениям для этого типа ожирения чаще относятся дегенеративные изменения в области опорно-двигательного аппарата и венозная недостаточность.

Цель — снижение индекса Кетле до 25 кг/м2, окружность талии для мужчин менее 94 см, для женщин — менее 80 см.

———————————

<22> Проблемы ожирения в Европейском регионе ВОЗ и стратегия ее решения ВОЗ 2009.

———————————

<23> Глобальная стратегия по питанию, физической активностью и здоровью ВОЗ; 2010.

Шесть принципов питания при избыточной массе тела:

1) Контроль энергетического равновесия рациона питания: уменьшение энергопоступления и/или увеличение энерготрат. При избыточной массе тела и ожирении 1 степени достаточно снижение калорийности на 300 — 500 ккал, при 2 и 3 степени, когда индекс массы тела превышает 35 и даже 40 кг/м2 — на 500 и даже 1000 ккал. Не надо начинать лечение с очень строгих диет и разгрузок. Лучше начать с 1500 — 1800 ккал, затем снизить калорийность до 1500 — для мужчин, 1200 до 1000 ккал — для женщин. Набор продуктов на 1800 ккал и пример диеты на 1500 ккал и менее приведены ниже.

2) Сбалансированность (полноценность) по нутриентному составу (белки, жиры, углеводы, витамины, макро- и микроэлементы): белок — 15 — 25% от общей калорийности (75 — 95 г), жир — до 20 — 30% от общей калорийности (60 — 80 г), углеводы — 45 — 60% от общей калорийности с ограничением и даже полным исключением добавленных простых сахаров (0 — 5%).

Белки. Из продуктов, богатых белками, предпочтительны нежирные сорта мяса, рыбы и сыра; белое мясо птицы; нежирные молочные продукты; бобовые, грибы. Полноценное белковое питание могут обеспечить 2-е порции (по 100 — 120 г в готовом виде) мяса, рыбы или птицы и 1 порции молочного блюда (100 г творога или 150 — 200 мл молочного напитка пониженной жирности без сахара) в день. Суточную потребность в растительных белках может обеспечит 100 г зернового хлеба и 100 — 200 г крахмалистого блюда (бобовые, картофель, каша или макаронные изделия).

Жиры. Уменьшение доли жиров животного происхождения — исключение из рациона жирных сортов свинины, баранины, птицы (гуси, утки) мясопродуктов (колбасы, паштеты), жирных молочных продуктов (сливки, сметана и пр.). Жирность куриного мяса можно уменьшить почти в 2 раза, сняв с нее кожу перед приготовлением. Предпочтение отдавать обезжиренным и низкожирным сортам молочных продуктов (молоко, кефир, йогурт, творог, сыр). Избыток жиров растительного происхождения не желателен — он влияет на энергоценность пищи (калорийность растительного масла несколько выше, чем сливочного). Растительные жиры входят в состав майонеза, чипсов, семечек, орехов, изделий из шоколада, многих кондитерских изделий и продуктов, приготовленных во фритюре, поэтому потребление этих продуктов следует ограничить или исключить. Они содержат в большом количестве насыщенные и трансжиры.

Углеводы. Основу питания должны составлять трудноусвояемые углеводы (менее обработанные и не рафинированные крупы, овощи, бобовые, фрукты, ягоды, хлеб грубого помола и др.). Не рекомендуются (или исключаются) продукты, содержащие легкоусвояемые углеводы: сахар, варенье, кондитерские изделия, сладкие напитки и др. Следует ограничить (или исключить) газированные и сладкие напитки. Из источников углеводов предпочтение следует отдавать растительным продуктам — цельнозерновым, овощам, фруктам и ягодам, которые содержат в достаточном количестве пищевые волокна.

3) Исключение потребления алкоголя, особенно при наличии артериальной гипертонии, других сердечно-сосудистых и цереброваскулярных болезней.

4) Соблюдение водно-солевого режима. Рекомендуется ограничение поваренной соли до 5 г/сутки (1 чайная ложка без верха), исключив приправы, экстрактивные вещества.

5) Технология приготовления пищи. Рекомендуется предпочтение отдавать отвариванию, припусканию, тушению в собственном соку, обжариванию в специальной посуде без добавления жиров, сахара, соли, приготовлению на пару, в духовке, в фольге или пергаменте, на гриле, без дополнительного использования жиров. Не следует злоупотреблять растительными маслами, майонезом при приготовлении салатов.

6) Режим питания. Рекомендуется 3 основных приема пищи (завтрак, обед и ужин) и 1 — 2 перекуса в день. Ужин рекомендуется не позднее, чем за 3 — 4 часа до сна. Оптимальный интервал между ужином и завтраком — 10 часов.

Пациентам с ожирением (индекс 30 кг/м2 и выше) возможно рекомендовать при индивидуальном консультировании консультацию врача-эндокринолога, так как ожирение — это болезнь, и как любую болезнь ее следует лечить.

При сопутствующей артериальной гипертонии и сердечной недостаточности в рационе должно быть увеличено количество продуктов, содержащих соли калия (печеный картофель, кабачки, тыква, курага, чернослив) и магния (каши, орехи). Необходимо еще большее ограничение поваренной соли. При сердечной недостаточности желательно шире использовать разгрузочные (особенно молочные, калиевые) дни.

При сопутствующей гиперхолестеринемии необходимо большее внимание уделять оптимальному соотношению (1:1) животных и растительных жиров и ограничению субпродуктов и яиц, как основных поставщиков экзогенного холестерина

Рацион, рекомендуемый лицам с избыточной массой тела благодаря ограничению простых углеводов, способствует нормализации углеводного обмена и снижению уровня триглицеридов. Этот факт особенно нужно учитывать у тучных лиц с сопутствующими НТУ, сахарным диабетом и гипертриглицеридемией. Можно в ряде случаев рекомендовать заменители сахара — ксилит, сорбит, сахарин.

При сопутствующих дискинезиях желчного пузыря и толстого кишечника увеличение квоты балластных веществ (фруктов, овощей, хлеба грубого помола) рекомендуется с целью нормализации желчеотделения и устранения запоров.

При сочетании избыточной массы тела с мочекислым диатезом, подагрой, остеохондрозом целесообразно ограничение экзогенно вводимых пуринов за счет исключения потребления мясных и рыбных бульонов и некоторого ограничения потребления мяса (до 2 — 3 — раз в неделю). Рекомендуется потребление цитрусовых фруктов, которые благодаря содержанию цитратов ощелачивают мочу и препятствуют выпадению в ней солей уратов и оксалатов в осадок. При оксалурии лучше — исключить щавель, шпинат, ревень, а также шоколад и кофе.

Наличие воспалительных изменений в желудочно-кишечном тракте тучного человека (гастриты, энтериты, колиты) требует изменения в технологии приготовления пищи. Продукты потребляются те же, в том же количестве, но только в отварном, запеченном, протертом виде.

Таким образом, в зависимости от характера сопутствующей патологии, рацион тучного человека должен видоизменяться. Но остается главным основной принцип диетотерапии — снижение калорийности суточного рациона.

В рекомендациях по снижению избыточного веса обязательным компонентом должна быть достаточная физическая активность. Однако, при чрезмерном избытке массы тела рекомендуется поэтапное включение в программу повышения двигательной активности, после некоторого снижения массы тела диетическими мерами. При углубленном консультировании при диспансеризации пациент должен быть информирован об этой особенности. Оптимальным видом физической нагрузки, применяемой для лечения избыточной массы тела и ожирения, является динамическая аэробная нагрузка. Простым, доступным и эффективным видом этой нагрузки является ходьба 30 — 40 мин в день, 5 — 7 раз в неделю и главное — регулярно.

У пациентов с индексом массы тела до 40 кг/м2 при отсутствии противопоказаний рекомендуют начинать физические тренировки с ходьбы в среднем темпе — 100 шагов в минуту. Продолжительность таких тренировок составляет 30 мин, а их периодичность — 3 — 4 раза в неделю. Постепенно интенсивность нагрузки увеличивают: темп ходьбы доводят до высокого (120 — 140 шагов в минуту), продолжительность — до 45 — 60 мин, периодичность — до 5 — 7 раз в неделю. Такой объем физической активности позволяет увеличить энерготраты на 200 — 300 ккал в сутки.

У пациентов с индексом 40 кг/м2 и более рекомендации по физической активности даются с учетом общесоматического состояния и после осмотра лечащего врача (или эндокринолога) и полного обследования для исключения противопоказаний. При отсутствии противопоказаний физические упражнения начинают с ходьбы в медленном темпе (65 шагов в минуту) в течение 10 мин 3 раза в неделю. Постепенно интенсивность нагрузки увеличивают до среднего уровня — 100 шагов в минуту в течение 30 — 45 мин 4 — 7 раз в неделю.

Любые рекомендации по повышению интенсивности физической активности как в повседневном режиме, и, особенно, в режиме, тренировок и оздоровительных занятий требуют обязательного обследования, особенно в возрасте старше 35 — 40 лет даже при отсутствии клинических признаков заболевания.

✔ избыточный вес мкб 10

Ключевые теги: назовите основные причины избыточного веса, заказать избыточный вес мкб 10, как сбросить вес в 12 лет.

как рассчитать лишний вес калькулятор, армия лишний вес, доктор гаврилов снижение веса официальный сайт, мочегонные таблетки для похудения без вреда, узнать лишний вес калькулятор

Принцип действия

Те, кто хочет добиться похудения и сохранения веса на достигнутых результатах, обращают внимание на аналоги капсул Keto Light – Лайт24, ТурбоЛайт, Лайтоок. Они обладают жиросжигающим свойством, но для применения подходят далеко не всем. Поэтому специалисты рекомендуют тщательно изучать противопоказания к использованию этих жиросжигающих средств. Ввиду того, что сегодня многие люди страдают от лишнего веса, препарат пользуется огромным спросом. Его покупают как женщины, так и мужчины. Отзывы после курса похудения многие из них оставляют на официальном ресурсе производителя.

На нашу электронную почту также приходят слова благодарности в адрес изготовителя.

Официальный сайт избыточный вес мкб 10

Состав

E66.0 Ожирение, обусловленное избыточным поступлением энергетических ресурсов. 3. Перевод на русский язык некоторых терминов в настоящей статье может отличаться от перевода в утверждённой Минздравом России МКБ-10. Все замечания и уточнения по переводу, оформлению и др. принимаются. Ожирение, обусловленное избыточным поступлением энергетических ресурсов. МКБ-10 внедрена в практику здравоохранения на всей территории РФ в 1999 году приказом Минздрава России от 27.05.97 г. №170. Ожирение (лат. adipositas, алиментарное ожирение) — хроническое расстройство питания, характеризующееся избыточным накоплением жировой ткани в организме. Читайте также: Ожирение — Обзор информации. Коды по МКБ-10. При избыточной массе тела (код МКБ-10 R63.5) и ожирении (код МКБ-10 E66). Второй и не менее важной задачей является стойкое удержание нового сниженного веса — задача, для выполнения которой врачу приходится прилагать не меньше терапевтических усилий.

И в этом вопросе важное значение имеют. Ожирение – гетерогенная группа наследственных или приобретенных болезней и патологически состояний, общим и ведущим симптомом которых является генерализованное избыточное отложение жира в подкожной жировой клетчатке и других органах и тканях с энергетическим дисбалансом между. Ожирение — состояние, при котором в организме человека накапливаются избыточные жировые отложения. У человека признается наличие этого заболевания, если его вес превышает максимально допустимый для его роста как минимум на 20 процентов. Причины возникновения. МКБ-10 версия 2015. Международная классификация болезней 10-го пересмотра. E66.0 Ожирение, обусловленное избыточным поступлением энергетических ресурсов. E66.1 Ожирение, вызванное приемом лекарственных средств. E66.2 Крайняя степень ожирения, сопровождаемая альвеолярной. МКБ-10 диагнозы. Термины. Клинические рекомендации. Ожирение ведёт к повышенному риску возникновения сахарного диабета, гипертонической болезни и других заболеваний, связанных с наличием избыточного веса.

Клинические рекомендации. Лечение ожирения у взрослых. Коды по МКБ 10: МКБ 10: E66.0 / E66.2. В 2014 году более 1,9 миллиарда взрослых (возрастом от 18 лет и старше) имели избыточный вес. Из них более 600 миллионов страдали ожирением. Распространенность ожирения среди мужчин. Ожирение — состояние, при котором в организме человека накапливаются избыточные жировые отложения. Ожирение наступает, когда энергетическая ценность поступающей в организм пищи превышает потребности организма.

Эффект от применения

Лишние килограммы не только ухудшают внешний вид, провоцируют у человека неуверенность в собственной привлекательности, но и негативно сказываются на состоянии здоровья. Средство Кето Лайт для снижения веса комплексно подходит к решению проблемы лишнего веса. Оно не только убирает лишние килограммы, но и положительно сказывается на здоровье. Отрицательные отзывы о Кето Лайт – логичное последствие приобретения и использования не оригинальной продукции, а ее подделки. На подобный развод попадаются те, кто не видит разницы между покупкой средства «с рук» и на официальном сайте. Неудивительно, что после отсутствия пользы от применения суррогатного препарата, о нем остается негативное впечатление. Чтобы гарантированно добиться похудения, и оценить все преимущества препарата, не рекомендуется заказывать его у сомнительных посредников.

Мнение специалиста

Сотрудники фирмы-изготовителя средства Keto Light прокомментировали все 4 аспекта. Низкая стоимость объясняется нацеленностью производителя на обслуживание клиентов с разным бюджетом. Благодаря адекватной цене на жиросжигающий препарат, безопасно снизить вес могут все, независимо от достатка. Это одновременно повышает и доход фирмы-изготовителя, поскольку клиентов со скромным бюджетом большинство.

В обзоре мы сравним 5 самых эффективных способов снижения веса по таким критериям, как: скорость сброса веса, временная занятость на лечение ожирения, безвредность для здоровья, легкость сохранения результатов, стоимость лечения, стабильность отдаленных результатов (удержание сниженного веса). В обратном случае быстрое снижение веса превратится в пытку. Одним из самых эффективных методов считается яичная диета, она идеальна. Резкое снижение веса подразумевает удаление лишних килограмм в рекордно короткие сроки. В видеоматериалах я задаю самые популярные вопросы по поводу похудения и тренировок титулованному тренеру с богатой историей по приведению в идеальную форму сотен обычных людей и профессиональных спортсменов Виталию Соболеву. За счет чего мы худеем. Для начала давайте разберемся, как. Основа успешного снижения веса — это не препараты для похудения, а нормализация образа жизни: сбалансированное гипокалорийное питание, занятия спортом. Препараты для похудения, например на основе Орлистата, равно как и другие средства для похудения, в том числе растительного. Эффективное жиросжигание Полное очищение организма от шлаков и токсинов Ускорение снижения веса Нормализация обмена. Это наверное самые дешевые таблетки для снижени веса, влияющие на состояние желудочно-кишечного тракта. По сути представляют собой эрзац нормального питания. Он также подсказывает вам, что лучший способ избавиться от лишнего веса – это сжигать больше калорий, чем вы потребляете. Когда речь заходит о сахаре, очень важно знать меру. Поверьте, отказ от сахара – самый быстрый способ сбросить вес. В первую вам очередь придется осознать, что 90% вашей пищи. Упражнения для избавления от лишнего веса. 5 реальных методов похудения. Эффективное похудение включает в себя много пунктов, когда цель быстро. С самого начала стоит ориентироваться на постоянные изменения: избавление от дурных стереотипов и введение новых, полезных шаблонов и привычек. Как снизить вес правильно? С этим вопросом люди часто обращаются к врачам, или же самостоятельно ищут ответ в печатной литературе или в сети Интернет. В современном мире это очень популярная проблема. Сегодня мы решили составить список наиболее популярных способов похудения и снижения веса и сравнить их по самым значимым критериям. Ознакомившись с данным материалом. Таблетки для похудения являются наиболее эффективными препаратами в снижении лишнего веса. Фармацевтические компании совместно с учеными постоянно разрабатывают новые средства и действенные методики для борьбы. Перед вами самые эффективные средства для похудения на начало 2020 года. Снижение веса — не единственная функция добавки. Турбослим успокаивает нервы, укрепляет иммунитет и способствует полноценному отдыху организма.

Назначение

Как сбросить лишний вес женщине после 60 лет: реальные советы, диета и раскрытие секрета, который поможет избавиться от. Или это только отговорка? Чтобы быстро и правильно сбросить вес женщине после 60 лет, без последствий и вреда для здоровья, надо знать, что нужно, а чего не нужно делать. Зачем худеть после 60 лет. Как показывает практика, основная цель у женщин этой возрастной категории, сбросить лишний вес не ради идеальной фигуры, а для собственного комфорта и поддержания здоровья в норме. Лишний вес может стать причиной таких заболеваний: сахарный диабет; гипертония. Советы, как похудеть после 60, — именно советы, а не диеты, — необходимы для всех, кто в возрасте начал набирать вес, потому что в таком. Каков же оптимальный вес для людей после 60? Факт: каждый третий в этом возрасте страдает ожирением! С медицинской точки зрения, проблема лишнего веса не однозначна. К сожалению, после 55-60 лет здоровье большинства из нас оставляет желать лучшего. А лишний вес в данном возрасте. Как похудеть пожилым людям. Для того чтобы похудеть в пожилом возрасте, необходимо четко соблюдать конкретные рекомендации диетологов либо консультантов по питанию. posle-60-let.ru Советы для женщин после 60 лет. Главный принцип, который должна отражать женская диета для похудения после отметки шестьдесят – сброс веса без стресса для организма. Чтобы убрать лишний вес после 60 лет нужно изменить некоторые ингредиенты в связи с изменением внутриклеточного метаболизма, и соблюдать. Похудеть после 60-летия и стабильно удерживать результат помогут следующие рекомендации: Оглавление. Приоритет – потеря жира, а не веса. Вода. Почему женщине после 60 лет становится сложнее похудеть. Как можно женщине в 60 лет похудеть без вреда для здоровья, советы диетологов и правильное меню. Основные положения здорового образа жизни. При желании сбросить вес после 60 лет важно учитывать потребности своего тела и здоровья. Как похудеть после 60 лет: советы диетологов для женщин и мужчин. Похудение женщины после 60 лет возможно, но необходимо знать некоторые нюансы. чаще использовать аэробные нагрузки, помогающие легко сбросить лишний вес; не голодать: организм будет только накапливать жир в перерывах. Изменения в организме женщины после 60 лет. Как правило, в данном возрасте, хотим. Советы диетолога помогут желающим избавиться от лишнего веса. Как похудеть людям после 60 лет без вреда для здоровья, может грамотно объяснить. Как можно догадаться, похудеть и нормализовать вес после 60 лет тяжело и женщине, и мужчине. Но это возможно. Главное, правильно организовать программу похудения, которая включает диету, физические занятия и позитивный настрой. Похудеть женщине после 60 лет проще, чем кажется. Как правильно похудеть женщине в 60 лет. Чем старше становится женщина, тем важнее для нее следить за тем, чтобы вес не превышал допустимых медиками средних значений. Сбросить лишний вес после 60 лет нелегко, но возможно. И очень важно делать это правильно. Наш эксперт – известный врач-диетолог Марианна Трифонова. Разумеется, не ради заветных 90–60–90 учатся высчитывать калории бабушки и не для того, чтобы своей. Кому за 60 лет — питаемся правильно! Частой причиной лишнего веса у этой. В возрасте после 60 лет необходимо радоваться всем проявлениям жизни, даже. Диета после 60 лет для женщин при остеопорозе стоит включить в свой рацион больше продуктов, богатых кальцией — молочные продукты, зелень.

Как заказать?

Заполните форму для консультации и заказа избыточный вес мкб 10. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

избыточный вес мкб 10. избыточный вес рак. Отзывы, инструкция по применению, состав и свойства.

Клиника лишнего веса и диабета находится на базе Центрального научно-исследовательского института в жемчужине лесопарковой зоны Москвы. Это позволяет нашим пациентам улучшать свое здоровье. Данный портал посвящен клинике Вес, которая предлагает услуги хирургического лечения ожирения, лечения тяжелых форм ожирения и др. На портале имеются такие разделы как: онлайн-запись на консультацию, врачи (информация о персонале), цены (. Лишний вес? Детальная информация на этом сайте поможет вам справиться с проблемой культуры питания и ожирения, в домашних условиях, раз и навсегда! Избыточный вес может быть источником различных заболеваний и является следствием неправильного питания и отсутствия физической нагрузки. Лишний вес — это кладбище. Кладбище эмоций, желаний, надежд, амбиций. С другой стороны, лишний вес — защита от физических, моральных и душевных. VKlimakse.ru Лишний вес. Лишний вес. С началом климактерических изменений каждая вторая представительница прекрасного пола сталкивается с резким увеличением массы своего тела, которое возникает не по причине. Калькулятор веса онлайн поможет вам рассчитать идеальную массу тела и допустимый диапазон веса, который соответствует здоровым людям. Формула идеального веса — как понять, сколько в норме Вы должны весить? Лишний вес? Как похудеть? Об этом расскажет врач диетолог Алексей Ковальков. Faberlic Style: Что вы предлагаете людям, которые приходят к вам в клинику? В этом материале отвечаем, как выяснить, есть ли лишний вес; какие проблемы от него могут быть и стоит ли. Как понять, нормально у меня все с весом или нет? Коротко Нужно рассчитать индекс массы тела или измерить.

Официальный сайт избыточный вес мкб 10

✅ Купить-избыточный вес мкб 10 можно в таких странах как:

Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина Армения

Ввиду того, что сегодня многие люди страдают от лишнего веса, препарат пользуется огромным спросом. Его покупают как женщины, так и мужчины. Отзывы после курса похудения многие из них оставляют на официальном ресурсе производителя. На нашу электронную почту также приходят слова благодарности в адрес изготовителя. Клиника лишнего веса и диабета находится на базе Центрального научно-исследовательского института в жемчужине лесопарковой зоны Москвы. Это позволяет нашим пациентам улучшать свое здоровье. Данный портал посвящен клинике Вес, которая предлагает услуги хирургического лечения ожирения, лечения тяжелых форм ожирения и др. На портале имеются такие разделы как: онлайн-запись на консультацию, врачи (информация о персонале), цены (. Лишний вес? Детальная информация на этом сайте поможет вам справиться с проблемой культуры питания и ожирения, в домашних условиях, раз и навсегда! Избыточный вес может быть источником различных заболеваний и является следствием неправильного питания и отсутствия физической нагрузки. Лишний вес — это кладбище. Кладбище эмоций, желаний, надежд, амбиций. С другой стороны, лишний вес — защита от физических, моральных и душевных. VKlimakse.ru Лишний вес. Лишний вес. С началом климактерических изменений каждая вторая представительница прекрасного пола сталкивается с резким увеличением массы своего тела, которое возникает не по причине. Калькулятор веса онлайн поможет вам рассчитать идеальную массу тела и допустимый диапазон веса, который соответствует здоровым людям. Формула идеального веса — как понять, сколько в норме Вы должны весить? Лишний вес? Как похудеть? Об этом расскажет врач диетолог Алексей Ковальков. Faberlic Style: Что вы предлагаете людям, которые приходят к вам в клинику? В этом материале отвечаем, как выяснить, есть ли лишний вес; какие проблемы от него могут быть и стоит ли. Как понять, нормально у меня все с весом или нет? Коротко Нужно рассчитать индекс массы тела или измерить. Лишние килограммы не только ухудшают внешний вид, провоцируют у человека неуверенность в собственной привлекательности, но и негативно сказываются на состоянии здоровья. Средство Кето Лайт для снижения веса комплексно подходит к решению проблемы лишнего веса. Оно не только убирает лишние килограммы, но и положительно сказывается на здоровье.

Кето Лайт – наилучшее средство для похудения, которое я испытала на себе. До его приёма я перепробовала разные способы: ходила в фитнес-клуб, принимала жиросжигающие препараты, применяла диеты и обёртывания. Но мой вес даже если и снижался, то потом снова стремительно набирался. А после приёма капсул этого не произошло. Я избавилась от отложений жирка и мой вес уже более полугода держится практически на одном уровне. Так что могу смело порекомендовать этот комплекс, он эффективный, к тому же, недорогой и с натуральным составом.

Искала в интернете недорогое, но результативное средство для похудения и остановила свой выбор на Keto Light. Почему? У него невысокая цена, в его составе натуральные компоненты и много людей написали про него хвалебные отзывы. Принимала капсулы 3 месяца и убедилась, что всё хорошее, что о них пишут, правда. Ведь за это время я похудела почти на 30 килограмм и хотя не придерживаюсь никакой диеты, вес обратно не набираю.

Диагностические критерии факторов риска

Приложение № 3

к Порядку проведения профилактического медицинского осмотра

и диспансеризации определенных групп взрослого населения

Диагностические критерии факторов риска

и других патологических состояний и заболеваний, повышающих

вероятность развития хронических неинфекционных заболеваний

Повышенный уровень артериального давления — систолическое артериальное давление равно или выше 140 мм рт.ст., диастолическое артериальное давление равно или выше 90 мм рт.ст. К числу граждан, имеющих данный фактор риска, относятся граждане, имеющие гипертоническую болезнь или симптоматические артериальные гипертензии (кодируется по МКБ-10 □ кодами 110-115), а также граждане с повышенным артериальным давлением при отсутствии диагноза гипертонической болезни или симптоматической артериальной гипертензии (кодируется по МКБ-10 кодом R03.0).

Гиперхолестеринемия — уровень общего холестерина 5 ммоль/л и более (кодируется по МКБ-10 кодом Е78).

Гипергликемия — уровень глюкозы натощак в венозной плазме 6,1 ммоль/л и более, в цельной капиллярной крови 5,6 ммоль/л и более (кодируется по МКБ-10 кодом R73.9) либо наличие сахарного диабета, в том числе в случае, если в результате эффективной терапии достигнута нормогликемия.

Курение табака — ежедневное выкуривание одной сигареты и более (кодируется по МКБ-10 кодом Z72.0).

Нерациональное питание — избыточное потребление пищи, жиров, углеводов, потребление поваренной соли более 5 граммов в сутки, недостаточное потребление фруктов, овощей, рыбы. Определяется с помощью опроса (анкетирования) граждан, предусмотренного порядком проведения профилактического медицинского осмотра и диспансеризации, утвержденным настоящим приказом (далее — анкетирование) (кодируется по МКБ-10 кодом Z72.4).

Избыточная масса тела — индекс массы тела 25-29,9 кг/м² (кодируется по МКБ-10 кодом R63.5).

Ожирение — индекс массы тела 30 кг/м² и более (кодируется по МКБ-10 кодом Е66).

Низкая физическая активность (кодируется по МКБ-10 кодом Z72.3) определяется с помощью анкетирования.

Риск пагубного потребления алкоголя (кодируется по МКБ-10 кодом Z72.1) и риск потребления наркотических средств и психотропных веществ без назначения врача (кодируется по МКБ-10 кодом Z72.2) определяются с помощью анкетирования.

Отягощенная наследственность по сердечно-сосудистым заболеваниям — наличие инфаркта миокарда (кодируется по МКБ-10 кодом Z82.4) и (или) мозгового инсульта (кодируется по МКБ-10 кодом Z82.3) у близких родственников (матери или родных сестер в возрасте до 65 лет или у отца, родных братьев в возрасте до 55 лет).

Отягощенная наследственность по злокачественным новообразованиям (кодируется по МКБ-10 кодом Z80):

колоректальной области — наличие злокачественных новообразований колоректальной области и (или) семейного аденоматоза у близких родственников в молодом или среднем возрасте или в нескольких поколениях;

других локализаций — наличие злокачественных новообразований у близких родственников в молодом или среднем возрасте, или в нескольких поколениях.

Отягощенная наследственность по хроническим болезням нижних дыхательных путей — наличие астмы и другие хронических болезней нижних дыхательных путей у близких родственников в молодом или среднем возрасте (кодируется по МКБ-10 кодом Z82.5).

Отягощенная наследственность по сахарному диабету — наличие у близких родственников сахарного диабета в молодом или среднем возрасте (кодируется по МКБ-10 кодом Z83.3).

Абсолютный сердечно-сосудистый риск устанавливается у граждан в возрасте от 40 до 64 лет при отсутствии у гражданина выявленных заболеваний, связанных с атеросклерозом, при этом высокому сердечно-сосудистому риску соответствуют значения от 5% до 10%, установленные по шкале SCORE, очень высокому — 10% и более. У граждан в возрасте старше 65 лет и/или у граждан, имеющих сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет второго типа и/или хроническое заболевание почек, уровень абсолютного сердечно-сосудистого риска является очень высоким и по шкале сердечно-сосудистого риска не рассчитывается.

Относительный сердечно-сосудистый риск устанавливается по дополнительной шкале SCORE у граждан в возрасте от 21 до 39 лет включительно, при этом высокому относительному сердечно-сосудистому риску соответствуют значения более 1.

Старческая астения (кодируется по МКБ-10 кодом R54) — ассоциированный с возрастом синдром, основными клиническими проявлениями которого являются медлительность и/или непреднамеренная потеря веса, общая слабость. Включает более 85 различных гериатрических синдромов, основными из которых являются синдромы падений, мальнутриции (недостаточности питания), саркопении (уменьшение массы мышечной ткани и мышечной силы), недержания мочи, сенсорные дефициты, когнитивные нарушения, депрессия. Определяется в рамках профилактического медицинского осмотра с помощью анкетирования у граждан 65 лет и старше, включающего вопросник «Возраст не помеха».

Класс IV. Болезни эндокринной системы, расстройства питания и нарушения обмена веществ (E00-E90)

Материал опубликован 16 апреля 2015 в 13:07.
Обновлён 16 апреля 2015 в 13:07.

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 7 ноября 2012 г. № 655н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при тиреотоксикозе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 21 января 2013 г. № 26635)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 29 декабря 2012 г. № 1752н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при пропионовой ацидемии»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 1 апреля 2013 г. № 27946)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: без осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
Е71.1 Другие виды нарушений обмена аминокислот с разветвленной цепью

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 29 декабря 2012 г. № 1677н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при тирозинемии 2 типа»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 13 февраля 2013 г. № 27050)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: без осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
Е70.2 Нарушения обмена тирозина

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 29 декабря 2012 г. № 1676н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при метилмалоновой ацидемии»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 25 марта 2013 г. № 27860)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: без осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ
Нозологические единицы
Е71.1 Другие виды нарушений обмена аминокислот с разветвленной цепью

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 28 декабря 2012 г. № 1581н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при инсулиннезависимом сахарном диабете»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 15 марта 2013 г. № 27719)

Категория возрастная: взрослые
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: без осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е11.9 Инсулиннезависимый сахарный диабет без осложнений
  Е13.9 Другие уточненные формы сахарного диабета без осложнений
  Е14.9 Сахарный диабет неуточненный без осложнений

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24 декабря 2012 г. № 1424н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при олиго- и аменорее»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 25 марта 2013 г. № 27876)

Категория возрастная: дети
Пол: женский
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая; экстренная
Средние сроки лечения (количество дней): 21
Код по МКБ Х
Нозологические единицы
N91 Отсутствие менструаций, скудные и редкие менструации
N91.0 Первичная аменорея
N91.1 Вторичная аменорея
N91.3 Первичная олигоменорея
N91.4 Вторичная олигоменорея
  Е22.1 Гиперпролактинемия
  Е23.3 Дисфункция гипоталамуса, не классифицированная в других рубриках
  Е25.0 Врожденные адреногенитальные нарушения, связанные с дефицитом ферментов
  Е28 Дисфункция яичников
  Е28.2 Синдром поликистоза яичников

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24 декабря 2012 г. № 1422н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при задержке полового развития»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 26 марта 2013 г. № 27892)

Категория возрастная: дети
Пол: женский
Фаза: легкая; средней тяжести
Стадия: ремиссии; подострое течение
Осложнения: без осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 14
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е30.0 Задержка полового созревания
  Е23.0 Гипопитуитаризм
  Е89.3 Гипопитуитаризм, возникший после медицинских процедур
  Е28.3 Первичная яичниковая недостаточность
  Q50.0 Врожденное отсутствие яичника
  Q96 Синдром Тернера
  Q99.0 Мозаик [химера] 46,XX/46,XY
  Q97.3 Женщина с 46,XY-кариотипом
  Q99.1 46,ХХ истинный гермафродит
  Q56.0 Гермафродитизм, не классифицированный в других рубриках

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 20 декабря 2012 г. № 1275н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при врожденных адреногенитальных нарушениях, связанных с дефицитом ферментов»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 11 февраля 2013 г. № 26954)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 20 декабря 2012 г. № 1272н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при олиго- и аменорее»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 5 марта 2013 г. № 27464)

Категория возрастная: взрослые
Пол: женский
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 60
Код по МКБ X
Нозологические единицы
N91 Отсутствие менструаций, скудные и редкие менструации
N91.0 Первичная аменорея
N91.1 Вторичная аменорея
N91.3 Первичная олигоменорея
N91.4 Вторичная олигоменорея
Е28.3 Первичная яичниковая недостаточность
Е28.2 Синдром поликистоза яичников
N91.2 Аменорея неуточненная
N91.5 Олигоменорея неуточненная

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 20 декабря 2012 г. № 1206н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при кистозном фиброзе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 5 марта 2013 г. № 27467)

Категория возрастная: взрослые, дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е84.0 Кистозный фиброз с легочными проявлениями
  Е84.1 Кистозный фиброз с кишечными проявлениями
  Е84.8 Кистозный фиброз с другими проявлениями

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 20 декабря 2012 г. № 1200н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при других нарушениях накопления липидов (болезни Гоше)»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 7 марта 2013 г. № 27549)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 60
Код по МКБ X
Нозологические единицы
Е75.5 Другие нарушения накопления липидов

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 701н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при врожденном гипотиреозе и дисгормональном зобе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 29 декабря 2012 г. № 26484)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: все
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е03.0 Врожденный гипотиреоз с диффузным зобом
  Е03.1 Врожденный гипотиреоз без зоба
  Е07.1 Дисгормональный зоб

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 874н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при подостром тиреоидите»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 14 марта 2013 г. № 27688)

Категория возрастная: взрослые
Пол: любой
Фаза: обострение
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 90
Код по МКБ X
Нозологические единицы
Е06.1 Подострый тиреоидит
Е06.2 Хронический тиреоидит с преходящим тиреотоксикозом

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 872н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при тиреотоксикозе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 6 марта 2013 г. № 27537)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 863н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при хронической надпочечниковой недостаточности»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 18 марта 2013 г. № 27732)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 857н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при задержке роста»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 18 февраля 2013 г. № 27166)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 856н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при инсулиннезависимом сахарном диабете»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 30 января 2013 г. № 26759)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 848н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при гипопаратиреозе«

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 19 марта 2013 г. № 27747)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 847н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при гипогонадизме«

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 27 февраля 2013 г. № 27354)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 844н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при несахарном диабете»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 31 января 2013 г. № 26771)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от наличия осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
Е23.2 Несахарный диабет
N25.1 Нефрогенный несахарный диабет

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 780н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при гипогонадизме»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 22 января 2013 г. № 26656)

Категория возрастная: взрослые
Пол: мужской
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е29 Дисфункция яичек
  Е29.1 Гипофункция яичек
  Е29.8 Другие виды дисфункции яичек
  Е29.9 Дисфункция яичек неуточненная
  Е89.5 Гипофункция яичек, возникшая после медицинских процедур

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 760н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при дисфункции яичников»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 25 января 2013 г. № 26708)

Категория возрастная: взрослые
Пол: женский
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 180
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е28 Дисфункция яичников
  Е28.1 Избыток андрогенов
  Е28.2 Синдром поликистоза яичников
  Е28.8 Другие виды дисфункции яичников
  Е28.9 Дисфункция яичников неуточненная
N91.3 Первичная олигоменорея
N91.4 Вторичная олигоменорея
N91.5 Олигоменорея неуточненная
N91.1 Вторичная аменорея

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 752н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при ожирении»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 28 января 2013 г. № 26724)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 751н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при сахарном диабете с синдромом диабетической стопы»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 7 марта 2013 г. № 27548)

Категория возрастная: взрослые
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е10.4 Инсулинзависимый сахарный диабет с неврологическими проявлениями
  Е10.5 Инсулинзависимый сахарный диабет с нарушениями периферического кровообращения
  Е11.4 Инсулиннезависимый сахарный диабет с неврологическими проявлениями
  Е11.5 Инсулиннезависимый сахарный диабет с нарушениями периферического кровообращения
  Е13.4 Другие уточненные формы сахарного диабета с неврологическими проявлениями
  Е13.5 Другие уточненные формы сахарного диабета с нарушениями периферического
   кровообращения
  Е14.4 Сахарный диабет неуточненный с неврологическими проявлениями
  Е14.5 Сахарный диабет неуточненный с нарушениями периферического кровообращения

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 750н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при инсулинзависимом сахарном диабете»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 13 марта 2013 г. № 27660)

Категория возрастная: дети
Пол: любой
Фаза: хроническая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условия оказания медицинской помощи: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е10.2 Инсулинзависимый сахарный диабет с поражениями почек
  Е10.4 Инсулинзависимый сахарный диабет с неврологическими проявлениями
  Е10.6 Инсулинзависимый сахарный диабет с другими уточненными осложнениями
  Е10.7 Инсулинзависимый сахарный диабет с множественными осложнениями
  Е10.8 Инсулинзависимый сахарный диабет с неуточненными осложнениями
  Е10.9 Инсулинзависимый сахарный диабет без осложнений
  Е13.2 Другие уточненные формы сахарного диабета с поражениями почек
  Е13.4 Другие уточненные формы сахарного диабета с неврологическими проявлениями
  Е13.6 Другие уточненные формы сахарного диабета с другими уточненными осложнениями
  Е13.7 Другие уточненные формы сахарного диабета с множественными осложнениями
  Е13.8 Другие уточненные формы сахарного диабета с неуточненными осложнениями
  Е13.9 Другие уточненные формы сахарного диабета без осложнений
  Е14.2 Сахарный диабет неуточненный с поражениями почек
  Е14.4 Сахарный диабет неуточненный с неврологическими проявлениями
  Е14.6 Сахарный диабет неуточненный с другими уточненными осложнениями
  Е14.7 Сахарный диабет неуточненный с множественными осложнениями
  Е14.8 Сахарный диабет неуточненный с неуточненными осложнениями
  Е14.9 Сахарный диабет неуточненный без осложнений
  Е89.1 Гипоинсулинемия, возникшая после медицинских процедур

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 735н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при первичном гипотиреозе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 17 января 2013 г. № 26567)

Категория возрастная: взрослые
Пол: любой
Фаза: любая
Стадия: любая
Осложнения: вне зависимости от осложнений
Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
Условие оказания: амбулаторно
Форма оказания медицинской помощи: плановая
Средние сроки лечения (количество дней): 365
Код по МКБ X
Нозологические единицы
  Е02 Субклинический гипотиреоз вследствие йодной недостаточности
  Е03 Другие формы гипотиреоза
  Е03.0 Врожденный гипотиреоз с диффузным зобом
  Е03.1 Врожденный гипотиреоз без зоба
  Е03.2 Гипотиреоз, вызванный медикаментами и другими экзогенными веществами
  Е03.3 Постинфекционный гипотиреоз
  Е03.4 Атрофия щитовидной железы (приобретенная)
  Е03.8 Другие уточненные гипотиреозы
  Е03.9 Гипотиреоз неуточненный
  Е06 Тиреоидит
  Е06.3 Аутоиммунный тиреоидит
  Е06.5 Другой хронический тиреоидит
  Е06.9 Тиреоидит неуточненный
  Е89 Эндокринные и метаболические нарушения, возникшие после медицинских процедур,
   не классифицированные в других рубриках
  Е89.0 Гипотироидизм, возникший после медицинских процедур

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 725н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при преждевременном половом созревании, в том числе вторичного генеза»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 13 февраля 2013 г. № 27056)

   Категория возрастная: дети
   Пол: любой
   Фаза: любая
   Стадия: хроническая
   Осложнения: вне зависимости от осложнений
   Вид медицинской помощи: первичная медико-санитарная помощь
   Условия оказания: амбулаторно
   Форма оказания медицинской помощи: плановая
   Средние сроки лечения (количество дней): 365
   Код по МКБ X
   Нозологические единицы
  D27 Доброкачественное новообразование яичника
  D29 Доброкачественные новообразования мужских половых органов
  D29.2 Яичка
  D35 Доброкачественные новообразования других и неуточненных эндокринных желез
  D35.0 Надпочечника
  Е03.9 Гипотиреоз неуточненный
  Е22.8 Другие состояния гиперфункции гипофиза
  Е22.9 Гиперфункция гипофиза неуточненная
  Е25 Адреногенитальные расстройства
  Е25.9 Андрогенитальное нарушение неуточненное
  Е27.0 Другие виды гиперсекреции коры надпочечников
  Е28.0 Избыток эстрогенов
  Е29.0 Гиперфункция яичек
  Е29.9 Дисфункция яичек неуточненная
  Е30.1 Преждевременное половое созревание
  Е30.8 Другие нарушения полового созревания
  Е30.9 Нарушение полового созревания неуточненное
  Q78.1 Полиостозная фиброзная дисплазия

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 851н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи детям при ожирении»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 28 февраля 2013 г. № 27399)

Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 9 ноября 2012 г. № 692н
«Об утверждении стандарта первичной медико-санитарной помощи при нетоксическом зобе»

(Зарегистрировано в Минюсте РФ 18 января 2012 г. № 26593)

  Категория возрастная: взрослые
  Пол: любой Фаза: любая
  Стадия: любая
  Осложнения: вне зависимости от осложнений
  Вид медицинской помощи: специализированная медицинская помощь
  Условие оказания: амбулаторно
  Форма оказания медицинской помощи: плановая
  Средние сроки лечения (количество дней): 180
  Код по МКБ X
  Нозологические единицы
  Е01 Болезни щитовидной железы, связанные с йодной недостаточностью, и сходные состояния
  Е01.0 Диффузный (эндемический) зоб, связанный с йодной недостаточностью
  Е01.1 Многоузловой (эндемический) зоб, связанный с йодной недостаточностью
  Е01.2 Зоб (эндемический), связанный с йодной недостаточностью, неуточненный
  Е01.8 Другие болезни щитовидной железы,
связанные с йодной недостаточностью, и сходные состояния
  Е04 Другие формы нетоксического зоба
  Е04.0 Нетоксический диффузный зоб
  Е04.1 Нетоксический одноузловой зоб
  Е04.2 Нетоксический многоузловой зоб
  Е04.8 Другие уточненные формы нетоксического зоба
  Е04.9 Нетоксический зоб неуточненный

Категории: приказ; стандарты; МКБ X.

Избыточная масса тела код по мкб

Исключены:

адипозогенитальная дистрофия (E23.6)
липоматоз:

БДУ (E88.2)
болезненный [болезнь Деркума] (E88.2)

синдром Прадера-Вилли (Q87.1)

Синдром гиповентиляции при ожирении (Obesity hypoventilation syndrome [OHS])

Алфавитные указатели МКБ-10

Внешние причины травм — термины в этом разделе представляют собой не медицинские диагнозы, а описание обстоятельств, при которых произошло событие (Класс XX. Внешние причины заболеваемости и смертности. Коды рубрик V01-Y98).

Лекарственные средства и химические вещества — таблица лекарственных средств и химических веществ, вызвавших отравление или другие неблагоприятные реакции.

В России Международная классификация болезней 10-го пересмотра (МКБ-10) принята как единый нормативный документ для учета заболеваемости, причин обращений населения в медицинские учреждения всех ведомств, причин смерти.

МКБ-10 внедрена в практику здравоохранения на всей территории РФ в 1999 году приказом Минздрава России от 27.05.97 г. №170

Выход в свет нового пересмотра (МКБ-11) планируется ВОЗ в 2022 году.

Сокращения и условные обозначения в Международой классификации болезней 10-го пересмотра

БДУ — без других указаний.

НКДР — не классифицированный(ая)(ое) в других рубриках.

† — код основной болезни. Главный код в системе двойного кодирования, содержит информацию основной генерализованной болезни.

* — факультативный код. Дополнительный код в системе двойного кодирования, содержит информацию о проявлении основной генерализованной болезни в отдельном органе или области тела.

Международная классификация болезней 10-го пересмотра (МКБ-10)

E65-E68 Ожирение и другие виды избыточности питания

E65 Локализованное отложение жира

Включая: жировые подушки

адипозогенитальная дистрофия (E23.6)
липоматоз:
БДУ (E88.2)
болезненный [болезнь Деркума] (E88.2)
синдром Прадера-Вилли (Q87.1)

E66.0 Ожирение, обусловленное избыточным поступлением энергетических ресурсов

E66.1 Ожирение, вызванное приемом лекарственных средств

При необходимости идентифицировать лекарственный препарат используют дополнительный код внешних причин (класс XX).

E66.2 Крайняя степень ожирения, сопровождаемая альвеолярной гиповентиляцией

E67 Другие виды избыточности питания

переедание БДУ (R63.2)
последствия избыточности питания (E68)

E67.0 Гипервитаминоз A

E67.2 Синдром мегадоз витамина B6

E67.3 Гипервитаминоз D

E67.8 Другие уточненные формы избыточности питания
E68 Последствия избыточности питания

Примечание. Не следует использовать для хронического переедания. Данный код предназначен для текущего переедания.

Примечания. 1. Данная версия соответствует версии 2016 года ВОЗ (ICD-10 Version:2016), некоторые позиции которой могут отличаться от утверждённой Минздравом России версии МКБ-10.

2. БДУ — без дополнительных уточнений.

3. Перевод на русский язык некоторых терминов в настоящей статье может отличаться от перевода в утверждённой Минздравом России МКБ-10. Все замечания и уточнения по переводу, оформлению и др. принимаются с благодарностью по электронной почте [email protected] .

4. Звёздочкой помечены факультативные дополнительные коды, относящиеся к проявлению болезни в отдельном органе или области тела, представляющей собой самостоятельную клиническую проблему.

Е00-Е07 Болезни щитовидной железы
Е10-Е14 Сахарный диабет
Е15-Е16 Другие нарушения регуляции глюкозы и внутренней секреции поджелудочной железы
Е20-Е35 Нарушения других эндокринных желез
Е40-Е46 Недостаточность питания
Е50-Е64 Другие виды недостаточности питания
Е65-Е68 Ожирение и другие виды избыточности питания
Е70-Е90 Нарушения обмена веществ

Ожирение — состояние, при котором в организме человека накапливаются избыточные жировые отложения. У человека признается наличие этого заболевания, если его вес превышает максимально допустимый для его роста как минимум на 20 процентов.

Ожирение наступает, когда энергетическая ценность поступающей в организм пищи превышает потребности организма. Предрасположенность к ожирению может передаваться по наследству как в результате установившихся привычек в еде, так и по вине генетического фактора. В редких случаях ожирение может являться симптомом гормонального расстройства, например гипотиреоза. Некоторые лекарственные препараты, особенно кортикостероиды, также могут приводить к ожирению.

Риск развития заболевания повышается с возрастом. Чаще страдают женщины. Иногда предрасположенность к ожирению передается по наследству. Основные факторы риска — невоздержанность в еде и сидячий образ жизни.

Ожирение может быть причиной различных проблем со здоровьем, так как из-за него органы и суставы организма человека испытывают дополнительную нагрузку. Например, в число самых распространенных подобных проблем входят одышка, боли в спине, тазобедренных и коленных суставах. Ожирение повышает риск развития некоторых широко распространенных, потенциально опасных для жизни заболеваний, таких как артериит, инсульт и повышенное артериальное давление.

При развитии ожирения необходимо обратиться к врачу. Для исключения сопутствующих заболеваний у пациента будет взят анализ крови на сахар (чтобы исключить сахарный диабет) и холестерин. Дополнительно могут быть взяты анализы крови на выявление других гормональных расстройств. На приеме, скорее всего, будет проведен замер веса и роста пациента, а также разработана индивидуальная диета. Кроме того, будет рекомендована физическая нагрузка определенной интенсивности.

Немедикаментозные методы лечения

Чаще всего ожирение лечится с помощью снижающей вес диеты и увеличения физической нагрузки. Обычно ежедневное потребление калорий понижается на 500–1000 от того числа, которое рекомендовано людям одинакового с пациентом роста, пола и возраста. Индивидуальная диета составляется таким образом, чтобы обеспечить медленное, щадящее снижение веса. Диета может быть подобрана врачом или диетологом, хотя дополнительно пациент может присоединиться к группе взаимопомощи. Для снижения веса совершенно необходимо регулярно заниматься физическими упражнениями умеренной интенсивности.

Медицинские препараты, подавляющие аппетит, могут оказаться действенными. Сибутрамин регулирует аппетит, воздействуя на нейромедиаторы в головном мозге. Кроме того, могут оказаться полезными медикаменты, например орлистат, ослабляющие способность пищеварительного тракта всасывать питательные вещества. В редких случаях ожирение лечится с помощью хирургии. Например, желудок может быть скреплен скобками, чтобы уменьшить его размер.

Полный медицинский справочник/ Пер. с англ. Е. Махияновой и И. Древаль.- М.: АСТ , Астрель, 2006.- 1104 с.

Сведения о выявленных отдельных факторах риска развития хронических неинфекционных заболеваний, не являющихся заболеваниями, в соответствии с кодами МКБ -10

Подробности: Просмотров: 18580

Сведения о выявленных отдельных факторах риска развития хронических неинфекционных заболеваний, не являющихся заболеваниями, в соответствии с кодами МКБ -10

Фактора риска	Код МКБ -10	Мужчины				Женщины				Всего
Фактора риска	Код МКБ -10	21-36 лет	39-60 лет	> 60 лет	Всего	21-36 лет	39-60 лет	> 60 лет	Всего	21-36 лет	39-60 лет	> 60 лет	Всего
Повышенный уровень артериального давления (Повышенное кровяное давление при отсутствии диагноза гипертензии)	R03.0	23	5	39	67	41	5	3	49	64	10	42	116
Гипергликемия неуточненная (Повышенное содержание глюкозы в крови)	R73.9	9	14	8	31	8	37	8	53	17	51	16	84
Избыточная масса тела (Анормальная прибавка массы тела)	R63.5	68	61	22	151	106	129	99	334	174	190	121	485
Курение табака (Употребление табака)	Z72.0	105	96	14	215	87	104	3	194	192	200	17	409
Риск пагубного потребления алкоголя (Употребление алкоголя)	Z72.1	8	18	2	28	5	14		19	13	32	2	47
Риск потребления наркотических средств и психотропных веществ без назначения врача (Употребление наркотиков)	Z72.2	1	2		3				0	1	2	0	3
Низкая физическая активность (Недостаток физической активности)	Z72.3	103	98	33	233	162	238	53	453	264	336	86	686
Нерациональное питание (Неприемлемая диета и вредные привычки питания)	Z72.4	139	139	38	316	167	177	86	430	306	316	124	746
Отягощенная наследственность по злокачественным новообразованиям (в семейном анамнезе злокачественное новообразование), отягощенная наследственность по сердечно-сосудистым заболеваниям (в семейном анамнезе инсульт, в семейном анамнезе ишемическая болезнь сердца и другие болезни сердечно-сосудистой системы), отягощенная наследственность по хроническим болезням нижних дыхательных путей (в семейном анамнезе астма и другие хронические болезни нижних дыхательных путей), отягощенная наследственность по сахарному диабету (в семейном анамнезе сахарный диабет).	Z80, Z82.3, Z82.4, Z82.5,	20	36	12	68	68	162	31	261	88	198	43	329
Отягощенная наследственность по сахарному диабету ( в семейном анамнезе сахарный диабет)	Z83.3	1	7	2		4	5	3
Высокий абсолютный суммарный сердечно-сосудистый риск		4	99	44	147	3	188	67	258	7	287	111	405
Очень высокий абсолютный суммарный сердечно-сосудистый риск		1	31	27	59		62	52	114	1	93	79	173

Таксономический признак ожирения в микробиоме? Разобраться в сути дела

Abstract

Ожирение — важная и трудноразрешимая проблема общественного здравоохранения. В дополнение к хорошо известным факторам риска, связанным с поведением, диетой и генетикой, сообщества кишечных микробов недавно были идентифицированы как еще один возможный источник риска и потенциальная терапевтическая цель. Однако исследования на людях и моделях животных дали противоречивые результаты о точном характере связи между составом микробиома и ожирением.В этой статье мы используем общедоступные данные из Human Microbiome Project (HMP) и MetaHIT, обоих опросов здоровых взрослых, которые включают лиц с ожирением, а также двух небольших исследований, в которых конкретно изучались худые и страдающие ожирением взрослых. Мы обнаружили, что вариабельность таксономического состава микробиомов стула между исследованиями намного превышает различия между худыми и тучными людьми в рамках исследований. Наш анализ также показывает высокую степень вариабельности состава и разнообразия микробиома стула у разных людей.Хотя мы подтверждаем ранее опубликованные небольшие, но статистически значимые различия в таксономическом составе на уровне филумов между худыми и тучными людьми в нескольких когортах, мы не обнаруживаем связи между ИМТ и таксономическим составом микробиомов стула в более крупных наборах данных HMP и MetaHIT. Мы исследуем ряд различных статистических методов и показываем, что этот результат устойчив к выбору методологии. Различия между исследованиями, вероятно, связаны с сочетанием технических и клинических факторов.Мы пришли к выводу, что не существует простой таксономической характеристики ожирения в микробиоте кишечника человека.

Образец цитирования: Finucane MM, Sharpton TJ, Laurent TJ, Pollard KS (2014) Таксономический признак ожирения в микробиоме? Добраться до сути дела. PLoS ONE 9 (1): e84689. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084689

Редактор: Маркус М. Хеймсаат, Шарите, кампус Бенджамина Франклина, Германия

Поступила: 28 мая 2013 г .; Принята к печати: 26 ноября 2013 г .; Опубликовано: 8 января 2014 г.

Авторские права: © 2014 Finucane et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана Национальным научным фондом (грант # DMS-1069303) и подарком от Фонда Сан-Симеон. Финансовая поддержка для разработки NIH Human Microbiome Project — Core Microbiome Sampling Protocol A (HMP-A) была предоставлена Дорожной картой NIH для медицинских исследований.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Ожирение является одной из определяющих проблем общественного здравоохранения нашего времени: по оценкам, 3,4 миллиона случаев смерти ежегодно связаны с высоким ИМТ [1]. Изменения в питании и образе жизни имеют лишь умеренные эффекты, и неясно, сохранятся ли эти преимущества с течением времени [2].Таким образом, существует значительный интерес к альтернативным подходам к снижению веса.

В последние годы появилась дразнящая новая теория, предполагающая, что микробиом кишечника может быть терапевтической мишенью. Подтверждая причинную роль кишечных микробов в ожирении, исследования на мышах показали, что ожирение может быть вызвано у худых людей с помощью трансплантации фекалий от людей с ожирением [3], [4]. Хотя механизмы, посредством которых микробы кишечника влияют на ИМТ, неизвестны, многочисленные исследования состава микробиома кишечника как у мышей, так и у людей показали, что у людей с ожирением соотношение бактерий из типа Bacteroidetes к бактериям из типа Firmicutes ниже, чем у худых. лица [3], [5] — [7].Также было показано, что тучные люди имеют менее разнообразные бактериальные сообщества [7], [8].

И научная литература [9], [10], и популярная пресса [11] провозгласили связь ожирения и относительной численности Bacteroidetes по сравнению с Firmicutes как убедительный результат. Однако в нескольких недавних сообщениях ставится под сомнение сила этой связи. Два крупных исследования не обнаружили связи между ожирением и соотношением Bacteroidetes : Firmicutes [12], [13].Более того, несколько публикаций фактически сообщают о более высоком соотношении Bacteroidetes к Firmicutes среди людей с ожирением [14], что прямо противоречит первоначальным результатам.

Консорциум Human Microbiome Project (HMP) сопоставил самый большой из существующих наборов данных, описывающих микробиоту здоровых людей, с последовательностями, подобранными с использованием строгого контроля качества. Когорта включает секвенирование 16S рРНК микробиомов стула более 200 взрослых, проживающих в Хьюстоне и Сент-Луисе [15], и включает субъектов с широким диапазоном значений ИМТ, включая 24 человека с ожирением () и 123 худощавых () человека.Эти данные дают возможность исследовать противоречивые данные о таксономическом составе микробиома кишечника и ожирении.

С этой целью мы провели обширную оценку взаимосвязи между ИМТ и таксономическим составом микробиома кишечника в наборе данных HMP и сравнили наши результаты с тенденциями в данных MetaHIT [16], которые представляют собой еще одно крупное исследование здоровых людей с ожирением и взрослых, не страдающих ожирением, а также в двух более ранних исследованиях, в которых конкретно выбирались худые и тучные люди [6], [7].Наш анализ расширяет работу Консорциума HMP, который исследовал большой набор возможных взаимосвязей между фенотипическими данными хозяина (например, ИМТ, возраст, артериальное давление) и численностью микробов, ферментов и метаболических путей и не обнаружил значительной связи между ИМТ и относительная численность Bacteroidetes или Firmicutes [13]. Этот анализ был разработан для автоматического поиска по большому количеству возможных отношений с помощью единого заранее заданного подхода. Чтобы гарантировать, что связь между ИМТ и составом кишечного сообщества не была упущена, мы использовали ряд методов графического и статистического моделирования, количественно оценили состав сообщества различными способами и выполнили расчеты мощности.Этот тщательный опрос данных подтверждает, что нет никакой связи между ИМТ и таксономическим составом или разнообразием микробиома кала в когорте HMP. Когда мы изучили взаимосвязь между составом микробиома стула и ИМТ в разных исследованиях, мы обнаружили, что вариабельность между исследованиями намного превышает различия в составе между худыми и тучными людьми в каждом исследовании. Наши результаты показывают, что нет простой взаимосвязи между ИМТ и микробиотой кишечника и что между опубликованными исследованиями существуют значительные технические и клинические различия.

Результаты

Соотношение

Bacteroidetes : Firmicutes не связано с ожирением или ИМТ

Мы начали с попытки воспроизвести наиболее известный результат, подтверждающий теорию о том, что у людей с ожирением соотношение в кишечнике ниже Bacteroidetes к Firmicutes . Мы не обнаружили разницы между тучными и худощавыми людьми в их относительной численности: Bacteroidetes или Firmicutes (p = 0.30 и 0,86 соответственно по -тесту).

Важно отметить, что наша неспособность обнаружить эти различия произошла не из-за недостаточной статистической мощности. С нашими размерами выборки и ранее сообщенными размерами эффекта очень маловероятно, что мы не нашли бы никакой связи в данных HMP, если бы связь действительно существовала в популяциях Сент-Луиса и Хьюстона. Например, используя размеры эффекта от Turnbaugh et al. [7] для области V6 гена 16S рРНК у американцев европейского происхождения мы имели бы 96% -ную мощность, чтобы обнаружить разницу в относительной численности Bacteroidetes и 80% -ную мощность для Firmicutes .Эти расчеты мощности объясняют тот факт, что доля лиц с ожирением в когорте HMP ниже, чем в [7].

Поскольку пагубные последствия для здоровья от избыточного веса проявляются на протяжении всего диапазона значений ИМТ, а не только выше порогового значения ожирения (ИМТ), мы затем искали количественную связь между непрерывной переменной ИМТ и соотношением Bacteroidetes к Firmicutes . Связи не было (рисунок 1; линейная регрессия p = 0.41), и это соотношение сильно варьировалось между людьми, независимо от ИМТ.

Альтернативные количественные определения таксономического состава также не связаны с ИМТ

Затем мы исследовали возможность того, что — с целью выявления связи с ИМТ — соотношение Bacteroidetes к Firmicutes не дает адекватного обобщения таксономического состава микробиома кишечника на уровне филума. В частности, мы количественно оценили относительную численность пяти основных бактериальных филумов в каждом образце и построили композиционный профиль на уровне филумов для каждого человека.Затем мы визуализировали эти композиционные профили как функцию ИМТ. Никакого сигнала не было (рис. 2).

Рис. 2. Нет никакой связи между ИМТ и составом микробиома на уровне филумов.

Каждая строка показывает относительную численность основных типов кишечных бактерий у человека. Физические лица упорядочены в соответствии с их ИМТ.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084689.g002

Затем, чтобы убедиться, что мы не пропустили тонкую закономерность на этом графике, мы использовали статистическую модель, чтобы изолировать эффекты ИМТ от остаточной дисперсии из-за выборки. и погрешность измерения.В частности, мы смоделировали изометрическое преобразование логарифмического отношения [17] относительной численности каждого основного типа в каждой выборке, используя линейную модель, включая фиксированный эффект типа плюс специфический для типа эффект ИМТ плюс случайная ошибка. Мы снова не обнаружили значительной связи между ИМТ и таксономическим составом на уровне филума.

Затем мы рассмотрели возможность того, что ассоциация ИМТ существует с более тонким таксономическим разрешением, несмотря на отсутствие ассоциации на уровне типа.Для каждого человека мы создали новый профиль таксономического состава, который количественно оценил относительную численность каждого рода бактерий в микробиоме стула человека. Мы применили анализ главных компонентов к этим профилям на уровне рода, чтобы уменьшить их размерность, как в Smith et al. [18]. Затем мы проверили связь между ИМТ и любым из первых шести основных компонентов (которые объясняют 96% дисперсии профилей на уровне рода). Мы не обнаружили значимых ассоциаций.

Кроме того, чтобы гарантировать, что сокращение основных компонентов не скрывает связь, мы использовали логистическую регрессию для моделирования вероятности наблюдения каждого основного рода как функции ИМТ.Мы снова не нашли никаких ассоциаций.

Разнообразие микробиома кишечника не связано с ИМТ

Наконец, мы исследовали гипотезу о том, что ИМТ связан не с относительной численностью отдельных таксонов, а, скорее, с разнообразием присутствующих таксонов. Эта возможность была поддержана Turnbaugh et al. [7] и Ле Шателье и др. [8], которые пришли к выводу, что разнообразный микробиом кишечника может иметь защитный эффект от ожирения. Следуя подходу Turnbaugh et al.[7], мы использовали вызовы 97% идентичности операционных таксономических единиц (OTU) при чтении секвенирования для каждого образца HMP для расчета кривых разрежения. Затем мы использовали эти кривые для сравнения уровней богатства (то есть общего количества OTU) между людьми с ожирением и худощавыми людьми. В отличие от результатов [7] и [8], мы не обнаружили взаимосвязи между богатством и ожирением, а скорее наблюдали высокую степень остаточной вариабельности богатства OTU у разных людей.

Чтобы убедиться, что эти удивительные результаты не являются артефактом измерения разнообразия или процедуры расчета, мы подтвердили наши выводы с помощью меры энтропии Шеннона, а также различных пакетов программного обеспечения для анализа микробной экологии (mothur [19], QIIME [20] и МетаФлан [21]).Этот анализ чувствительности подтвердил, что наши результаты нулевого разнообразия были надежными.

Эффекты ожирения не совпадают в исследованиях

Чтобы убедиться, что мы могли воспроизвести важные результаты предыдущих анализов [6], [7], и оценить, может ли другое крупное недавнее исследование с более широким диапазоном значений ИМТ (MetaHIT [16]) помочь прояснить противоречивые результаты, мы повторно проанализировали данные из [6], [7] и датских субъектов в [16]. Хотя первичный анализ настоящей рукописи был ограничен областью V35 гена 16S рРНК, мы также включили данные HMP из области V13, чтобы оценить возможность того, что смещение, специфичное для области 16S, может скрывать истинную основную взаимосвязь.

На рисунке 3 мы показываем, что различия в относительной численности Firmicutes и Bacteroidetes намного больше среди исследований, чем между худыми и тучными людьми в рамках любого исследования. Результаты MetaHIT и HMP не только не отражают выводы Лея и Тернбо, но и идут в противоположном направлении. В данных HMP это открытие согласуется с областями V13 и V35 локуса 16 S, оба из которых были секвенированы у одних и тех же людей на одной платформе (Roche 454).Существенная вариабельность между исследованиями может быть связана с неизмеряемым фактором, таким как диета [22], или с техническими факторами, такими как метод выделения ДНК, область целевого локуса 16 S или платформа секвенирования [23]. Однако постоянное отсутствие ассоциации BMI для регионов V13 и V35 в данных HMP указывает на то, что область 16 S не является основным вмешивающимся фактором, по крайней мере, в этой когорте и для этих двух вариабельных областей.

Рис. 3. Различия в относительной численности Bacteroidetes и Firmicutes между исследованиями больше, чем различия внутри исследования между худыми и тучными людьми.

Данные Ley взяты из [6]. «Turnb». данные взяты из Turnbaugh et al. [7], от афроамериканцев (AA) и американцев европейского происхождения (EA), из вариабельных областей (V) 2 и 6. Данные MetaHIT получены от датских субъектов из [16], у которых нет воспалительного заболевания кишечника. Данные HMP взяты из V13 и V35. Отметим, что первичные результаты этой рукописи были получены с использованием данных HMP V35. Все p-значения получены по тесту.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0084689.g003

Обсуждение

Исследования фекальных трансплантатов на мышах убедительно показали, что микробиом оказывает причинное влияние на ожирение [3], [4], а в ряде известных работ было обнаружено, что у людей с ожирением соотношение Bacteroidetes к Firmicutes [3], [5] — [7]. Тем не менее, мы и другие не обнаружили никакой связи между ИМТ и составом на уровне филума кишечного микробиома в крупномасштабных анализах [12], [13]. Эти противоречивые наблюдения предполагают, что в микробиоме кишечника не существует простых таксономических признаков ожирения.

Существует ряд возможных причин противоречивых результатов. Одна из возможностей состоит в том, что неизмеримые искажающие факторы скрывают истинные лежащие в основе отношения. Например, статус диабета [24], диета [22], общее потребление калорий [25] или продолжительность голодания [26] могут быть связаны как с ИМТ, так и с составом микробиома. Для оценки вклада этих переменных во взаимосвязь между ИМТ и составом кишечного микробиома необходим тщательный и стандартизованный сбор физиологических данных хозяина.Другая возможность состоит в том, что технологические проблемы могут иметь различное влияние в разных исследованиях [14], [23]. Наконец, может случиться так, что влияние микробиома на ожирение не опосредовано его таксономическим составом, а скорее его функцией, поскольку близкородственные таксоны могут иметь самые разные функции, а отдаленно родственные таксоны могут иметь аналогичные функции. Эта теория подтверждается данными Turnbaugh et al. [7] (который обнаружил обогащение генов, участвующих в метаболизме углеводов и липидов у лиц с ожирением), но не по результатам Консорциума HMP [13] (который не обнаружил связи между ИМТ и изобилием каких-либо путей).Необходимы дополнительные функциональные метагеномные исследования, чтобы определить, существует ли надежная взаимосвязь между ИМТ и функцией микробиома. Как только природа этой взаимосвязи станет лучше понятна, потребуются дальнейшие эпидемиологические исследования, чтобы оценить долю ожирения среди людей, связанного с микробными факторами.

Ограничением нашего первичного анализа является то, что они были ограничены здоровыми субъектами из когорты HMP, ни один из которых не имел ИМТ 35. Например, мы предполагаем, что скрининг здоровья HMP мог исключить людей с низким разнообразием, что затрудняет наши возможности. различить связь между ожирением и богатством.Отметим, однако, что датская когорта MetaHIT включала = 12 (17%) субъектов с ИМТ 35, и, тем не менее, не было выявлено связи между ожирением и таксономическим составом микробиома кишечника.

Методы

Мы загрузили высококачественные, таксономически аннотированные последовательности гена Roche V35 16 S рРНК из Центра анализа и координации данных HMP (www.hmpdacc.org). Это ПЦР-амплифицированные области V35, секвенированные по в массе на приборе Roche 454. Эти последовательности ранее подвергались тщательному анализу контроля качества [15], включая обрезку, шумоподавление и химерную фильтрацию.Для каждой последовательности мы извлекли таксономические аннотации на уровне филумов и загрузочную статистику с помощью классификатора RDP 2.2 [27], используя обучающий набор и таксономию по умолчанию 032010, а также опцию выходного формата «allrank» в соответствии с СОП HMP. Последовательности с аннотациями, имеющие статистику начальной загрузки менее 80%, считались «неклассифицированными». Затем последовательности были сопоставлены с их соответствующим идентификатором образца HMP и использовались для расчета относительной численности на уровне филума для каждого образца. Для субъектов с несколькими образцами стула, поскольку данные о продольной траектории ИМТ не были доступны, мы проанализировали образец с наибольшим количеством считываний.Из всего 217 доступных образцов мы исключили пять образцов с 1000 считываний, в результате чего общий размер нашей выборки снизился до 212 образцов. Тот же подход был использован для получения последовательностей гена 16 S рРНК HMP V13.

Мы проверили связь между относительной численностью рода arcsin square root и всеми дополнительными количественными фенотипами из HMP. Мы не обнаружили значимых ассоциаций (с поправкой на FDR) ни на одном участке тела, что согласуется с низким числом ассоциаций микроб-фенотип, обнаруженным в [13], и подтверждает достоверность наших первичных результатов относительно ИМТ.

Данные MetaHIT состояли из метагеномов дробовика, которые мы загрузили из Европейского института биоинформатики (www.ebi.ac.uk). Мы ограничили наш анализ датскими образцами, которые содержали длины считывания не менее 75 пар оснований (bp) (= 70), и мы случайным образом проанализировали 20 M считываний из каждого образца. Мы количественно оценили разнообразие на уровне филумов микробиома из этих образцов с использованием базы данных STAP [28] и базы данных GreenGenes [29] для идентификации метагеномных гомологов локуса 16 S и классификатора RDP для таксономической аннотации этих последовательностей.Мы провели статистическое моделирование, чтобы определить оптимальные статистические пороги начальной загрузки для классификации метагеномных считываний 16 S РНК по типам с использованием классификатора RDP. Вкратце, мы использовали Grinder [30] для моделирования 10 000 считываний 16 S размером 75 п.н. из базы данных STAP и базы данных GreenGenes, а также 90 000 считываний по 75 п.н. из кодирующих последовательностей (CDS) 11 бактериальных геномов, случайно выбранных из J. Craig Комплексная база данных о микробных ресурсах Института Вентера [31]. Все чтения подлежали классификации с использованием классификатора RDP.Мы обнаружили, что порог начальной загрузки 70% захватил 83% смоделированных 16 S-последовательностей и правильно классифицировал 99% этих чтений, отфильтровывая все, кроме 0,001% чтений CDS.

Общедоступные высококачественные последовательности ампликонов 16 S, полученные в рамках исследований Ley [6] и Turnbaugh [7], были загружены и систематически аннотированы. В частности, мы загрузили 18 348 полноразмерных 16 S, собранных из последовательностей дробовика, сгенерированных в [6] из gordonlab.wustl.edu/microbial_ecology_ human_obesity /, и 817 942 гипервариабельных областей V6 и 1119 519 вариабельных областей V2 16 последовательностей пиросеквенирования S РНК, созданных в [7] от gordonlab.wustl.edu/NatureTwins_2008/. Все последовательности были классифицированы по типам с использованием классификатора RDP, как описано выше.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: MMF TJS KSP. Проанализированы данные: MMF TJS TL. Написал статью: MMF TJS TL KSP.

Ссылки

1. Лим С.С., Вос Т., Флаксман А.Д., Данаи Г., Сибуя К. и др. (2013) Сравнительная оценка риска бремени болезней и травм, связанного с 67 факторами риска и кластерами факторов риска в 21 регионе, 1990–2010 годы: систематический анализ глобального исследования бремени болезней, 2010 год.Ланцет 380: 2224–2260.
2. Douketis J, Macie C, Thabane L, Williamson D (2005) Систематический обзор долгосрочных исследований по снижению веса у взрослых с ожирением: клиническое значение и применимость к клинической практике. Международный журнал ожирения 29: 1153–1167.
3. Turnbaugh PJ, Ley RE, Mahowald MA, Magrini V, Mardis ER, et al. (2006) Микробиом кишечника, связанный с ожирением, с повышенной способностью собирать энергию. Природа 444: 1027–131.
4.Тернбо П. Дж., Бэкхед Ф., Фултон Л., Гордон Дж. И. и др. (2008) Ожирение, вызванное диетой, связано с заметными, но обратимыми изменениями в микробиоме дистального отдела кишечника мыши. Клеточный хозяин и микроб 3: 213–223.
5. Ley RE, Bäckhed F, Turnbaugh P, Lozupone CA, Knight RD и др. (2005) Ожирение изменяет микробную экологию кишечника. Труды Национальной академии наук США 102: 11070–11075.
6. Ley RE, Turnbaugh PJ, Klein S, Gordon JI и др. (2006) Микробная экология: кишечные микробы человека, связанные с ожирением.Природа 444: 1022–1023.
7. Тернбо П.Дж., Хамади М., Яцуненко Т., Кантарел Б.Л., Дункан А. и др. (2009) Основной микробиом кишечника у тучных и худых близнецов. Природа 457: 480–484.
8. Ле Шателье Е., Нильсен Т., Цинь Дж., Прифти Е., Хильдебранд Ф. и др. (2013) Богатство микробиома кишечника человека коррелирует с метаболическими маркерами. Nature 500: 541–546.
9. Knights D, Costello EK, Knight R (2011) Классификация микробиоты человека под руководством.FEMS Microbiology Reviews 35: 343–359.
10. Суини Т.Е., Мортон Дж. М. (2013) Микробиом кишечника человека: обзор влияния ожирения и потери веса, вызванной хирургическим вмешательством. JAMA Surgery: 1–7.
11. Циммер С. (2010) Как микробы защищают и определяют нас. Нью-Йорк Таймс, 13 июля, страница D1.
12. Arumugam M, Raes J, Pelletier E, Le Paslier D, Yamada T. и др. (2011) Энтеротипы микробиома кишечника человека. Природа 473: 174–180.
13.Консорциум проекта «Микробиом человека» (2012 г.) Структура, функции и разнообразие здорового микробиома человека. Природа 486: 207–214.
14. Ley RE (2010) Ожирение и микробиом человека. Текущее мнение в гастроэнтерологии 26: 5–11.
15. Консорциум проекта «Микробиом человека» (2012 г.) Рамки исследования микробиома человека. Природа 486: 215–221.
16. Цинь Дж., Ли Р., Раес Дж., Арумугам М., Бургдорф К.С. и др. (2010) Каталог кишечных микробных генов человека, созданный с помощью метагеномного секвенирования.Природа 464: 59–65.
17. Aitchison J (1986) Статистический анализ композиционных данных. Чапман энд Холл, Лтд.
18. Смит М.И., Яцуненко Т., Манары М.Дж., Трехан И., Мкакося Р. и др. (2013) Микробиомы кишечника малавийских пар близнецов не согласуются с квашиоркором. Наука 339: 548–554.
19. Schloss PD, Westcott SL, Ryabin T, Hall JR, Hartmann M, et al. (2009) Представляем mothur: программное обеспечение с открытым исходным кодом, независимое от платформы, поддерживаемое сообществом для описания и сравнения микробных сообществ.Прикладная и экологическая микробиология 75: 7537–7541.
20. Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, et al. (2010) Qiime позволяет анализировать высокопроизводительные данные секвенирования сообщества. Природные методы 7: 335–336.
21. Сегата Н., Уолдрон Л., Балларини А., Нарасимхан В., Юссон О. и др. (2012) Метагеномное профилирование микробного сообщества с использованием уникальных маркерных генов, специфичных для клады. Природные методы 9: 811–814.
22. Тернбо П.Дж., Ридаура В.К., Фейт Дж.Дж., Рей Ф.Е., Найт Р. и др.(2009) Влияние диеты на микробиом кишечника человека: метагеномный анализ на гуманизированных мышах-гнотобиотах. Трансляционная медицина науки 1: 6ra14.
23. Lozupone CA, Stombaugh J, Gonzalez A, Ackermann G, Wendel D, et al. (2013) Метаанализ исследований микробиоты человека. Исследование генома 23: 1704–1714.
24. Graessler J, Qin Y, Zhong H, Zhang J, Licinio J и др .. (2012) Метагеномное секвенирование микробиома кишечника человека до и после бариатрической операции у пациентов с ожирением и диабетом 2 типа: корреляция с воспалительными и метаболическими параметрами.Журнал фармакогеномики: 1–9.
25. Швирц А., Тарас Д., Шафер К., Бейер С., Бос Н.А. и др. (2010) Микробиота и SCFA у здоровых людей с худым и избыточным весом. Ожирение 18: 190–195.
26. Crawford PA, Crowley JR, Sambandam N, Muegge BD, Costello EK, et al. (2009) Регулирование метаболизма кетоновых тел миокарда кишечной микробиотой во время дефицита питательных веществ. Труды Национальной академии наук США 106: 11276–11281.
27.Ван К., Гаррити Г.М., Тидже Дж. М., Коул Дж. Р. (2007) Наивный байесовский классификатор для быстрого отнесения последовательностей рРНК к новой бактериальной таксономии. Прикладная и экологическая микробиология 73: 5261–5267.
28. Wu D, Hartman A, Ward N, Eisen JA (2008) Автоматизированная таксономия малых субъединиц рРНК на основе филогенетического дерева и конвейер выравнивания (stap). PloS one 3: e2566.
29. ДеСантис Т.З., Хугенхольц П., Ларсен Н., Рохас М., Броди Е.Л. и др. (2006) Greengenes, химерапроверенная база данных генов рРНК 16s и рабочая среда, совместимая с arb.Прикладная и экологическая микробиология 72: 5069–5072.
30. Angly FE, Willner D, Rohwer F, Hugenholtz P, Tyson GW (2012) Grinder: универсальный симулятор последовательности ампликона и дробовика. Исследование нуклеиновых кислот 40: e94 – e94.
31. Дэвидсен Т., Бек Э., Ганапати А., Монтгомери Р., Зафар Н. и др. (2010) Всеобъемлющий микробный ресурс. Исследование нуклеиновых кислот 38: D340 – D345.

Сети совместного изобилия кишечных микробов показывают специфичность при воспалительных заболеваниях кишечника и ожирении

Чен, Л. М., Гармаева, С., Жернакова, А., Фу, Дж. Й., Вейменга, С. Взгляд системной биологии на взаимодействие окружающей среды, хозяина и микробов. Hum. Мол. Genet. 27 , R187 – R194 (2018).

CAS PubMed Google ученый

Falony, G. et al. Популяционный анализ изменчивости микробиома кишечника. Наука 352 , 560–564 (2016).

ADS CAS PubMed Google ученый

Жернакова А. и др. Популяционный метагеномический анализ выявляет маркеры состава и разнообразия кишечного микробиома. Наука 352 , 565–569 (2016).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

Lloyd-Price, J. et al. Штаммы, функции и динамика в расширенном проекте микробиома человека. Nature 550 , 61–66 (2017).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

Курилщиков А., Вейменга К., Фу Дж. И Жернакова А. Генетика хозяев и микробиом кишечника: проблемы и перспективы. Trends Immunol. 38 , 633–647 (2017).

CAS PubMed Google ученый

Wu, H. et al. Метформин изменяет микробиом кишечника людей с диабетом 2 типа, ранее не получавшим лечения, способствуя терапевтическому эффекту препарата. Nat. Med. 23 , 850–858 (2017).

CAS PubMed Google ученый

Grasset, E. et al. Специфический дисбактериоз кишечной микробиоты мышей с диабетом 2 типа индуцирует резистентность к GLP-1 посредством энтерального NO-зависимого механизма и механизма оси кишечник-мозг. Cell Metab. 26 , 278 (2017).

CAS PubMed Google ученый

Fu, J. et al. Микробиом кишечника вносит значительный вклад в изменение липидов крови. Circ. Res. 117 , 817–824 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

Jie, Z. et al. Микробиом кишечника при атеросклеротическом сердечно-сосудистом заболевании. Nat. Commun. 8 , 845 (2017).

ADS PubMed PubMed Central Google ученый

10.

Liu, R. et al. Изменения кишечного микробиома и метаболома сыворотки при ожирении и после вмешательства по снижению веса. Nat. Med. 23 , 859–868 (2017).

CAS PubMed Google ученый

11.

Bouter, K. E., van Raalte, D. H., Groen, A. K. & Nieuwdorp, M. Роль микробиома кишечника в патогенезе ожирения и связанной с ожирением метаболической дисфункции. Гастроэнтерология 152 , 1671–1678 (2017).

CAS PubMed Google ученый

12.

Halfvarson, J. et al. Динамика микробиома кишечника человека при воспалительном заболевании кишечника. Nat. Microbiol. 2 , 17004 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

13.

Imhann, F. et al. Взаимодействие генетики хозяина и микробиоты кишечника, лежащее в основе возникновения и клинических проявлений воспалительного заболевания кишечника. Кишечник 67 , 108–119 (2018).

CAS PubMed Google ученый

14.

Vich Vila, A. et al. Состав кишечной микробиоты и функциональные изменения при воспалительном заболевании кишечника и синдроме раздраженного кишечника. Sci. Пер. Мед . 10 , eaap8914 (2018).

15.

Imhann, F. et al. Ингибиторы протонной помпы влияют на микробиом кишечника. Кишечник 65 , 740–748 (2016).

CAS PubMed Google ученый

16.

Mangalam, A. et al. Комменсальные бактерии кишечного происхождения человека подавляют воспалительные и демиелинизирующие заболевания ЦНС. Cell Rep. 20 , 1269–1277 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

17.

Петриз Б. А. и Франко О. Л. Метапротеомика как дополнительный подход к микробиоте кишечника при здоровье и болезнях. Фронт. Chem. 5 , 4 (2017).

ADS PubMed PubMed Central Google ученый

18.

Россхарт, С.P. et al. Микробиота кишечника диких мышей улучшает физическую форму хозяина и повышает сопротивляемость болезням. Ячейка 171 , 1015.E13–1028.E13 (2017).

Google ученый

19.

Сурана, Н. К. и Каспер, Д. Л. Переход от ассоциаций микробиома к идентификации причинных микробов. Природа 552 , 244–247 (2017).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

20.

Баумлер А. Дж. И Сперандио В. Взаимодействие между микробиотой и патогенными бактериями в кишечнике. Nature 535 , 85–93 (2016).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

21.

Эйкхофф, М. Дж. И Басслер, Б. Л. SnapShot: определение кворума бактерий. Ячейка 174 , 1328 (2018).

CAS PubMed Google ученый

22.

Schirmer, M. et al. Связь микробиома кишечника человека с производительностью воспалительных цитокинов. Ячейка 167 , 1897 (2016).

CAS PubMed Google ученый

23.

Берри, Д. и Виддер, С. Расшифровка микробных взаимодействий и обнаружение ключевых видов с помощью сетей совместного возникновения. Фронт. Microbiol. 5 , 219 (2014).

PubMed PubMed Central Google ученый

24.

Banerjee, S., Schlaeppi, K. & van der Heijden, M. G.A. Таксоны Keystone как движущие силы структуры и функционирования микробиома. Nat. Rev. Microbiol. 16 , 567–576 (2018).

CAS PubMed Google ученый

25.

Faust, K. et al. Отношения микробного сосуществования в микробиоме человека. PLoS Comput. Биол. 8 , e1002606 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

26.

Ся, Л. К., Ай, Д., Крам, Дж., Фурман, Дж. А. и Сан, Ф. Эффективное приближение статистической значимости для анализа локального сходства данных временных рядов с высокой пропускной способностью. Биоинформатика 29 , 230–237 (2013).

CAS PubMed Google ученый

27.

Reshef, D. N. et al. Обнаружение ассоциаций в больших наборах данных. Наука 334 , 1518–1524 (2011).

ADS CAS PubMed PubMed Central МАТЕМАТИКА Google ученый

28.

Deng, Y. et al. Анализ молекулярной экологической сети. BMC Bioinformatics 13 , 113 (2012).

PubMed PubMed Central Google ученый

29.

Фридман, Дж. И Алм, Э. Дж. Вывод сетей корреляции из данных геномного обследования. PLoS Comput. Биол. 8 , e1002687 (2012).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

30.

Faust, K. et al. Отношения микробного сосуществования в микробиоме человека. PLoS Comput. Биол. 8 , e1002606 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

31.

Biagi, E. et al. Микробиота кишечника и исключительное долголетие. Curr. Биол. 26 , 1480–1485 (2016).

CAS PubMed Google ученый

32.

Flemer, B. et al. Опухоль-ассоциированная и не связанная с опухолью микробиота при колоректальном раке. Кишечник 66 , 633–643 (2017).

CAS PubMed Google ученый

33.

Wang, J. et al. Дисбиоз материнской и неонатальной микробиоты, связанный с гестационным сахарным диабетом. Кишечник 67 , 1614–1625 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

34.

Gevers, D. et al. Микробиом, ранее не получавший лечения, при впервые возникшей болезни Крона. Клеточный микроб-хозяин 15 , 382–392 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

35.

Yilmaz, B. et al. Нарушения микробной сети при рецидивирующей рефрактерной болезни Крона. Nat. Med. 25 , 323–336 (2019).

CAS PubMed Google ученый

36.

Роттьерс, Л. и Фауст, К. Можем ли мы предсказать ключевые моменты? Nat. Rev. Microbiol. 17 , 193–193 (2019).

CAS PubMed Google ученый

37.

Banerjee, S., Schlaeppi, K. & van der Heijden, M. G. A. Ответ на вопрос «Можем ли мы предсказать микробные ключевые камни?». Nat. Rev. Microbiol. 17 , 194–194 (2019).

CAS PubMed Google ученый

38.

Kurtz, Z. D. et al. Редкие и композиционно устойчивые выводы о микробных экологических сетях. PLoS Comput. Биол. 11 , e1004226 (2015).

PubMed PubMed Central Google ученый

39.

Ширмер М., Гарнер А., Вламакис Х. и Ксавьер Р. Дж. Микробные гены и пути развития воспалительного заболевания кишечника. Nat. Rev. Microbiol. 17 , 497–511 (2019).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

40.

Musher, D. M. in Medical Microbiology 4 edn (ed. Baron, S.) Ch. 30 (Медицинский филиал Техасского университета в Галвестоне, Галвестон, Техас, 1996).

41.

Дойук, Э., Ормерод, О. Дж. И Боулер, И. С. Дж. У. Эндокардит нативного клапана, вызванный Streptococcus vestibularis и Streptococcus oralis . J. Infect. 45 , 39–41 (2002).

PubMed Google ученый

42.

Pimenta, F. et al. Streptococcus infantis , Streptococcus mitis и Streptococcus oralis штаммы с очень похожими локусами cps5 и антигенным родством с пневмококками серотипа 5. Фронт. Microbiol. 9 , 3199 (2018).

PubMed Google ученый

43.

Niu, C. S. et al. Снижение уровня глюкозы в плазме аллантоином, активным ингредиентом ямса (Dioscorea spp.), У крыс с индуцированным стрептозотоцином диабетом. J. Agric. Food Chem. 58 , 12031–12035 (2010).

CAS PubMed Google ученый

44.

Tsai, C.C. et al. Аллантоин активирует рецепторы имидазолина I-3 для усиления секреции инсулина бета-клетками поджелудочной железы. Nutr. Метаб. 11 , 41 (2014).

Google ученый

45.

Марлье, Дж. Ф., Клеланд, В. В. и Зечики, Т.Н. Оксамат является альтернативным субстратом для пируваткарбоксилазы из Rhizobium etli . Биохимия 52 , 2888–2894 (2013).

CAS PubMed Google ученый

46.

Холл, В. Actinomyces — сбор доказательств колонизации и инфицирования человека. Анаэроб 14 , 1–7 (2008).

CAS PubMed Google ученый

47.

Смит, Э. и Моровиц, Х. Дж. Универсальность в промежуточном метаболизме. Proc. Natl Acad. Sci. США 101 , 13168–13173 (2004).

ADS CAS PubMed Google ученый

48.

Fenn, K. et al. Хиноны являются факторами роста микробиоты кишечника человека. Микробиом 5 , 161 (2017).

PubMed PubMed Central Google ученый

49.

Kojima, A. et al. Заражение специфическими штаммами Streptococcus mutans , бактериями полости рта, создает риск язвенного колита. Sci. Отчет 2 , 332 (2012).

PubMed PubMed Central Google ученый

50.

Kotlowski, R., Bernstein, C. N., Sepehri, S. & Krause, D. O. Высокая распространенность Escherichia coli , принадлежащей филогенетической группе B2 + D, при воспалительных заболеваниях кишечника. Кишечник 56 , 669–675 (2007).

CAS PubMed Google ученый

51.

Mirsepasi-Lauridsen, H.C. et al. Внекишечные патогенные Escherichia coli связаны с воспалением кишечника у пациентов с язвенным колитом. Sci. Отчет 6 , 31152 (2016).

ADS CAS PubMed PubMed Central Google ученый

52.

Чжу, Х. и Ли, Ю. Р. Окислительный стресс и окислительно-восстановительные механизмы передачи сигналов воспалительного заболевания кишечника: обновленные экспериментальные и клинические данные. Exp. Биол. Med. 237 , 474–480 (2012).

CAS Google ученый

53.

Albenberg, L. et al. Корреляция между внутрипросветным градиентом кислорода и радиальным разделением кишечной микробиоты. Гастроэнтерология 147 , 1055–1063 e1058 (2014).

PubMed PubMed Central Google ученый

54.

Ou, G. et al. Микробиота проксимального отдела тонкой кишки и идентификация палочковидных бактерий, связанных с детской глютеновой болезнью. Am. J. Gastroenterol. 104 , 3058–3067 (2009).

ADS PubMed Google ученый

55.

Nagaoka, K. et al. Множественные абсцессы легких, вызванные Actinomyces graevenitzii , имитирующие острый легочный кокцидиоидомикоз. J. Clin. Microbiol. 50 , 3125–3128 (2012).

PubMed PubMed Central Google ученый

56.

Кононен, Э. и Уэйд, В. Г. Актиномицеты и родственные организмы при инфекциях человека. Clin. Microbiol. Ред. 28 , 419–442 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

57.

Вонг, В. К., Turmezei, T. D. и Weston, V. C. Actinomycosis. BMJ 343 , d6099 (2011 г.).

CAS PubMed Google ученый

58.

Lin, K. et al. Редкий термофильный микроб при осложненном дивертикулярном абсцессе. Case Rep. Гастроэнтерол. 11 , 569–575 (2017).

PubMed PubMed Central Google ученый

59.

Наум, А., Filice, G. & Malhotra, A. Сложная нить: актиномикоз брюшной полости у молодой женщины с болезнью Крона. Case Rep. Гастроэнтерол. 11 , 377–381 (2017).

PubMed PubMed Central Google ученый

60.

Burr, N. E., Hull, M. A. & Subramanian, V. Добавки фолиевой кислоты могут снизить риск колоректального рака у пациентов с воспалительным заболеванием кишечника. J. Clin. Гастроэнтерол. 51 , 247–253 (2017).

CAS PubMed Google ученый

61.

Jeong, S. Y., Im, Y. N., Youm, J. Y., Lee, H. K. & Im, S. Y. l-глутамин ослабляет DSS-индуцированный колит посредством индукции MAPK-фосфатазы-1. Питательные вещества 10 , E288 (2018).

PubMed Google ученый

62.

Gu, C., Mao, X., Chen, D., Yu, B. & Yang, Q. Изолейцин играет важную роль для поддержания иммунной функции. Curr. Protein Pept. Sci. 20 , 644–651 (2019).

CAS PubMed Google ученый

63.

Martinez, Y. et al. Роль метионина на метаболизм, окислительный стресс и болезни. Аминокислоты 49 , 2091–2098 (2017).

CAS PubMed Google ученый

64.

Лимкеткай Б. Н., Вольф А. и Париан А.М. Вмешательства по питанию пациента с воспалительным заболеванием кишечника. Гастроэнтерол. Clin. North Am. 47 , 155–177 (2018).

PubMed Google ученый

65.

Overbeek, R. et al. SEED и быстрое аннотирование микробных геномов с использованием технологии подсистем (RAST). Nucleic Acids Res. 42 , D206 – D214 (2014).

CAS PubMed Google ученый

66.

Franzosa, E.A. et al. Связь метатранскриптома и метагенома кишечника человека. Proc. Natl Acad. Sci. США 111 , E2329 – E2338 (2014).

CAS PubMed Google ученый

67.

Mehta, R. S. et al. Стабильность фекального микробиома человека в когорте взрослых мужчин. Nat. Microbiol. 3 , 347–355 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

68.

Schirmer, M. et al. Динамика метатранскрипции в микробиоме кишечника при воспалительных заболеваниях кишечника. Nat. Microbiol. 3 , 337–346 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

69.

Schirmer, M. et al. Связь микробиома кишечника человека с производительностью воспалительных цитокинов. Ячейка 167 , 1897–1897 (2016).

CAS PubMed Google ученый

70.

ter Horst, R. et al. Факторы хозяина и окружающей среды, влияющие на индивидуальные цитокиновые ответы человека. Ячейка 167 , 1111–1124 (2016).

PubMed PubMed Central Google ученый

71.

Tigchelaar, E. F. et al. Профиль когорты: LifeLines DEEP, проспективное когортное исследование населения в северных Нидерландах: дизайн исследования и исходные характеристики. BMJ Open 5 , e006772 (2015).

PubMed PubMed Central Google ученый

72.

Курильщиков А. и др. Микробные ассоциации кишечника с метаболитами плазмы, связанные с сердечно-сосудистыми фенотипами и риском: перекрестное исследование. Circ. Res. 124 , 1808–1820 (2019).

CAS PubMed Google ученый

73.

ter Horst, R. et al. Половая регуляция воспаления и метаболического синдрома при ожирении. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 40 , 1787–1800 (2020).

74.

Imhann, F. et al. Проект 1000IBD: многокомпонентные данные 1000 пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника; выпуск данных 1. БМЦ Гастроэнтерол. 19 , 5 (2019).

PubMed PubMed Central Google ученый

75.

Langmead, B., Trapnell, C., Pop, M. & Salzberg, S.L. Сверхбыстрое и эффективное с точки зрения памяти выравнивание коротких последовательностей ДНК с геномом человека. Genome Biol. 10 , R25 (2009 г.).

PubMed PubMed Central Google ученый

76.

Truong, D. T. et al. MetaPhlAn2 для расширенного метагеномного таксономического профилирования. Nat. Методы 12 , 902–903 (2015).

CAS PubMed Google ученый

77.

Franzosa, E.A. et al. Функциональное профилирование метагеномов и метатранскриптомов на уровне видов. Nat. Методы 15 , 962–968 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

78.

Bateman, A. et al. UniProt: центр информации о белках. Nucleic Acids Res. 43 , D204 – D212 (2015).

Google ученый

79.

Caspi, R. et al. База данных метаболических путей и ферментов MetaCyc и коллекция баз данных путей / геномов BioCyc. Nucleic Acids Res. 44 , D471 – D480 (2016).

CAS PubMed Google ученый

80.

Caspi, R. et al. База данных метаболических путей и ферментов MetaCyc. Nucleic Acids Res. 46 , D633 – D639 (2018).

CAS PubMed Google ученый

81.

Ларк, Р. М. Анализ композиционных данных в науках о Земле: от теории к практике. J. R. Stat. Soc. Сер. А 171 , 313–314 (2008).

Google ученый

82.

Фильцмозер П. и Хрон К. Корреляционный анализ композиционных данных. Math. Geosci. 41 , 905–919 (2009).

MathSciNet МАТЕМАТИКА Google ученый

83.

Gloor, G. B., Wu, J. R., Pawlowsky-Glahn, V. & Egozcue, J. J. Все относительно: анализ данных микробиома в виде композиций. Ann. Эпидемиол. 26 , 322–329 (2016).

PubMed Google ученый

84.

van den Boogaart, K. G. & Tolosana-Delgado, R. «композиции»: унифицированный пакет R для анализа композиционных данных. Comput Geosci. 34 , 320–338 (2008).

ADS Google ученый

85.

Weiss, S. et al. Стратегии обнаружения корреляции в наборах микробных данных сильно различаются по чувствительности и точности. ISME J. 10 , 1669–1681 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

86.

Schwarzer, G. meta: пакет R для метаанализа. R News 7 , 6 (2007).

Google ученый

87.

Барбато, Дж., Барини, Э. М., Гента, Дж. И Леви, Р. Особенности и производительность некоторых методов обнаружения выбросов. J. Appl Stat. 38 , 2133–2149 (2011).

MathSciNet Google ученый

88.

Проктор, Л. М. и Нетворк, И. Х. И. Р. Проект интегративного микробиома человека: динамический анализ профилей микробиома-хозяина в периоды здоровья и болезни человека. Клеточный микроб-хозяин 16 , 276–289 (2014).

CAS Google ученый

89.

Жернакова Д.В. и др. Индивидуальные различия в уровнях белка, связанного с сердечно-сосудистыми заболеваниями, обусловлены генетикой и микробиомом кишечника. Nat. Genet. 50 , 1524–1532 (2018).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

90.

Csardi, G. N. T. Программный пакет igraph для сложных сетевых исследований. InterJ. Комплексная сист. 1695 , 1–9 (2006).

Сравнение микробного сообщества кишечника людей с ожирением и худым с использованием секвенирования гена 16S в популяции Японии

J Clin Biochem Nutr.2016 июл; 59 (1): 65–70.

Акира Андох

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Ацуши Нисида

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета- Tsukinowa, Otsu 520-2192, Япония

Kenichiro Takahashi

¹ Медицинский факультет, Университет медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Осаму Инатоми

¹ Департамент медицины Университет медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Хироцугу Имаеда

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Сигеки Бамба

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Кацуюки Кито

¹ Департамент медицины icine, Университет медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Мицусигэ Сугимото

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Тошио Кобаяси

² Университет Мияги, Тайхаку-ку, Сендай, Мияги 982-0215, Япония

¹ Медицинский факультет Университета медицинских наук Сига, Сета-Цукинова, Оцу 520-2192, Япония

Университет Мияги, Тайхаку-ку, Сендай, Мияги 982-0215, Япония

Поступила в редакцию 20 декабря 2015 г .; Принято 5 января 2016 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Измененная микробная экология кишечника способствует развитию метаболических заболеваний, включая ожирение. В этом исследовании мы выполнили анализ последовательности 16S рРНК профилей кишечной микробиоты у тучных и худых японцев.Гипервариабельные области V3 – V4 16S рРНК образцов фекалий 10 тучных и 10 худых добровольцев секвенировали с использованием системы Illumina MiSeq ^TM II. Средний индекс массы тела в группах с ожирением и худой составил 38,1 и 16,6 кг / м ² соответственно ( p <0,01). Индекс разнообразия Шеннона был значительно выше в группе худых, чем в группе с ожирением ( p <0,01). Типов Firmicutes и Fusobacteria было значительно больше у тучных людей, чем у худощавых.Численность филума Bacteroidetes и соотношение Bacteroidetes / Firmicutes не различались между группами с ожирением и худыми. Роды Alistipes , Anaerococcus , Corpococcus , Fusobacterium и Parvimonas значительно увеличились у людей с ожирением, а роды Bacteroides , Desulfovibrio , Faecalibacterium и L значительно у худощавых людей.Количество видов бактерий, обладающих противовоспалительными свойствами, таких как Faecalibacterium prausnitzii , значительно увеличилось у худых людей, но количество видов бактерий, обладающих провоспалительными свойствами, увеличилось у людей с ожирением. Микробиота кишечника, связанная с ожирением, у японцев отличалась от таковой у жителей Запада.

Ключевые слова: последовательность 16S, анализ данных, Firmicutes, Bacteroides, SCFA

Введение

Ожирение — одна из самых серьезных проблем общественного здравоохранения во всем мире.^(1,2) Более 500 миллионов человек страдают ожирением, и его распространенность резко возрастает не только в развитых, но и в развивающихся странах. ^(1,3) Ожирение связано с более высоким риском проблем со здоровьем, таких как сердечные заболевания, инсульт, высокое кровяное давление, сахарный диабет и т. Д. ⁽¹⁾ Всемирное исследование, проведенное в 2010 году, показало, что ожирение связано с 3–4 миллионами смертей, 4% потерянных лет жизни и 4% потерянных лет жизни с поправкой на инвалидность.⁽⁴⁾

Влияние микробиоты кишечника на здоровье человека признано взаимовыгодным взаимодействием между человеческими и местными микроорганизмами, которое способствует нормальной физиологии и иммунному гомеостазу. ⁽⁵⁾ Микробиота кишечника регулирует метаболические функции и энергетический баланс, а измененная микробная экология способствует развитию нескольких метаболических заболеваний, включая ожирение. Например, профиль кишечной микробиоты людей с ожирением характеризуется уменьшенной долей типа Bacteroidetes и увеличенной долей типа Firmicutes по сравнению с худыми людьми.⁽⁶⁾ Считается, что эти изменения влияют на метаболический потенциал микробиоты кишечника и повышают способность организма собирать энергию из пищи. ⁽⁷⁾ Перенос кишечной микробиоты от мышей с ожирением приводит к значительно большему накоплению жировой ткани у мышей-реципиентов, чем перенос кишечной микробиоты от худых доноров. ⁽⁸⁾ Таким образом, микробиота кишечника является критическим фактором окружающей среды, способствующим развитию ожирения.

В предыдущих исследованиях изменение микробиоты кишечника у людей с ожирением изучалось в основном в западных странах.^(3,6,7,9) De Filippo et al. ⁽¹⁰⁾ ранее продемонстрировали разницу в микробной структуре кишечника между европейскими детьми с ожирением и худыми африканскими детьми, указывая на то, что факторы окружающей среды, такие как диета, санитария и гигиена, важны для формирования микробиоты кишечника. Это приводит к возможности того, что кишечная микробиота, связанная с ожирением, может быть разной между западными и азиатскими популяциями, поскольку образ жизни, включая пищевые привычки, сильно различается.Тем не менее, изменение профиля микробиоты кишечника не исследовалось широко у азиатских людей в целом или у японцев в частности. Поэтому важно изучить профиль кишечной микробиоты японцев, связанный с ожирением.

В настоящем исследовании мы провели анализ последовательности 16S рРНК профиля кишечной микробиоты у 10 тучных и 10 худых японцев. Кроме того, были охарактеризованы виды бактерий, которые способствовали различию в составе микробиоты кишечника у людей с ожирением и худых.

Материалы и методы

Субъекты и условия

В этом исследовании приняли участие 20 добровольцев (10 тучных и 10 худощавых). Индекс массы тела (ИМТ) людей с ожирением составлял 38,1 ± 3,5 кг / м ² (среднее ± стандартное отклонение) (диапазон 35,7–49,2 кг / м ²), а ИМТ худых людей составлял 16,6 ± 1,0 кг. / м ² (диапазон 14,2–17,7 кг / м ²) (таблица). Никто не получал лечения, лекарств или добавок, которые потенциально могли бы модулировать микробиоту кишечника.Институциональный наблюдательный совет Университета медицинских наук Шига одобрил исследование, и до регистрации от каждого человека было получено письменное информированное согласие.

Таблица 1

Информация о добровольцах, принявших участие в этом исследовании

	Ожирение	Lean	p Значение
Пол (женский / мужской) 91/327 91/3 / 5
Возраст [средний (диапазон)]	41 (35–55)	45 (31–58)
Масса тела (кг, среднее ± стандартное отклонение)	101.1 ± 13,6	42,5 ± 4,1	<0,01
Рост (см, среднее ± стандартное отклонение)	162,9 ± 9,0	159,8 ± 6,1	0,22
Индекс массы тела (среднее ± стандартное отклонение)	38,1 ± 3,5	16,6 ± 1,0	<0,01
Уровень сахара в крови натощак (мг / дл)	107,0 ± 34,7	85,8 ± 7,1	<0,05
Общий хелестерин (мг / дл) (мг / дл)	222,2 ± 26.6	216,6 ± 33,4	0,56
триглицерид (мг / дл)	136,5 ± 53,8	65,1 ± 35,7	<0,01

ДНК было извлечено из образцов фекалий

ДНК было экстрагировано в соответствии с образцами фекалий ранее описанный метод. ⁽¹¹⁾ Образцы фекалий суспендировали в буфере, содержащем 4 М тиоцианата гуанидия, 100 мМ трис-HCl (pH 9,0) и 40 мМ ЭДТА, и взбивали в присутствии шариков из диоксида циркония с использованием прибора FastPrep FP100A (MP Biomedicals, Irvine , Калифорния).После этого ДНК экстрагировали из суспензии, обработанной шариками, используя Magtration System 12GC и GC series Magtration – MagaZorb DNA Common Kit 200 N (Precision System Science, Chiba, Japan). Конечная концентрация образца ДНК была доведена до 10 нг / мкл.

Секвенирование 16S рРНК

Секвенирование 16S рРНК с использованием системы MiSeq ^TM II (Illumina, San Diego, CA) выполняли согласно ранее описанному методу. ⁽¹²⁾ Гипервариабельные области V3 – V4 16S рРНК были амплифицированы с помощью ПЦР из микробной геномной ДНК с использованием следующих универсальных праймеров: 341F, 5′-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACACGACGCTTCTTCCGATCTCCGCAGCAGGAG-AGCGCTCCGCAGGAGGAG; ⁽¹²⁾ 806R, 5′-CAAGCAGAAGACGGCATAGAGATNNNNNNGTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTGGACTACHVGGGTWTCTAAT-3 ‘.⁽¹²⁾ ПЦР-продукты очищали через фильтровальную пластину для ПЦР MultiScreen (Merck Millipore, Дармштадт, Германия). Ампликоны V3 и V4 со штрих-кодом были секвенированы с использованием цикла парных концов, 2 × 250 п.н., в системе MiSeq ^TM II с набором реагентов MiSeq Reagent Kit ver. 2 (500 цикл) химия. Затем полученные последовательности были отобраны и отфильтрованы по качеству и длине. Парное секвенирование с длиной считывания 251 п.н. было объединено вместе с программой fastq-join (http://code.google.com/p/ea-utils/).Для дальнейшего анализа были извлечены только те чтения, которые имели оценку значения качества (QV) ≥20 для более чем 99% последовательности. Набор данных нуклеотидных последовательностей был депонирован в Архиве считывания последовательностей Банка данных ДНК Японии (DDBJ) под номером доступа DRA002295.

Анализ главных компонентов и интеллектуальный анализ данных

Анализ главных компонентов (PCA) выполняли с использованием Metagenome @ KIN (World Fusion, Токио, Япония). Анализ данных был выполнен с использованием программного обеспечения SPSS Clementine14 (IBM Japan, Tokyo, Japan).Система разделения, использующая подход дерева классификации и регрессии (C&RT), который является наиболее типичным методом построения деревьев решений, с использованием коэффициента Джини ⁽¹³⁾ между данными о тучных (или худых) и операционных таксономических единицах (OTU) был применен уровень заказа. Записи были разделены на два подмножества, чтобы записи в каждом подмножестве были более однородными, чем в предыдущем подмножестве.

Таксономический и статистический анализ на основе 16S рДНК

Анализ считываний последовательностей выполняли с помощью инструмента Ribosomal Database Project (RDP) Multiclassifier (http: // rdp.cme.msu.edu/classifier/) ⁽¹⁴⁾ и поиск BLAST с использованием аналитического программного обеспечения Metagenome @ KIN (World Fusion) для базы данных микробной идентификации TechnoSuruga Lab DB-BA9.0 (лаборатория Technosuruga, Сидзуока, Япония). Читки, показывающие ≥97% гомологии, были сгруппированы по каждому таксономическому рангу. Чтобы оценить силу влияния видов бактерий, статистику LogWorth для моделей разделения рассчитывали с использованием статистического программного обеспечения JMP8 (Институт SAS, Кэри, Северная Каролина). Различия между разными образцами были проверены на статистическую значимость ( p <0.05) с использованием t-критерия Стьюдента. Данные анализировали с помощью программного обеспечения Statview 5.0 (SAS).

Результаты

Исходные характеристики 20 субъектов показаны в таблице. Средний индекс массы тела (ИМТ) в группе с ожирением (38,1 ± 3,5 кг / м ²) был значительно выше, чем у худой группы (16,6 ± 1,0 кг / м ²) ( p <0,01). Уровни сахара в крови и триглицеридов натощак также были значительно выше в группе с ожирением, чем в группе худых.

Первоначально мы выполнили секвенирование 16S рРНК образцов кала из групп с ожирением и худой. Среднее значение 20 486 считываний на образец с ожирением было значительно выше, чем в среднем 17 358 считываний на образец без мяса (рис. A). Напротив, индекс разнообразия Шеннона (H ’) был значительно выше в группе худых, чем в группе с ожирением (рис. B). Эти результаты показывают, что микробная структура фекалий у худых людей более сложна, чем у людей с ожирением.

Результаты секвенирования 16S рРНК образцов кала тучных ( n = 10) и худых людей ( n = 10).(A) Среднее число прочтений. Среднее количество прочтений на одного тучного человека было значительно выше, чем среднее число прочтений на худощавого. (** p <0,01). (B) Индекс разнообразия Шеннона. Среднее значение индекса разнообразия Шеннона было значительно выше у худых людей, чем у людей с ожирением (** p <0,01). Данные выражены как среднее ± стандартное отклонение ( n = 10).

На основе базы данных RDP все последовательности были классифицированы от типа к виду. На уровне филума Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria и Actinobacteria доминировали как в группах с ожирением, так и в группах худых.Типы Firmicutes и Fusobacteria были значительно более многочисленными в группе с ожирением, чем в группе худых (Firmicutes: 42,6 ± 8,5% в группе с ожирением против 35,1 ± 5,2% в группе худых, p = 0,018) (рис.). В частности, тип Fusobacterium был обнаружен только у людей с ожирением (1,86 ± 4,20% у страдающих ожирением против 0,00 ± 0,00% у худых, p = 0,002). Предыдущие исследования продемонстрировали увеличение уровня Bacteroidetes у худых людей по сравнению с людьми с ожирением, ⁽⁶⁾, но мы не смогли обнаружить такую разницу в наших выборках (31.2 ± 14,1% среди страдающих ожирением против 32,9 ± 6,4% среди худых, p = 0,38). Кроме того, не было значительной разницы в соотношении Bacteroidetes / Firmicutes между людьми с ожирением (0,86 ± 0,63) и худощавыми людьми (0,96 ± 0,27).

Микробный состав кишечника тучных и худых людей (уровень филума). * p <0,05, ** p <0,01.

Анализ главных компонентов (PCA) на уровне филума показал различное распределение тучных и худых людей (рис.), Предполагая наличие разницы потенциалов между тучной и тощей микробной структурой.Интеллектуальный анализ данных был использован для создания дерева решений, которое является путем поддержки принятия решений (рис.). Узел 0 (начальная точка для построения дерева) был разделен на Узел 1 и Узел 2 по порядковому номеру чтения Clostridiales с пороговым значением 5617. Шесть из 10 тучных людей были выборочно отнесены к Узлу 2 ( Clostridiales) читает число 5617 фунтов стерлингов), а 10 худощавых и 4 тучных человека были отнесены к узлу 1 ( Clostridiales читают число ≤5 617). Узел 1 был дополнительно разделен на Узлы 3, 5 и 6.Все худощавые люди были отнесены к узлу 6, который характеризовался числом чтения порядка Bacteroidales > 2,667. Эти результаты показывают, что на уровне порядка микробное сообщество людей с ожирением характеризуется более высоким уровнем Clostridiales , а у худощавых людей — более высоким уровнем Bacteroidales .

Анализ главных компонентов (PCA) на уровне филума между тучными и худыми людьми. СПС на основе ПК1 (доля вклада 59.3%) и PC2 (доля вклада 23,1%) показали различное распределение людей с ожирением и худых.

Дерево решений, построенное с использованием подхода дерева классификации и регрессии (C&RT). Значение отсечения для создания каждого узла рассчитывалось из числа считанных данных последовательности на уровне заказа с использованием коэффициента Джини и метода C&RT. Подобные шаги были повторены для построения дерева решений. Узел 0 — это начальная точка для построения дерева, а конечный узел — это тот, который не может быть далее разделен.Детали, относящиеся к пути, ведущему к конечному узлу, четко указывают задействованные заказы и их относительные количества, которые способствуют созданию тематических групп.

На уровне родов полученные последовательности были отнесены к 105 родам, в которых численно преобладали Bacteroides , Blautia , Bifidobacterium , Eubacterium , Faecalibacterium , Prevotella и 39 Veill Стол ).Роды Alistipes , Anaerococcus , Corpococcus , Fusobacterium и Parvimonas значительно увеличились у тучных людей по сравнению с худыми людьми. Напротив, роды Bacteroides , Desulfovibrio , Faecalibacterium , Lachnoanaerobaculum и Olsenella значительно увеличились у худых людей по сравнению с людьми с ожирением.

Таблица 2

Различия в составе бактерий между тучными и худыми людьми (уровень рода)

Увеличивается у людей с ожирением 9326 93267 91.109 7 9327 9326 91.109 9326 21326 9326 9326 9326 9326 9326 91.10

Род	Ожирение (%)	Постное (%)	p Значение
9137

Алистипес	2.20	0,50	0,04
Анаэрококк	0,01	0,00		0,10
Butyricimonas	0,01	0,00	0,10
Campylobacter	0.05	0,00	0,08
Coprococcus	0,03	0,28	0,03	0,03

91,109
91.103	Eubacterium	1,86	0,00	0,10
Fusobacterium	0.01	0,00	0,03
Холдемания	0,03	0,00	0,10
0,01
Raoultella	0,01	0,00	0,09
Shigella	0.00	0,00	0,06
Solobacterium	0,54	1,26	0,06
Turicibacter	2,54
Allisonella	0,00	0,02	0,08
Бактероиды	0.08	0,20	0,05
Бифидобактерии	0,00	0,01	0,11
7
7
7	0,00	0,00	0,08
Corynebacterium	0,03	0,34	0.06
Десульфовибрио	0,02	0,10	0,05
Enterococcus 7


0,00	0,02	0,04
Finegoldia	0.00	0,10	0,03
Ховарделла	0,00	0,00	0,10

0,05
Olsenella	0,34	1,15	0.03
Субдолигранулум	0,00	0,00	0,04
Sutterella
Sutterella 9326	0,03	0,00	0,09

На уровне видов полученные последовательности были отнесены к 345 видам.В таблице показаны виды бактерий, количество которых значительно увеличилось у людей с ожирением по сравнению с худощавыми людьми. К ним относятся Acidaminococcus Кишечник , Actinomyces meyeri , Atopobium parvulum , Bacteroides vulgatus , Eubacterium hadrum , Klebsiella pneumoniae и Roseburia faecis . Род Fusobacterium (F.) , включая Faecalibacterium (F.) mortiferum , F. nucleatum и F.varium увеличивалось у людей с ожирением, но разница была незначительной.

Таблица 3

Увеличение количества видов бактерий у людей с ожирением

327 0,6000 9326 9327 0,6000 9326 9326 9326

Виды

Ожирение (%)

Постное (%)

p Значение

oc8oc7 Acid 1.851

0.102

0,013

Actinomyces meyeri

0.018

0,009

0,039

Атопобиум парвулум

0,006

0,001

0,002

0,099

Bacteroides finegoldii

0,282

0,044

0,076

Bacteroides ovatus

1.886

0,546

0,097

Bacteroides vulgatus

10,586

2.456

0,023326

0,02339

Clostridium butyricum

0,005

0,000

0,172

Clostridium difficile

0.007

0,000

0,130

Clostridium nexile

0,171

0,006

0,081

Приходит копрококк

0,6000

0,99

2,157

0,438

0,050

Eubacterium infirmum

0.001

0,000

0,086

Fusobacterium mortiferum

1,376

0,002

0,107

Fusobacterium nucleatum6 9321

Fusobacterium nucleatum 7 9132 0 9326 9132 0 9326

0,047

0,001

0,157

Gemella haemolysans

0.008

0,001

0,020

Granulicatella adiacens

0,012

0,005

0,076

0,003

0,042

Lactococcus garvieae

0.000

0,004

0,088

Пептострептококк стоматит

0,007

0,000

0,00739

0,00739 91udore 91

Roseburia faecis

0,881

0,324

0.026

Rothia mucilaginosa

0,007

0,001

0,049

Ravuminoc40

9325 9325 9326 показаны виды бактерий, количество которых увеличилось у худых людей по сравнению с людьми с ожирением. Clostridium ramosum , Clostridium citroniae , Faecalibacterium prausnitzii , Eubacterium desmolans , Eubacterium fissicatena и Holdemania filiformis у худых людей по сравнению с людьми с ожирением <0 p.05). Bilophila wadsworthia имела тенденцию к увеличению у худых людей, но разница была незначительной.
Таблица 4
Увеличение количества видов бактерий у худых людей
9326 9326 9326 9326 9326 9326 9326 9326 9326 9326 0,002 Parabacteroides distasonis В этом исследовании мы проанализировали фекальное микробное сообщество тучных и худых людей в популяции Японии. Япония — островное государство, а японцы — единая этническая группа.Кроме того, в этой стране развивалась и сохраняется самобытная культура питания. Таким образом, ожидается появление уникального микробного сообщества кишечника в популяции Японии. Действительно, Накаяма et al. ⁽¹⁵⁾ недавно сообщил о специфическом фекальном микробном сообществе у японских детей, которое состоит из более Bifidobacterium и меньшего количества потенциально патогенных бактерий по сравнению с микробными сообществами детей в других азиатских странах. Предыдущие исследования кишечной микробиоты, связанной с ожирением, в основном были нацелены на людей, живущих в западных странах, но обширных исследований среди населения Японии не проводилось.Чтобы понять влияние определенных пищевых привычек и этнической принадлежности на микробный состав кишечника, было бы полезно охарактеризовать кишечные микробные сообщества японского населения, связанные с ожирением и худой.
В этом исследовании мы продемонстрировали, что микробное сообщество японцев с ожирением характеризовалось меньшим разнообразием и повышенной численностью типов Firmicutes и Fusobacteria по сравнению с микробами худощавых людей. Уменьшение разнообразия и увеличение численности филума Firmicutes у тучных людей соответствовало предыдущим исследованиям в западных популяциях.^(6,16,17) С другой стороны, значение типа Bacteroidetes в кишечной микробиоте, связанной с ожирением, еще предстоит обсудить. Несколько исследований подтвердили уменьшение филума Bacteroidetes у лиц с ожирением и моделей на животных, ^(7,18–21), но другие не сообщали о каких-либо различиях между субъектами с ожирением и худыми или даже не обнаружили противоположную взаимосвязь. ^(22,23) В этом исследовании мы не смогли обнаружить значительных различий в типе Bacteroidetes.Итак, мы дополнительно исследовали микробную структуру на уровне заказа, используя анализ интеллектуального анализа данных. Интеллектуальный анализ данных был использован для создания дерева решений, как показано на рис. 4, в котором четко разделены тучные и худощавые люди. Шесть из 10 человек с ожирением были отнесены к узлу 2, который характеризуется более высокой численностью порядка Clostridiales . Напротив, все худощавые люди были отнесены к узлу 6, который характеризуется более высокой численностью порядка Bacteroidales .Таким образом, стало очевидным преобладание порядка Bacteroidales у худых японцев, хотя окончательных выводов на уровне филума не было.
Короткоцепочечные жирные кислоты (SCFA: ацетат, пропионат и бутират) образуются в результате ферментации пищевых волокон микробиотой кишечника. ⁽²⁴⁾ Бактериальные SCFAs обеспечивают 10% от общего количества диетической энергии у людей, ⁽²⁴⁾ и уровни SCFA в кале значительно повышаются у тучных людей по сравнению с худыми людьми.⁽²²⁾ И тип Firmicutes, и Bacteroidetes вносят вклад в образование SCFA. Известно, что изменение микробного состава кишечника влияет на изменения концентрации SCFA, ⁽²⁵⁾ и более высокое соотношение Firmicutes / Bacteroidetes связано с ожирением за счет увеличения образования SCFA. ^(7,18,19) Однако в этом исследовании мы не обнаружили существенной разницы в соотношении Firmicutes / Bacteroides между тучными и худыми людьми, хотя более высокая доля типа Firmicutes была подтверждена у тучных людей.О подобных отрицательных результатах сообщалось ранее, ^(22,23) и Murphy et al. ⁽²⁶⁾ сообщил, что изменения пропорций основных типов не связаны с концентрацией SCFA и накоплением энергии. Эти результаты предполагают, что связь между микробным составом кишечника, накоплением энергии, связанной с SCFA, и ожирением может быть сложной и потребовать дальнейших обширных исследований в будущем.
Новым открытием в этом исследовании стало увеличение численности филума Fusobacteria у людей с ожирением.Этот вывод был также подтвержден на уровне родов и видов. Уровни F. infirmum , F. nucleatum и F. varium были выше у тучных людей, чем у худощавых людей, хотя разница была незначительной. Тип Fusobacteria вызывает воспалительную реакцию хозяина и обладает характеристиками вирулентности, которые способствуют их адгезии к эпителиальным клеткам хозяина и их способности проникать в эпителиальные клетки. ⁽²⁷⁾ Недавние исследования были сосредоточены на ассоциации типа Fusobacteria с колоректальным раком, ^(27,28) и F.Nucleatum , как было показано, усиливает онкогенез кишечника путем модуляции передачи сигналов β-катенина. ⁽²⁸⁾ F. varium , как сообщается, также связан с патофизиологией язвенного колита. ⁽²⁹⁾ Однако связь между типом Fusobacteria и ожирением ранее не описывалась. Наши результаты не предполагают причинно-следственной связи между типом Fusobacteria и ожирением, но предполагают, что микробное сообщество кишечных микробов, ассоциированное с ожирением, у японского населения может иметь другой состав, чем у жителей Запада.Точная роль типа Fusobacteria в ожирении должна быть исследована в будущем.
Одним из механизмов, с помощью которого кишечная микробиота влияет на ожирение, является индукция системного воспаления слабой степени. ⁽³⁰⁾ Микробиота кишечника увеличивает проницаемость слизистой оболочки у мышей с ожирением, тем самым способствуя транслокации бактериальных продуктов (например, липополисахарида) и стимулируя воспаление слабой степени, характерное для ожирения. ⁽³⁰⁾ Итак, виды бактерий, которые в изобилии присутствуют в микробиоте постного мяса и обладают противовоспалительными свойствами, могут оказывать защитное действие на ожирение.Один из таких видов бактерий, Faecalibacterium (F.) prausnitzii , обладает сильной противовоспалительной активностью за счет продукции бутирата и индукции регуляторных Т-клеток, ^(31–33), и, как сообщается, отрицательно коррелирует с маркерами воспаления при ожирении. предметы. ^(34,35) В этом исследовании мы фактически наблюдали значительное увеличение численности F. prausnitzii у худых людей по сравнению с тучными людьми. Эти результаты предполагают, что F.prausnitzii может играть защитную роль против ожирения за счет своего противовоспалительного действия. Напротив, мы наблюдали, что численность филума Fusobacteria и Bacteroides (B.) vulgatus значительно увеличилась у тучных людей по сравнению с худыми людьми. Типы Fusobacteria и B. vulgatus могут играть причинную роль в ожирении, поскольку в предыдущих исследованиях сообщалось о провоспалительных свойствах этих бактерий ^(27,36) и положительной корреляции между численностью B.vulgatus и ИМТ. ⁽³⁷⁾ Таким образом, вполне вероятно, что баланс воспалительных и противовоспалительных бактерий может быть одним из факторов, влияющих на развитие ожирения.
В заключение мы обнаружили, что кишечная микробиота, связанная с ожирением, у японцев несколько отличается от таковой у жителей Запада. У японцев не было обнаружено уменьшения филума Bacteroidetes и уменьшения соотношения Firmicutes / Bacterodetes. Мы впервые обнаружили увеличение количества фузобактерий у тучных людей.Различия между японским и западным населением могут быть вызваны множеством факторов (например, диетическими привычками, гигиеной и генетикой).
Благодарности
Авторы выражают признательность компании TechnoSuruga Laboratory Co., Ltd. (Сизуока, Япония) за техническую поддержку. Это исследование было частично поддержано грантом на научные исследования от Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий Японии (15K08967), грантом на трудноизлечимые заболевания от Министерства здравоохранения, труда и социального обеспечения. Японии, и грант Фонда исследований курения.Это исследование было частично поддержано MSD Co., Ltd. (Токио, Япония).
Конфликт интересов
О потенциальных конфликтах интересов не сообщалось.
Ссылки
1. Kassebaum NJ, Bertozzi-Villa A, Coggeshall MS, et al. Глобальный, региональный и национальный уровни и причины материнской смертности в 1990–2013 гг .: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней 2013 г. Lancet. 2014; 384: 980–1004. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 2. Стивенс Г.А., Сингх Г.М., Лу И и др.Национальные, региональные и глобальные тенденции распространенности избыточной массы тела и ожирения среди взрослых. Popul Health Metr. 2012; 10:22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. Nieuwdorp M, Gilijamse PW, Pai N, Kaplan LM. Роль микробиома в регуляции энергии и метаболизме. Гастроэнтерология. 2014; 146: 1525–1533. [PubMed] [Google Scholar] 4. Лим С.С., Вос Т., Флаксман А.Д., Данаи Г. и др. Сравнительная оценка риска бремени болезней и травм, связанного с 67 факторами риска и кластерами факторов риска в 21 регионе, 1990–2010 годы: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней 2010 года.Ланцет. 2012; 380: 2224–2260. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5. Раутава С., Луото Р., Салминен С., Изолаури Э. Контакт с микробами во время беременности, кишечной колонизации и болезней человека. Нат Рев Гастроэнтерол Гепатол. 2012; 9: 565–576. [PubMed] [Google Scholar] 6. Ley RE, Turnbaugh PJ, Klein S, Gordon JI. Микробная экология: микробы кишечника человека, связанные с ожирением. Природа. 2006; 444: 1022–1023. [PubMed] [Google Scholar] 7. Turnbaugh PJ, Ley RE, Mahowald MA, Magrini V, Mardis ER, Gordon JI.Микробиом кишечника, связанный с ожирением, с повышенной способностью собирать энергию. Природа. 2006; 444: 1027–1031. [PubMed] [Google Scholar] 8. Бэкхед Ф., Манчестер Дж. К., Семенкович К. Ф., Гордон Дж. Механизмы, лежащие в основе устойчивости к ожирению, вызванному диетой, у стерильных мышей. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2007; 104: 979–984. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 9. Сасаки А., Вакабаяси Г., Ёнэй Ю.Дж. Текущее состояние бариатрической хирургии в Японии и ее эффективность при ожирении и диабете. J Gastroenterol.2014; 49: 57–63. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Де Филиппо С., Кавальери Д., Ди Паола М. и др. Влияние диеты на формирование микробиоты кишечника выявлено в сравнительном исследовании у детей из Европы и сельских районов Африки. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2010; 107: 14691–14696. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Фудзимото Т., Имаеда Х., Такахаши К. и др. Снижение численности Faecalibacterium prausnitzii в микробиоте кишечника при болезни Крона. J Gastroenterol Hepatol. 2013; 28: 613–619.[PubMed] [Google Scholar] 12. Такахаши С., Томита Дж., Нисиока К., Хисада Т., Нисидзима М. Разработка прокариотического универсального праймера для одновременного анализа бактерий и архей с использованием секвенирования следующего поколения. PLoS One. 2014; 9: e105592. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Блэр Ю.И., МакМахон А.Д., Макферсон Л.М. Сравнение и относительная полезность измерений неравенства: применительно к стоматологическому здоровью детей в Шотландии. PLoS One. 2013; 8: e58593. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14.Ван Кью, генеральный менеджер Гаррити, Тидже Дж.М., Коул-младший. Наивный байесовский классификатор для быстрого отнесения последовательностей рРНК к новой бактериальной таксономии. Appl Environ Microbiol. 2007. 73: 5261–5267. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Секи Ю., Какизаки С., Хоригучи Н. и др. Распространенность неалкогольного стеатогепатита у японских пациентов с патологическим ожирением, перенесших бариатрическую операцию J Gastroenterol 2005. DOI: 10.1007 / s00535-015-1114-8 [PubMed] [Google Scholar] 18. Армугом Ф., Генри М., Виалеттес Б., Ракка Д., Рауль Д.Мониторинг бактериального сообщества микробиоты кишечника человека показывает увеличение содержания Lactobacillus у пациентов с ожирением и метаногенов у пациентов с анорексией. PLoS One. 2009; 4: e7125. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 19. Santacruz A, Collado MC, García-Valdés L, et al. Состав кишечной микробиоты у беременных связан с массой тела, набором веса и биохимическими параметрами. Br J Nutr. 2010; 104: 83–92. [PubMed] [Google Scholar] 20. Goldsmith JR, Sartor RB. Роль диеты в метаболизме кишечной микробиоты: последующее влияние на иммунную функцию и здоровье хозяина, а также терапевтические последствия.J Gastroenterol. 2014; 49: 785–798. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Тайра Т., Ямагути С., Такахаши А. и др. Диетические полифенолы увеличивают содержание муцина в кале и иммуноглобулина А и уменьшают нарушение микробиоты кишечника, вызванное диетой с высоким содержанием жиров. J Clin Biochem Nutr. 2015; 57: 212–216. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 22. Швирц А., Тарас Д., Шефер К. и др. Микробиота и SCFA у здоровых людей с худым и избыточным весом. Ожирение (Серебряная весна) 2010; 18: 190–195. [PubMed] [Google Scholar] 23.Дункан Ш., Лобли Дж. Э., Холтроп Дж. И др. Микробиота толстой кишки человека связана с диетой, ожирением и потерей веса. J Int J Obes (Лондон), 2008; 32: 1720–1724. [PubMed] [Google Scholar] 24. Кларк С.Ф., Мерфи Е.Ф., Нилавира К. и др. Микробиота кишечника и ее связь с диетой и ожирением: новые идеи. Кишечные микробы. 2012; 3: 186–202. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25. Дункан С.Х., Беленгер А., Холтроп Дж., Джонстон А.М., Флинт Г.Дж., Лобли Г.Е. Снижение потребления углеводов с пищей у людей с ожирением приводит к снижению концентрации бутирата и бутират-продуцирующих бактерий в фекалиях.Appl Environ Microbiol. 2007. 73: 1073–1078. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Мерфи Э. Ф., Коттер П. Д., Хили С. и др. Состав и способность собирать энергию микробиоты кишечника: связь с диетой, ожирением и временем на моделях мышей. Кишечник. 2010; 59: 1635–1642. [PubMed] [Google Scholar] 27. Костич А.Д., Геверс Д., Педамаллу С.С. и др. Геномный анализ идентифицирует ассоциацию Fusobacterium с колоректальной карциномой. Genome Res. 2012; 22: 292–298. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28.Yu J, Feng Q, Wong SH и др. Метагеномный анализ фекального микробиома как инструмент нацеленных неинвазивных биомаркеров колоректального рака кишечника, 2015. DOI: 10.1136 / gutjnl-2015-309800 [PubMed] [Google Scholar] 29. Окуса Т., Сато Н., Огихара Т., Морита К., Огава М., Окаясу И. Fusobacterium varium , локализованный в слизистой оболочке толстой кишки пациентов с язвенным колитом, стимулирует видоспецифические антитела. J Gastroenterol Hepatol. 2002; 17: 849–853. [PubMed] [Google Scholar] 30. Вердам Ф. Дж., Фуэнтес С., де Йонге К.Состав кишечной микробиоты человека связан с местным и системным воспалением при ожирении. Ожирение (Серебряная весна) 2013; 21: E607 – E615. [PubMed] [Google Scholar] 31. Сокол Х., Пиньер Б., Ваттерлот Л. и др. Faecalibacterium prausnitzii — это противовоспалительная комменсальная бактерия, идентифицированная анализом кишечной микробиоты пациентов с болезнью Крона. Proc Natl Acad Sci U S. A. 2008; 105: 16731–16736. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32. Атараси К., Тануэ Т., Осима К. и др.Индукция Treg рационально подобранной смесью штаммов Clostridia из микробиоты человека. Природа. 2013; 500: 232–236. [PubMed] [Google Scholar] 33. Фурусава Ю., Обата Ю., Фукуда С. и др. Бутират комменсального микроба индуцирует дифференцировку регуляторных Т-клеток толстой кишки. Природа. 2013; 504: 446–450. [PubMed] [Google Scholar] 34. Furet JP, Kong LC, Tap J и др. Дифференциальная адаптация микробиоты кишечника человека к потере веса, вызванной бариатрической хирургией: связь с метаболическими маркерами и маркерами воспаления низкой степени.Диабет. 2010. 59: 3049–3057. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Шихан Д., Моран С., Шанахан Ф. Микробиота при воспалительном заболевании кишечника. J Gastroenterol. 2015; 50: 495–507. [PubMed] [Google Scholar] 36. Ramanan D, Tang MS, Bowcutt R, Loke P, Cadwell K. Бактериальный датчик Nod2 предотвращает воспаление тонкой кишки, ограничивая распространение комменсала Bacteroides vulgatus . Иммунитет. 2014; 41: 311–324. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 37. Игнасио А., Фернандес М.Р., Родригес В.А. и др.Корреляция между индексом массы тела и фекальной микробиотой у детей Clin Microbiol Infect 2015. DOI: 10.1016 / j.cmi.2015.10.031 [PubMed] [Google Scholar]
Dysosmobacter welbionis — недавно выделенная комменсальная бактерия человека, предотвращающая ожирение и метаболизм, вызванное диетой. расстройства у мышей
Введение
Вариации состава и функциональности кишечной микробиоты влияют на физиологию хозяина, влияя на метаболизм, иммунитет, старение и поведение.1 2 Кишечная микробиота в основном изучается независимыми от культуры методами, основанными на секвенировании фекальной ДНК. такие как секвенирование гена 16S рРНК или метагеномное секвенирование.Эти наблюдательные исследования предоставляют первоначальные доказательства связи между составом и / или функциональностью кишечной микробиоты и патофизиологией хозяина.3–5 Тем не менее, переход от ассоциации к причинно-следственной связи для конкретных таксонов требует выращивания представляющих интерес бактерий в чистой культуре. Несмотря на широкомасштабные усилия по выращиванию ранее некультивируемых прокариотических представителей кишечной микробиоты человека, 6–10 недавних оценок показывают, что она включает по крайней мере 4664 вида, из которых только 1332 имеют культивируемых представителей.7 Более того, влияние определенных видов на развитие ожирения и связанных с ними метаболических нарушений было продемонстрировано только для небольшого числа видов. Например, было показано, что колонизация стерильных мышей штаммом Enterobacter cloacae усугубляет ожирение и инсулинорезистентность на диете с высоким содержанием жиров (HFD) 11, а добавление мышей, выращенных традиционным способом, с помощью Bilophila wadsworthia усугубляет непереносимость глюкозы и стеатоз печени на HFD без влияния на массу тела.12 И наоборот, наблюдалось положительное влияние других бактерий: введение Anaerobutyricum soehngenii (ранее обозначенного как Eubacterium hallii штамм L2-7) мышам с генетическим ожирением / диабетом увеличивало расход энергии и уменьшало ожирение.13 У людей Введение A. soehngenii связано с улучшением периферической чувствительности к инсулину14. Колонизация стерильных мышей микробиотой тучного человека с низким уровнем Christensenellaceae с поправкой Christensella minuta снижает ожирение у мышей-реципиентов.15 В 2013 году мы показали, что Akkermansia muciniphila противодействует ожирению, вызванному диетой, и связанным с ним расстройствам, таким как непереносимость глюкозы, инсулинорезистентность и стеатоз печени у грызунов.16 Позже мы продемонстрировали, что жизнеспособность бактерий не требуется для поддержания ее здоровья. Свойства, пастеризованный A. muciniphila был так же эффективен, как и живые бактерии.17 Примечательно, что мы продемонстрировали, что A. muciniphila также был полезен при введении людям с избыточным весом и ожирением.18 Вышеупомянутые примеры показывают, что корреляции между численностью конкретных бактерий в человеческих когортах19 с клиническими переменными затем могут быть успешно переведены на положительный или вредный эффект в моделях на животных. Тем не менее от корреляции нужно перейти к причинности. Действительно, мы обнаружили, что Subdoligranulum spp сильно коррелировал с A. muciniphila и метаболическим здоровьем или увеличивался при вмешательстве пищевых волокон или введении метформина во многих когортах людей.20 Однако лечение мышей с помощью Subdoligranulum variabile не улучшило метаболических нарушений, вызванных диетой, 20 тем самым усилив настоятельную необходимость напрямую оспорить реальную физиологическую значимость корреляционных наблюдений.
Мы недавно выделили и описали новый вид Ruminococcaceae : Dysosmobacter welbionis ,21 Эта бактерия тесно связана с еще не культивированным видом, который постоянно ассоциируется с худобой: Oscillospira guillermondii .22 В настоящем исследовании мы стремились выяснить, влияет ли D. welbionis на метаболическое здоровье хозяина. Во-первых, мы измерили относительную численность и распространенность D. welbionis в фекальной микробиоте населения в целом, используя несколько когорт (например, проект по микробиому человека (HMP), Американский проект кишечника (AGP), проект Flemish Gut Flora Project (FGFP). и Microbes4U) 18. 23–26. Мы обнаружили, что численность D. welbionis отрицательно коррелирует с индексом массы тела (ИМТ) и гликемией натощак.Затем мы показали, что добавление D. welbionis штамма J115 ^T мышам, получавшим HFD, снижает массу тела и прирост жировой массы. Это было связано с улучшенным гомеостазом глюкозы и повышенным термогенезом без дрожи, в сочетании с большим количеством митохондрий в коричневой жировой ткани (BAT).
Результаты
Распространенность и численность
D. welbionis в микробиоте человека
Недавно мы выделили новый вид из стула человека, который принадлежит к семейству Ruminococcaceae , который мы назвали D.welbionis .21 Это первый вид, выделенный из этого нового рода.21 Помимо таксономического интереса описания нового рода и вида, выясняется, что D. welbionis тесно связан с несколькими таксонами, связанными с более низкой массой тела. Действительно, D. welbionis имеет 92% сходства последовательностей гена 16S рРНК с некультивируемыми видами O. guillermondii , что неоднократно ассоциировалось с худобой в исследованиях на людях, основанных на секвенировании фекальной микробиоты.22 Кроме того, род Anaerotruncus , также принадлежащий к семейству Ruminococcaceae , также отрицательно коррелирует с массой тела свиней и людей27. расшифровать связь между изобилием Dysosmobacter в кишечной микробиоте и здоровьем хозяина.
Сначала мы исследовали, присутствует ли D. welbionis в общей популяции.С этой целью мы использовали несколько независимых когорт, таких как HMP, 25, AGP23 24 и FGFP.26 На основании последовательности гена 16S рРНК D. welbionis J115 ^T, этот вариант последовательности имел распространенность 62,7%. и диапазон относительной численности от 0% до 3,9% в когорте HMP (n = 161). Для когорты AGP (n = 9511) распространенность составила 69,8% с диапазоном относительной численности от 0% до 9,2%. Наконец, вариант последовательности был обнаружен у 65,9% особей поперечного FGFP (n = 2259) с относительной численностью в диапазоне от 0% до 0.9%.
Мы дополнительно исследовали, коррелировала ли эта бактерия с ИМТ у субъектов с ожирением или какими-либо конкретными метаболическими маркерами, используя ранее набранную когорту из 53 недиабетических, инсулинорезистентных и страдающих избыточным весом или страдающих ожирением людей: когорта Microbes4U.18 Используя Dysosmobacter рода -специфические праймеры, мы количественно определили его в фекальной ДНК когорты Microbes4U. Dysosmobacter spp был обнаружен в стуле всех людей и варьировался от 0,00035% до 2.7% от общей микробиоты в среднем 0,75%, что соответствует диапазону от 1,7 × 10 ⁵ до 2,0 × 10 ⁹ в среднем 5,9 × 10 ⁸ бактерий на грамм стула (рисунок 1) .
Рисунок 1
Dysosmobacter spp отрицательно коррелирует с ИМТ у людей. (A) Корреляционная матрица Пирсона между численностью Dysosmobacter spp в фекальной микробиоте и клиническими переменными в когорте Microbes4U. * Р <0,05. (B) Относительное количество Dysosmobacter spp в фекальной микробиоте когорты людей с избыточным весом и ожирением.(C) Концентрация Dysosmobacter spp в образцах стула из когорты людей с избыточным весом и ожирением. (D) Корреляция Пирсона между относительной численностью Dysosmobacter spp и ИМТ. (E) Корреляция Пирсона между абсолютной концентрацией Dysosmobacter spp и ИМТ. (F) Корреляция Пирсона между концентрацией Dysosmobacter spp и уровнем глюкозы в крови натощак. (G) Корреляция Пирсона между Dysosmobacter spp. и гликированный гемоглобин.Результаты представлены в виде точечных графиков со средним значением для частей фигуры B, C. ИМТ, индекс массы тела; HbA1c, гликированный гемоглобин.
Интересно, что в когорте Microbes4U относительная и абсолютная численность Dysosmobacter spp отрицательно коррелировала с ИМТ, тогда как абсолютная численность Dysosmobacter spp отрицательно коррелировала с глюкозой натощак и гликозилированным гемоглобином (HbA1c) -G (рисунок 1A, D-G). , онлайн-дополнительная таблица S1). Это говорит о том, что род Dysosmobacter может защищать от ожирения и связанных с ожирением изменений метаболизма глюкозы.
D. welbionis J115 ^T предотвращает вызванное диетой ожирение у мышей
В первом эксперименте мы обнаружили, что мышей, получавших корм с высоким содержанием жиров (HFD), ежедневно и свежеприготовленными живыми животными D. welbionis через зонд. J115 ^T (1,0 × 10 ⁹ культивируемых живых бактерий в день на одну мышь) в течение 6 недель (группа HFD J115-fresh) снижал индуцированный HFD прирост массы на 29% (т. Е. На 1,5 грамма) (рисунок 2A). ). Затем мы исследовали, насколько жизнеспособность D.welbionis J115 ^T оказал влияние на его эффекты против ожирения. Уничтожение D. welbionis J115 ^T с использованием пастеризации (30 мин при 70 ° C) полностью устранило его благотворное влияние как на массу тела, так и на прирост жировой массы (рис. 2B, C). Затем мы проверили, может ли лечение мышей живыми животными D. welbionis J115 ^T в течение более длительного периода времени (например, 13 недель) поддерживать его положительные эффекты. Мы обнаружили, что живой D. welbionis J115 ^T остается активным при замораживании в трегалозе (1.0 × 10 ⁹ культивируемых живых бактерий в день на одну мышь) и значительно снизили индуцированный HFD набор веса и увеличение жировой массы по сравнению с мышами, получавшими HFD, после 13 недель лечения (фигура 2D, E). Это соответствовало значительному снижению веса брыжеечных, подкожных (паховых) и эпидидимальных жировых отложений (рис. 2F). Никакого влияния на вес нескольких мышц мышей не наблюдалось (онлайн-дополнительный рисунок S1). Стоит отметить, что лечение мышей дозой ниже, чем 1,0 × 10 ⁹ живых бактерий (т.е. 10 ⁸), не имело положительных эффектов (онлайн-дополнительный рисунок S2).
Рисунок 2
Live Dysosmobacter welbionis J115 ^T предотвращает ожирение, вызванное диетой, у мышей без значительных изменений состава фекальной микробиоты. (a) Прирост массы тела мышей, получавших HFD и получавших в течение 6 недель ежедневным пероральным зондом 1,0 × 10 ⁹ колониеобразующих единиц (cfus) свежеприготовленного D. welbionis J115 ^T (HFD J115-fresh ) и мышей, получавших контрольную диету или диету с высоким содержанием жиров (HFD) и леченных ежедневным пероральным зондом с наполнителем.(B, C) Прирост массы тела и жировой массы мышей, получавших в течение 10 недель ежедневное введение через желудочный зонд живыми D. welbionis J115 ^T, замороженными в трегалозе (1,0 × 10 ⁹ культивируемых живых бактерий в день и на 1 день). мышь) и скармливали HFD (HFD Live J115) или пастеризовали D. welbionis J115 ^T (пастеризованный HFD J115) (1,0 × 10 ⁹ термоубитых бактерий в день на мышь), а мышей кормили HFD и лечится ежедневным пероральным зондом с носителем. (D, E) Масса тела и жировая масса мышей, получавших в течение 13 недель ежедневный пероральный желудочный зонд, живые D.welbionis J115 ^T, замороженный в трегалозе (1,0 × 10 ⁹ для культивирования, живых бактерий в день на одну мышь) и скармливаемых HFD (HFD Live J115), и мышей, получавших контрольную диету или HFD и леченных ежедневным пероральным зондом с автомобилем. (F) Вес брыжеечных, подкожных (паховых) и эпидидимальных жировых подушечек в конце 13-недельного периода. (G) Анализ основных координат состава микробиоты в эксперименте 2. Микробиота мышей была сгруппирована, и центр тяжести вычислен для каждой группы.(H) Относительная численность родов бактерий, значительно измененная HFD или обработкой живыми D. welbionis J115 ^T. (I) Кладограмма, представляющая микробиоту мышей с белыми маркерами клады, выделяющими группы бактерий, значительно более многочисленными у контрольных мышей, чем у мышей HFD, маркеры черной клады, маркеры, выделяющие группы бактерий, значительно более распространенные у мышей HFD, чем у контрольных мышей, и голубые маркеры клады, выделяющие группы бактерий значительно увеличен (кружок) или уменьшен (квадрат) на живом D.welbionis J115 ^T мышам, получавшим HFD, как оценивается по части рисунка H. (J) Концентрация Dysosmobacter spp, оцениваемая с помощью количественной ПЦР в содержимом слепой кишки мышей. Количество мышей в группе: 10–12. Данные были проанализированы с использованием одностороннего дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для частей фигуры A, F и J и двусторонним дисперсионным анализом с повторными измерениями для частей фигуры B – E. Данные были проанализированы с использованием критерия Краскела-Уоллиса с последующей процедурой попарного множественного сравнения Данна для H – I.* q <0,05; ** q <0,01; *** q <0,001. Результаты представлены в виде точечных и столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей фигуры A, F и J, а также в виде прямоугольников и усов (первый квартиль, медиана и третий квартиль) для части фигуры H. В частях фигуры B – E * q < 0,05; ** q <0,01; *** q <0,001 для сравнений HFD и HFD Live J115 и ¤¤¤q <0,001 для сравнений контроля и HFD. В части рисунка C # p = 0,06. HFD, диета с высоким содержанием жиров.
D. welbionis J115 ^{Добавка T} оказывает незначительное влияние на состав кишечной микробиоты мышей
Изучить, является ли защита от увеличения веса, вызванного HFD, прямым эффектом D.welbionis J115 ^T или результат ремоделирования экосистемы кишечной микробиоты, мы проанализировали состав микробиоты слепой кишки мышей путем секвенирования ампликона гена 16S рРНК. Анализ основных координат, основанный на обобщенной матрице несходства UniFrac, показал, что HFD сильно повлиял на общий состав экосистемы. Микробиота мышей HFD и мышей HFD, которые получали живые D. welbionis , была очень похожей (рисунок 2G). Индексы богатства, альфа-разнообразия Симпсона и Шеннона были одинаковыми между тремя группами (онлайн-дополнительный рисунок S3).Мы обнаружили, что 31 операционная таксономическая единица (OTU) имела значительно разную относительную численность между двумя или более группами мышей (рис. 2H, I).
Семейство Bacteroidaceae , а также Alistipes , Ruminoclostridium , Tyzerella и неидентифицированные роды Lachnospiraceae были увеличены с помощью HFD, в то время как роды Erysipelotrichaceae и группы Rikenellus RC были увеличены. уменьшилось на HFD по сравнению с контрольной группой (рисунок 2I).Относительное количество 2 OTU увеличивалось HFD и восстанавливалось до контрольных уровней мышей в результате обработки D. welbionis J115 ^T: OTU 11 и 16, принадлежащих к родам Ruminoclostridium и Alistipes , соответственно. OTU 54 и 71, связанные с родами Bacteroides и Ruminoclostridium , соответственно увеличивались и уменьшались при лечении живыми животными D. welbionis J115 ^T, но не зависели от диеты.Количественная ПЦР (кПЦР) показала, что D. welbionis не присутствовала у необработанных мышей и достигла 2,3 × 10 ⁸ бактерий на грамм содержимого слепой кишки (что соответствует 0,76% микробиоты) у мышей, которых кормили живыми D. welbionis J115 ^T (рисунок 2J). D. welbionis J115 ^T не колонизировал на длительный срок кишечник мыши, так как он не был обнаружен в фекалиях ни одной мыши после периода вымывания продолжительностью 3 дня (онлайн-дополнительный рисунок S3).
D. welbionis J115 ^T незначительно влияет на морфологию кишечника, не влияя на абсорбционную функцию
Поскольку Dysosmobacter spp не обнаруживается в микробиоте кишечника мышей, свободных от определенных патогенов, мы стремились подтвердить, что живые D. welbionis J115 ^T Введение мыши хорошо переносилось. Никаких признаков воспаления гистологически не наблюдалось в тощей кишке мышей, получавших живые D. welbionis J115 ^T (фигура 3А).Это было подтверждено измерением относительной экспрессии провоспалительных маркеров в различных сегментах кишечника (онлайн-дополнительный рисунок S3) и отсутствием вредного воздействия на маркеры кишечного барьера (например, антимикробные пептиды, образование слизи и белки плотного соединения. ) (рисунок 3B). Живой D. welbionis J115 ^T введение немного уменьшило высоту ворсинок в тощей кишке (542,7 против 482,3 мкм, q = 0,024), но глубина крипт не изменилась (фигура 3C).Уменьшение высоты ворсинок может потенциально привести к уменьшению поверхности поглощения и повлиять на поглощение энергии, как и к увеличению времени прохождения. Однако измерение и расчет как времени прохождения, так и процента диетических калорий, поглощенных из рациона, показали, что ни один из этих параметров не зависел от введения живого D. welbionis J115 ^T (рисунок 3D – E). Наши результаты показывают, что живые животные D. welbionis J115 ^T хорошо переносятся мышами и не изменяют физиологию кишечника.
Рисунок 3
Live Dysosmobacter welbionis J115 ^T умеренно изменяет физиологию кишечника. (A) Типичные изображения тонкой кишки, окрашенные H & E. Шкала шкалы = 100 мкм. (B) Относительная экспрессия генов, связанных с барьерной функцией кишечника в тощей кишке. (C) Средняя высота крипт и ворсинок тощей кишки. (D) Время перехода. (E), процент калорий, поглощенных из пищи. Количество мышей в группе: 10–12. Данные были проанализированы с использованием одностороннего дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки для части рисунка B.* q <0,05; *** q <0,001. Результаты представлены в виде столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей фигуры B – D, а также точечных графиков и столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей фигуры C – E. HFD, диета с высоким содержанием жиров.
D. welbionis J115 ^T уменьшает расширение жировой ткани при HFD и улучшает контроль глюкозы
Более низкое ожирение, наблюдаемое при введении живых D. welbionis J115 ^T, было связано с лучшей толерантностью к глюкозе во время пероральной толерантности к глюкозе тест (OGTT) с более быстрым возвращением к исходному уровню глюкозы после первоначального пика глюкозы в крови через 15 минут после введения глюкозы (рисунок 4A, B).Это было связано со значительно более низким уровнем инсулина натощак и более низким индексом инсулинорезистентности (рис. 4C, D). Более того, мыши, получавшие добавку живых D. welbionis J115 ^T, имели значительно более низкие уровни лептина и резистина в плазме, чем необработанные мыши, получавшие HFD (фиг. 4E, F). Аналогичная тенденция наблюдалась для уровней глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP) и ингибитора активатора плазминогена-1 (PAI-1) в плазме (рисунок 4G, H). И наоборот, липиды плазмы не изменились при лечении (онлайн-дополнительная цифра S1).
Рисунок 4
Live Dysosmobacter welbionis J115 ^T уменьшает разрастание жировой ткани и воспаление при диете с высоким содержанием жиров (HFD) и улучшает измененный метаболический профиль. (A) профиль глюкозы в плазме и (B) средняя площадь под кривой, измеренная во время перорального теста на толерантность к глюкозе (OGTT). (C) Плазменный инсулин измеряется за 30 минут до и через 15 минут после введения глюкозы во время OGTT. (D) Индекс инсулинорезистентности. (E) уровни лептина, (F) резистина, (G) глюкозозависимого инсулинотропного полипептида (GIP) и (H) ингибитора активатора плазминогена-1 (PAI-1) в плазме после 6 часов голодания.(I) Типичные изображения окрашенных H и E подкожной и брыжеечной жировой ткани (SAT и MAT, соответственно). Шкала шкалы = 100 мкм. (J) Распределение диаметров адипоцитов (мкм) в SAT. (K) Распределение диаметров адипоцитов (мкм) в MAT. (L) Относительная экспрессия генов, связанных с метаболизмом липидов в SAT. (M) Относительная экспрессия генов, связанных с воспалением и иммунной системой, в SAT. Количество мышей в группе: 9–12. Результаты представлены в виде точечных и гистограмм со средним значением ± SEM для частей фигуры B – H и в виде столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей фигуры L и M.Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для частей фигуры B – H, L и M и двусторонним дисперсионным анализом с повторными измерениями для частей фигуры A, J и K. * q <0,05; ** q <0,01; *** q <0,001 для сравнений HFD с HFD Live J115 и q <0,01 контроля по сравнению с HFD, ¤¤¤q <0,001 для сравнений контроля и HFD. HFD, диета с высоким содержанием жиров.
D. welbionis J115 ^{Добавка T} связана с уменьшением диаметра адипоцитов и воспалением нижней части жировой ткани
Ожирение связано с гипертрофией адипоцитов, нарушением липолиза и провоспалительным фенотипом, которые способствуют неблагоприятной секреции адипокинов, резистентности к инсулину и т. эктопическое отложение жира.Таким образом, мы измерили диаметр адипоцитов в подкожной жировой ткани (SAT) и брыжеечной жировой ткани (MAT) с помощью гистологии и анализа изображений (рисунок 4I). D. welbionis J115 ^T Лечение значительно увеличивало долю маленьких адипоцитов (диаметр ≤50 мкм) и уменьшало долю больших адипоцитов (диаметр ≥70 мкм) в SAT (рисунок 4J). Этот эффект был еще более выражен в MAT (рисунок 4K).
D. welbionis J115 ^T увеличивает экспрессию маркеров липолиза в сочетании с измененной экспрессией маркеров воспаления в белой жировой ткани
Меньший размер адипоцитов в живых D.welbionis J115 ^T, у мышей, которых лечили, был связан с общим метаболизмом липидов, менее склонным к накоплению жира. Действительно, транспортный белок 4 жирных кислот ( Fatp4 ), участвующий в захвате жирных кислот из кровотока, был в два раза меньше экспрессирован в SAT обработанных мышей (фигура 4L). Напротив, гены, участвующие в липолизе и мобилизации жирных кислот, такие как липаза триглицеридов жиров ( Atgl ) и гормоночувствительная липаза ( Hsl ), были более экспрессированы в SAT обработанных мышей, чем у мышей HFD.Более того, относительная экспрессия провоспалительного цитокина Tnfα и нескольких маркеров инфильтрации макрофагов, таких как Cd68 , Cd163 , Cd11b и Lbp , увеличивалась HFD и снижалась живыми D. welbionis J115 ^{Добавка T}, тогда как некоторые другие маркеры не были затронуты (рисунок 4M).
D. welbionis J115 ^T противодействует изменениям, вызванным HFD, и увеличивает количество митохондрий в BAT
Вес межлопаточных BAT мышей, получавших HFD, с добавлением живых D.welbionis J115 ^T был значительно ниже, чем у мышей, получавших HFD, и даже немного ниже, чем у мышей, получавших контрольную диету (фигура 5A). Гистологический анализ показал, что экспансия BAT, вызванная HFD, была связана с увеличением размера липидных капель и одноглазным, белым внешним видом адипоцитов (фигура 5B). Поверхность, занимаемая липидными каплями в срезах, была значительно увеличена HFD (рис. 5C). Добавление мышей, получавших HFD, живыми животными D.welbionis J115 ^T восстанавливает морфологию коричневых адипоцитов и снижает содержание липидов. Затем мы выполнили анализ РНК-seq для пула РНК, экстрагированной из BAT мышей, получавших HFD, получавших или не получавших живые D. welbionis J115 ^T (фигура 5D). Среди различий между двумя пулами, в частности, оказалось, что транскрипты, принадлежащие процессу воспалительного ответа и онтологиям генов внеклеточного матрикса (GO: 0006955 и GO: 0030020), были более экспрессированы в BAT мышей HFD, чем в транскриптах HFD live . Д.welbionis J115 ^T, получавших мышей (фигура 5D, дополнительная фигура S4 онлайн, дополнительная таблица S2 онлайн). Количественная ПЦР на нескольких маркерах воспаления и инфильтрации макрофагов, проведенная на всех мышах, подтвердила, что HFD усиливает воспаление по сравнению с контрольными мышами, получавшими диету, и что воспаление BAT на HFD было полностью предотвращено добавлением живых D. welbionis J115 ^T. (рисунок 5E). Кроме того, экспрессия профибротических факторов, таких как гены коллагенов и матриксных металлопротеиназ, была активирована HFD и нормализована живыми D.welbionis J115 ^T (рисунок 5F), что свидетельствует о защите от индуцированного HFD ремоделирования и / или фиброза BAT.
Рисунок 5
Live Dysosmobacter welbionis J115 ^T снижает вызванную диетой с высоким содержанием жиров (HFD) дисфункцию коричневой жировой ткани (BAT) и увеличивает количество митохондрий. (A) Межлопаточный вес мышей, получавших ежедневный пероральный желудочный зонд с живыми D. welbionis J115 ^T, замороженными в трегалозе и скармливаемыми HFD (HFD Live J115), или мышей, получавших контрольную диету или HFD и получавших ежедневное пероральное лечение зонд с эквивалентным объемом транспортного средства.(B) Типичные изображения BAT, окрашенные H и E. Шкала шкалы = 100 мкм. (C) Процент белой области на срезах, соответствующей липидным каплям, в НИМ. (D) Точечный график между данными экспрессии RNA-seq пула РНК из BAT мышей HFD и пула РНК из BAT мышей HFD J115. (E) Относительная экспрессия генов, связанных с воспалением и иммунной системой в BAT. (F) Относительная экспрессия генов, связанных с внеклеточным матриксом и фиброзом в BAT. (G) Относительная экспрессия генов, связанных с количеством и функцией митохондрий в BAT.(H) активность цитратсинтазы на мг BAT. (I) Активность цитратсинтазы на подушку бурого жира. (J) Температура тела мышей, получавших ежедневный оральный зонд живыми D. welbionis J115 ^T и получавших диету с высоким содержанием жиров (HFD Live J115), или мышей, получавших диету с высоким содержанием жиров (HFD) и которым ежедневно через желудочный зонд вводили средство на 3 недели (эксперимент 4, см. методы). Количество мышей в группе: 10–12 в частях рисунка A, C и E – I). Количество мышей в группе: 7 в части рисунка J. Результаты представлены в виде точечных графиков и столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей рисунка A, C и H – J и в виде столбчатых диаграмм со средним значением ± SEM для частей рисунка E – G.Данные были проанализированы с использованием одностороннего дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Тьюки для частей фигуры A, C и E – I и тестом Манна-Уитни для части фигуры J. * q <0,05; ** p или q <0,01; *** q <0,001.HFD, диета с высоким содержанием жиров.
Воспаление и преобразование коричневого в белый цвет связаны с митохондриальной дисфункцией в BAT и нарушением термогенеза. Экспрессия BAT-специфического разобщающего белка Ucp1 , специфических маркеров BAT ( Prdm16 и Dio2 ) и маркера митохондриального биогенеза Pgc1α (рисунок 5G) была увеличена на D.welbionis J115 ^T, хотя статистическая значимость была достигнута только для Prdm16 . Чтобы подтвердить возможную активацию BAT и большее количество митохондрий, мы измерили экспрессию нескольких генов дыхательной цепи митохондрий ( Mt-Co1 , Cox7a1 и Cox8b ). Их экспрессия была значительно увеличена HFD и дополнительно повышена живыми D. welbionis J115 ^T (фигура 5G).
Для дальнейшего изучения того, может ли генетическая подпись, наблюдаемая при исследовании мРНК, быть связана со специфическими изменениями на метаболическом уровне, мы измерили активность цитрат-синтазы. Эта активность (выраженная на мг ткани), показатель содержания митохондрий, была на 70% выше у BAT живых мышей HFD J115, чем у HFD-мышей (фигура 5H). Несмотря на уменьшение размера BAT, общая цитратсинтазная активность жировых подушечек живых мышей HFD J115 оставалась на 25,7% выше, чем активность жировых подушечек мышей, содержащихся только на HFD (рисунок 5I), что позволяет предположить, что живые D.welbionis J115 ^{Добавка T} увеличивает митохондриальное содержание и активность BAT. Поскольку BAT производит тепло в результате термогенеза без дрожи, мы попытались определить, увеличивает ли добавка живых организмов D. welbionis J115 ^T температуру тела. В отдельной серии экспериментов (эксперимент 4, подробно описанный в разделе «Материалы и методы»), в ходе которых мышей подвергали HFD или HFD и получали добавку D. welbionis J115 ^T в течение 3 недель (онлайн-дополнительный рисунок S5), мы наблюдали, что мышей, получавших добавку живых D.welbionis J115 ^T ректальная температура в среднем на 0,25 ° C выше, чем у мышей HFD (рисунок 5J).
Обсуждение
В этом исследовании мы впервые обнаружили, что недавно выделенная бактерия D. welbionis J115 ^T широко распространена в общей популяции и что эта бактерия обратно пропорциональна ИМТ, глюкозе в плазме натощак и HbA1c при ожирении. люди, страдающие метаболическим синдромом. Затем мы продемонстрировали, что добавка живого D.welbionis J115 ^T частично защищает мышей от индуцированных HFD метаболических нарушений и слабого воспаления, в частности, посредством механизма, включающего восстановление метаболизма и активности BAT.
Хотя было показано, что многочисленные бактерии положительно или отрицательно связаны с ожирением и кардиометаболическими расстройствами, подавляющее большинство из них никогда не культивировалось, 7 что затрудняет демонстрацию концепции их причинного участия в неблагоприятных или полезных фенотипах.В этом исследовании мы перешли от простой корреляции к демонстрации того, что недавно идентифицированные бактерии D. welbionis J115 ^T являются многообещающим кандидатом. Важно отметить, что бактерия была выращена в четко определенной среде, подходящей для использования бактерий на людях. Это позволяет обойти трудности, с которыми ранее сталкивались при исследовании A. muciniphila, , для которого все исходные данные на мышах были получены с использованием среды, содержащей соединения животного происхождения, не подходящие для введения людям.17
Интересно, что хотя D. welbionis первоначально были выделены из кишечника человека у одного здорового субъекта 21, присутствие этой бактерии широко распространено среди населения в целом. Действительно, используя несколько когорт, таких как HMP, AGP и FGFP (т.е. всего 11 984 субъекта), мы обнаружили, что по крайней мере две трети общей популяции содержат эту недавно обнаруженную бактерию в своем кишечнике.
Поскольку численность этой бактерии отрицательно коррелирует с метаболическими параметрами и ИМТ у людей с ожирением, страдающих метаболическим синдромом, мы проверили, могут ли бактерии влиять на метаболизм хозяина при кормлении HFD.Для этого мы обрабатывали мышей свежими ежедневно приготовленными живыми D. welbionis J115 ^T (1,0 × 10 ⁹ культивируемых живых бактерий в день на мышь) или с использованием бактерий, которые были живыми, но которые были заморожены в трегалоза (1,0 × 10 ⁹ культивируемых живых бактерий в день на одну мышь) или пастеризованная D. welbionis J115 ^T (т. е. убитые нагреванием бактерии). Мы обнаружили, что обработка мышей живыми бактериями, полученными из свежей культуры или замороженными в криопротекторном средстве, снижает массу тела и прирост жировой массы мышей, получавших HFD.Однако уничтожение бактерий с помощью пастеризации полностью устранило ее положительные эффекты. Мы обнаружили, что лечение мышей в течение более длительного периода времени (например, 13 недель) было связано с более сильным эффектом и дальнейшим снижением набора жировой массы, улучшением толерантности к глюкозе и снижением инсулинорезистентности. Тем не менее, при обработке более низкой дозой D. welbionis J115 ^T (т.е. <1,0 × 10 ⁹ культивируемых и жизнеспособных клеток) мыши не реагировали на положительные эффекты бактерий (онлайн-дополнительная диаграмма S2 ).
Жизнеспособность пробиотиков и полезных бактерий часто рассматривается как предпосылка их полезных свойств. Хотя известно, что это верно для определенных видов, например A. soehngenii , положительный эффект которого связан с его способностью к репликации в кишечнике, 14 также было показано, что уничтоженные нагреванием A. muciniphila и несколько Виды Lactobacillus и Bifidobacterium столь же эффективны, как и их живая форма.17 29 В настоящем исследовании мы обнаружили, что пастеризованный D. welbionis J115 ^T оказался неэффективным. Мы также обнаружили, что живая бактерия не могла постоянно колонизировать желудочно-кишечный тракт мышей. Действительно, после 72 часов промывки содержание фекалий D. welbionis J115 ^T было ниже предела обнаружения количественной ПЦР (онлайн-дополнительный рисунок S3). Опосредованы ли благоприятные эффекты D. welbionis J115 ^T составными компонентами или метаболитами, присутствующими как в свежем, так и замороженном препарате, но не метаболитами, продуцируемыми в кишечнике, требует дальнейшего исследования.В целом, это исследование обеспечивает доказательство концепции, что корреляция, наблюдаемая у людей с ожирением, полностью подтверждается экспериментами на мышах, показывающими положительные эффекты D. welbionis J115 ^T.
Для дальнейшего изучения механизмов, лежащих в основе того, как жизнь D. welbionis J115 ^T улучшает метаболические параметры, мы секвенировали микробиоту кишечника мышей и подтвердили, что HFD изменяет состав микробиоты кишечника.30 31 Однако мы наблюдали лишь незначительные изменения в составе микробиоты кишечника. состав кишечной микробиоты между обработанными и необработанными группами, тем самым предполагая прямое влияние бактерий на метаболизм хозяина, а не через модуляцию всей экосистемы кишечника.Это открытие, которое мы ранее наблюдали для A. muciniphila ,16 18 Таким образом, мы исследовали, может ли снижение массы тела и увеличение жировой массы, наблюдаемые при лечении живыми животными D. welbionis J115 ^T, быть следствием острого воспаления. или снижение поглощения энергии. Мы обнаружили, что постоянное введение живых D. welbionis J115 ^T не влияло на воспаление кишечника, время прохождения и поглощение энергии, что позволяет предположить, что введение бактерий хорошо переносится и что улучшение метаболизма не является результатом снижения поглощения энергии.Мы обнаружили, что у живого D. welbionis J115 ^T полностью нормализовалась морфология висцеральных жировых клеток, а также несколько маркеров воспаления, которые, как известно, способствуют развитию инсулинорезистентности и непереносимости глюкозы. Эти данные также подтверждаются более низкими циркулирующими уровнями резистина и, в меньшей степени, PAI-1. Было показано, что оба они участвуют в возникновении инсулинорезистентности.32 33
Помимо белых жировых отложений, коричневая жировая ткань (BAT) имеет первостепенное значение в контроле метаболизма энергии и глюкозы.В основном описано, что кормление HFD вызывает изменение BAT с преобразованием морфологии и функциональности адипоцитов из коричневого в белое, процесс, называемый отбеливанием коричневой жировой ткани, который в конечном итоге приводит к снижению термогенеза BAT и энергии. Расходы.34 Мы обнаружили, что живые особи D. welbionis J115 ^T полностью предотвращали вызванное диетой с высоким содержанием жиров побеление коричневой жировой ткани, характеризующееся меньшим весом и меньшим количеством белых адипоцитов.Кроме того, анализы RNAseq и qPCR показали, что введение живых D. welbionis J115 ^T снижает инфильтрацию макрофагов, уровни экспрессии некоторых маркеров воспаления и профибротических маркеров, причем последние связаны с дисфункциональной жировой тканью и нарушением выработки энергии. посредством окисления субстрата.35 Транскриптомные данные, предполагающие увеличение количества митохондрий, были подтверждены более высокой активностью цитрат-синтазы, эксклюзивного маркера митохондриального матрикса.36 Это увеличение количества митохондрий вызывается D. welbionis и приводит к более высокой температуре тела, связанной с лучшим энергетическим обменом и более высоким расходом энергии у живых мышей D. welbionis J115 ^{, получавших T}, по сравнению с Мыши, получавшие HFD. Хотя наши эксперименты убедительно свидетельствуют о важном влиянии живых D. welbionis J115 ^T на энергетический метаболизм, было бы интересно дополнительно исследовать, действительно ли живые D.welbionis J115 ^T может оказывать еще более сильное воздействие на метаболизм при воздействии термонейтральности.37
Однако точные механизмы действия еще предстоит расшифровать. Среди потенциальных кандидатов-медиаторов мы можем упомянуть бутират, который продуцируется D. welbionis J115 ^T из мио-инозита и, как известно, увеличивает термогенез BAT, 38, а также другие специфические биоактивные липиды, контролирующие метаболизм глюкозы и воспаление39. 40 Тем не менее, мы не обнаружили повышения уровня бутирата в плазме или содержимого слепой кишки (дополнительная информация в Интернете, рисунок 6).
В целом, наши данные убедительно подтверждают, что комменсал кишечника человека D. welbionis J115 ^T — это бактерия, вносящая вклад в регуляцию метаболизма хозяина в ответ на диету, вызывающую ожирение. Используя различные дополнительные подходы in vivo, мы демонстрируем, что D. welbionis J115 ^T регулирует энергетический метаболизм хозяина, вероятно, посредством модуляции образования жировой массы и метаболизма BAT. Что касается других полезных бактерий следующего поколения, окончательные механизмы, объясняющие, как бактерия ведет диалог с хозяином, заслуживают дополнительного изучения.41 42 В настоящем исследовании, хотя мы обнаружили, что бактерия является продуцентом бутирата, мы не можем исключить участие других специфических секретируемых факторов. Наконец, мы обнаружили, что введение D. welbionis J115 ^T в дозе 1,0 × 10 ⁹ культивируемых жизнеспособных клеток генетически и сильно страдающим ожирением мышей ob / ob в течение 6 недель не приводило к значительному снижению телосложения. увеличение веса и жировой массы (онлайн-рисунок S7). В целом, наши данные убедительно подтверждают благотворное влияние живого D.welbionis J115 ^T при ожирении и диабете, вызванном диетой. Однако требуются ли более высокие дозы живого D. welbionis J115 ^T и / или более длительная продолжительность лечения для наблюдения положительного эффекта в конкретной модели, такой как ob / ob (также известной как гиперфагическая модель). дальнейшее расследование. Более того, мы не можем исключить, что введение живых D. welbionis J115 ^T оказывает положительное влияние на инсулинорезистентность независимо от изменений ожирения у этих мышей.Действительно, было показано, что время воздействия микробиоты на хозяина является критическим фактором, способствующим изменению чувствительности к инсулину. 43 Таким образом, время воздействия является важной проблемой в стратегиях, направленных на бактерии, направленных на ослабление диабета по сравнению с избыточным весом и ожирением.
В заключение, D. welbionis J115 ^T — это недавно выделенная человеческая бактерия, которая широко распространена в общей популяции и обратно пропорциональна ИМТ, глюкозе в плазме натощак и HbA1c у субъектов с избыточным весом или ожирением, страдающих метаболическим синдромом. .Ежедневное введение живых D. welbionis J115 ^T мышам в течение по крайней мере 6 недель и до 13 недель притупляло метаболические нарушения, вызванные диетой с высоким содержанием жиров, за счет механизмов, не зависящих от конкретных изменений микробиоты кишечника, а скорее действующих. на метаболизм белой и коричневой жировой ткани.
Сравнение состава кишечной микробиоты у людей с ожирением и без ожирения в популяции Японии, проанализированное с помощью полиморфизма длины концевых рестрикционных фрагментов и секвенирования следующего поколения | BMC Gastroenterology
Люди
В исследование были включены пациенты младше 65 лет, перенесшие колоноскопию в Общем медицинском центре префектуры Мие, Йоккаити, Япония, в период с 2012 по 2013 годы.
Согласно определению Японского общества изучения ожирения, субъекты с индексом массы тела (ИМТ) <18,5 кг / м ² классифицируются как худые, тогда как субъекты с ИМТ от 18,5 до 25 кг / м 2 ² классифицируются как нормальные, а пациенты с ИМТ ≥25 кг / м ² классифицируются как страдающие ожирением. В текущем исследовании мы классифицировали субъектов с ИМТ <20 кг / м ² как не страдающих ожирением, а лиц с ИМТ ≥25 кг / м ² как страдающих ожирением, поскольку у нас не было достаточного количества субъектов с ИМТ. <18.5 кг / м ² для проведения статистического анализа.
Различия в микрофлоре кишечника между двумя группами оценивали с помощью анализа T-RFLP. Критерии исключения для всех участников включали текущее использование антибиотиков, историю или текущее хроническое заболевание кишечника или печени, распространенный колоректальный рак, историю химиотерапии или лучевой терапии, а также регулярное использование иммунодепрессантов (стероидов, интерферон и т. Д.) Или пробиотиков. Распределение пациентов показано на рис. 1. Все пациенты получили объяснение процедур и возможных рисков, связанных с исследованием, и дали письменное информированное согласие на участие.Это исследование было выполнено в соответствии с Хельсинкской декларацией и одобрено нашим институциональным комитетом по этике (номер разрешения 2011-5, Общий медицинский центр префектуры Мие, Йоккаити, Япония). Образцы стула были собраны перед подготовкой кишечника полиэтиленгликолем для колоноскопии. После сбора образцы фекалий хранили при 4 ° C и отправляли в лабораторию Technosuruga (Сидзуока, Япония) для анализа T-RFLP, как описано ниже.
Рис. 1
Блок-схема, показывающая общее количество зачисленных участников и окончательное количество участников, включенных в исследование.23 с ИМТ <20 и 33 с ИМТ ≥25 были включены в исследование.
Экстракция ДНК
Образцы фекалий (приблизительно 4 мг) немедленно суспендировали в растворе, содержащем 100 мМ Трис-HCl, pH 9,0, 40 мМ Трис-ЭДТА, pH 8,0 и 4 М тиоцианата гуанидина и выдерживали при -20 ° C до экстракции ДНК. Аликвоту 0,8 мл суспензии гомогенизировали с шариками из диоксида циркония в 2,0 мл пробирке с завинчивающейся крышкой с помощью FastPrep 24 Instrument (MP Biomedicals, Санта-Ана, Калифорния) при 5 м / с в течение 2 минут и помещали на лед на 5 минут.После центрифугирования при 5000 × g в течение 1 мин ДНК экстрагировали из 200 мкл суспензии с использованием автоматического экстрактора нуклеиновых кислот (Precision System Science, Чиба, Япония). MagDEA DNA 200 (GC) (Precision System Science) использовали в качестве реагента для автоматической экстракции нуклеиновых кислот.
T-RFLP
16S рДНК была амплифицирована из фекальной ДНК человека с использованием флуоресцентно меченного праймера 516f (5′-TGCCAGCAGCCGCGGTA-3 ‘; Escherichia coli положения с 516 по 532) и праймера 1510r (5′-GGTTAC 3 ‘; E.coli , позиции с 1510 по 1492). Для этого использовали ДНК-полимеразу Hot-starTaq с помощью системы 9600 для ПЦР Gene Amp (Applied Biosystems, Фостер-Сити, Калифорния). Программа амплификации была следующей: предварительный нагрев при 95 ° C в течение 15 мин, 30 циклов денатурации при 95 ° C в течение 30 с, отжиг при 50 ° C в течение 30 с, удлинение при 72 ° C в течение 1 мин и, наконец, удлинение клеммы при 72 ° C на 10 мин. Амплифицированную ДНК очищали с помощью фильтровального планшета MultiScreen PCR96 (Millipore, Billerica, MA) и проверяли электрофорезом.Рестрикционные ферменты были выбраны согласно Nagashima et al. [17, 18]. Вкратце, продукт ПЦР очищали и расщепляли 10 ед. Bsl I (New England BioLabs, Ипсвич, Массачусетс) при 55 ° C в течение 3 часов. Полученные в результате фрагменты ДНК, а именно флуоресцентно меченые концевые рестрикционные фрагменты (T-RF), анализировали с помощью генетического анализатора ABIPRISM 3130xl, и их длину и площадь пика определяли с использованием программного обеспечения для генотипа GeneMapper (Applied Biosystems). T-RF были разделены на 29 операционных таксономических единиц (OTU).OTU количественно определяли как процент отдельных OTU на общую площадь OTU, которые выражали как процент площади под кривой (% AUC). Бактерии были спрогнозированы для каждой классификационной единицы, и соответствующая OTU была идентифицирована в соответствии с эталонным профилированием T-RFLP фекальной микробиоты человека (http://www.tecsrg-lab.jp/).
Из всех субъектов, у которых после колоноскопии было диагностировано нормальное состояние (21 из 56), для секвенирования следующего поколения были отобраны образцы от 4 субъектов, не страдающих ожирением, с самым низким ИМТ и 6 субъектов с ожирением с самым высоким ИМТ.Диагноз других 35 участников показан в Дополнительном файле 1: Таблица S1.
Генерация библиотеки Illumina
NGS-анализ структуры микробного сообщества в фекалиях был выполнен с использованием MiSeq (Illumina, Сан-Диего, Калифорния), как ранее описано Takahashi et al. [19]. Область V3-V4 16S рДНК амплифицировали с использованием 341 F (5’-CCTACGGGAGGCAGCAG-3 ’) [20] и 806R (5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’) [21]. В дополнение к специфическим праймерам V3-V4 эти праймеры комплементарны стандартным прямым и обратным праймерам Illumina.Обратный праймер также содержал индексирующую последовательность длиной 6 пар оснований (CAGATC, ACTTGA, GATCAG, TAGCTT, GGCTAC, CTTGTA, ATCACG, CGATGT, TTAGGC и TGACCA) для мультиплексирования. Метод touchdown PCR для термоциклирования использовали с системой GeneAmp PCR 9700 (ABI, Foster City, CA). Реакционная смесь для ПЦР (25 мкл) содержала 20 нг геномной ДНК, 2 × MightyAmp Buffer Ver.2 (Takara, Otsu, Japan), 0,25 мкМ каждого праймера и 1,25 единицы ДНК-полимеразы MightyAmp (Takara). Реакцию ПЦР и приготовление пула ампликонов проводили по методике Takahashi et al.[19].
Illumina секвенирование и качественная фильтрация
Каждый пул мультиплексированных библиотек был дополнен 30% -ным контролем phiX для улучшения базового вызова во время секвенирования, как рекомендовано Illumina для объединения двух библиотек, согласно Takahashi et al. [19]. Секвенирование проводили с использованием цикла парных концов, 2 × 251 п.н., в системе секвенирования Illumina MiSeq и химии MiSeq Reagent Nano Kit версии 2 (500 циклов). Было выполнено парное секвенирование с длиной считывания около 251 п.н.После демультиплексирования наблюдалось четкое перекрытие парных считываний. Это позволило объединить парные чтения вместе с программой fastq-join (http://code.google.com/p/ea-utils/). Для дальнейшего анализа были извлечены только те считывания, которые имели оценку значения качества (QV) ≥20 для более чем 99% последовательности. Все последовательности с неоднозначными базовыми вызовами были отброшены [19].
Биоинформатический анализ
Определенные последовательности 16S рДНК подвергали поиску гомологии с использованием программного обеспечения Metagenome @ KIN (World Fusion Co., Ltd., Токио, Япония) против базы данных микробной идентификации лаборатории TechnoSuruga DB-BA9.0 (лаборатория TechnoSuruga), которая содержит только бактерии, имеющие статус в таксономической номенклатуре.
Оценка богатства и разнообразия
Микробное разнообразие оценивалось с использованием индекса разнообразия Шеннона-Вейнера (H ‘), который учитывает как количество филотипов (богатство), так и долю от общего количества, приходящуюся на каждый филотип (равномерность) [22].
Анализ главных компонентов
Анализ главных компонентов (PCA) выполняли с использованием программного обеспечения Metagenome @ KIN (World Fusion Co., Ltd., Токио, Япония) на основе данных по родам бактерий с отсечкой 97% сходства с базой данных Apollon DB-BA, версия 9.0 (Лаборатория TechnoSuruga).
Статистический анализ
Данные были проанализированы с использованием непарного теста t с поправкой Велча для непрерывных переменных или теста Манна-Уитни (двусторонний) и точного теста Фишера для категориальных переменных с использованием программного обеспечения IBM SPSS Ver. 22. Значения P менее 0,05 считались значимыми.
Трансплантация фекальных микробов и добавление клетчатки пациентам с ожирением и метаболическим синдромом.- Просмотр полного текста
Этап: это клиническое испытание фазы II.
Методология. Это поисковое рандомизированное плацебо-контролируемое интервенционное исследование с параллельным дизайном в четырех группах.
Продолжительность обучения: 12 недель Учебный центр (ы): это одноцентровое исследование в Университете Альберты
Цели: Цель этого исследования — определить, оказывает ли фекальная микробная трансплантация (FMT) в сочетании с добавлением комбинированной добавки с клетчаткой из резистентного крахмала 4 типа, камеди акации и растворимой кукурузной клетчатки клинически значимое влияние на метаболические исходы у субъектов с ожирением. с метаболическим синдромом
Первичный результат: изменение чувствительности к инсулину между временем скрининга и 6 неделями после лечения.
Вторичные результаты:
Изменения массы тела и антропометрических параметров между исходным уровнем и 6 неделей.
Изменения HbA1C, глюкозы натощак, теста на толерантность к глюкозе между исходным уровнем и 6 неделей
Изменения липидного профиля натощак между исходным уровнем и 6 неделей
Изменения артериального давления между исходным уровнем и 6 неделей
Качество жизни и сытость от исходного уровня до 6 недели
Изменения сывороточных уровней лептина, адипонектина, грелина, CRP, TNF-α, IL-6, LPS, LPS-связывающего белка и зонулина между исходным уровнем и 6 неделей
Изменения в составе микробиоты стула от исходного уровня до 6-й недели
Изменения в составе короткоцепочечных жирных кислот стула между исходным уровнем и 6 неделей
Количество субъектов: 68
Диагностика и основные критерии включения
Первичный диагноз:
• ИМТ> 30
Ключевые критерии включения:
Исследуемый продукт, доза, путь, режим FMT:
50 г скринированного и инкапсулированного стула одного донора (приблизительно 20-30 капсул), принятого перорально в день 1 испытания после голодания в течение ночи и завершения подготовки кишечника с помощью Pico-Salax®.
Таблетки плацебо содержат микрокристаллическую целлюлозу
Кукурузное волокно растворимое (PROMITOR®: Tate & Lyle)
Женщины: 4,5 г PROMITOR внутрь, дни 1-3, увеличено до 9 г в день с 4 дня до завершения испытания.
Мужчины: 5,5 г PROMITOR перорально, дни 1-3, увеличено до 11 г перорально ежедневно с 4 дня до завершения испытания.
Резистентный пшеничный крахмал 4 (Fibersym®: MGP Ingredients):
Женщины: 4.5 г порошка RS4 для перорального приема, дни 1-3 увеличились до 9 г перорально ежедневно с 4-го дня до завершения испытания.
Мужчины: 5,5 г порошка RS4 перорально, дни 1-3 увеличены до 11 г перорально ежедневно с 4 дня до завершения испытания.
Акациевая камедь (предварительно гидратированная гуммиарабик: TIC GUMS):
Женщины: 4,5 г порошкообразной жевательной резинки акации внутрь, дни 1-3 увеличены до 9 г перорально ежедневно с дня 4 до завершения испытания.
Мужчины: 5,5 г порошка жевательной резинки акации внутрь, дни 1-3 увеличены до 11 г перорально ежедневно с дня 4 до завершения испытания.
Продолжительность администрирования:
FMT: Разовая доза 50 г донорского стула или плацебо (микрокристаллическая целлюлоза) в день 1.
Волокно: ежедневное введение до завершения на 6 неделе
Референсная терапия И FMT, и Fiber будут соответствовать плацебо в качестве референсной терапии.
Статистическая методология: Изучите группы с анализом путем попарного сравнения с оценкой средних значений между группами и между группами с использованием парных или непарных t-критериев для непрерывных результатов и критериев хи-квадрат для дихотомических.Многовариантные предикторы изменения релевантных результатов будут определены с использованием соответствующим образом сконструированных и откалиброванных моделей линейной регрессии для непрерывных результатов или моделей логистической регрессии для дихотомических.
Что с бактериями в кишечнике?
Наш кишечник является домом для больших скоплений бактерий. Эти бактерии играют важную роль в переваривании пищи, которую мы едим. Бактерии являются частью микробиома кишечника. Микробиом — это скопление микробов, например бактерий, в определенном месте.Микробиом вашего кишечника является домом для сотен видов бактерий. Микробиом кишечника играет важную роль в питании. Это также влияет на наше здоровье и другими способами. Это может быть причиной того, что мы счастливы или подавлены, здоровы или больны.
Корма везде, но это хорошо
Когда вы рождаетесь, вы проходите через родовые пути своей матери. Там вы начинаете собирать бактерии. Вы получаете еще больше с молоком матери. Молоко содержит вещества, которые могут разрушить только бактерии.Молоко дает младенцам полезные микробы. Он также снабжает этих микробов чем-нибудь поесть.
К тому времени, когда детям исполняется 3 года, их микробиомы полностью формируются. Это означает, что они контактировали с большим количеством фекальных частиц или кусочков фекалий. По словам микробиологов, ученых, изучающих микробы, окружающая среда в значительной степени покрыта фекальными частицами. Это может показаться грубым, но это хорошо. Собранные нами бактерии снабжают нас ферментами и витаминами.Они помогают нам бороться с инфекциями. Они производят химические вещества, необходимые для нашего психического здоровья и благополучия.
Обработанные продукты могут убить полезные бактерии
Наши бактерии также защищают нас от множества болезней. Но в последнее время ученые говорят, что среди населения наблюдается рост заболеваемости некоторыми заболеваниями. Увеличилось количество людей с избыточным весом. Также участились случаи аллергии, астмы, артрита и сердечных заболеваний. Ученые считают, что рост этих заболеваний означает, что что-то не так с популяциями бактерий в нашем кишечнике.
Проблема может быть в негерметичном эпителии. Эпителий — это слизистая оболочка пищеварительной трубки. Он действует как барьер между кишечными бактериями и остальным телом. Бактерии поддерживают здоровье эпителиальных клеток, обеспечивая их питанием. Но без правильных бактерий эпителий разрушается. Бактерии и токсичные бактериальные побочные продукты попадают в кровоток. Это посылает сигнал иммунной системе, которая является защитной системой организма, предупреждая его о присутствии захватчиков.Это может привести к воспалениям и заболеваниям.
В таких странах, как Соединенные Штаты, выбор образа жизни убил некоторые из наших кишечных микробов. Этот образ жизни включает употребление в пищу слишком большого количества обработанных пищевых продуктов или продуктов, обработанных химическими веществами. Люди злоупотребляют антибиотиками или лекарствами, которые борются с бактериальными инфекциями. Такой выбор привел к созданию микробиома, в котором не так много полезных типов бактерий. Многие современные болезни могут возникать из-за того, что наш микробиом не такой, каким был раньше.
Физические упражнения и употребление в пищу продуктов, богатых клетчаткой, могут помочь
Как сохранить здоровье микробиома? Ученые и врачи советуют не полагаться на пробиотики, которые можно купить в супермаркете. Они рекомендуют диету, богатую ферментированными пробиотиками продуктами. Это продукты, молекулы которых расщепляются дрожжами или бактериями. Примеры включают йогурт, квашеную капусту и мисо-суп. Также хороши продукты, богатые клетчаткой. К ним относятся цельнозерновые, фрукты и овощи.
Нездоровая пища также не приносит пользы нашим кишечным бактериям. Также рекомендуется избегать обработанных пищевых продуктов. Эти продукты не обеспечивают достаточного питания для кишечных бактерий. Физические упражнения также приносят пользу нашему кишечнику. В одном исследовании игроков в регби сравнивали с не спортсменами. Выяснилось, что у игроков в регби больше микробов. Наконец, вы можете захотеть расширить свою среду. Чем больше различных видов бактерий вы соберете, тем лучше.

Автор: alexxlab
Навигация по записям
← Типы свечей зажигания: Типы свечей зажигания и накаливания
Сигнализация старлайн все модели фото: Сигнализация starline все модели фото →
Добавить комментарий Отменить ответ
Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *
Комментарий *
Имя *
Email *
Сайт

Поиск для:
Рубрики
Вид
Замен
Замена расходников и жидкостей
Классификация
Масло
Мотор
Провер
Проверка
Промывк
Промывка
Разное
Ремонт
Совет
Советы
Уровен
Уровень
Copyright © 2024 hot-hatch.ru

Виды Ожирение (%) Постное (%) p Значение
0,002
0,008 0,042
Ruminococcus крутящие моменты 0.230 0,685 0,058
Acetivibrio ethanolgignens 0,000 0,014 0,061
Anaerotruncus coli326326
Anaerotruncus coli326326 1,987 5,673 0,086
Bacteroides stercorirosoris 0,000 0.018 0,089
Bilophila wadsworthia 0,078 0,202 0,051
Christensenella minuta 0,0007 0,0003326 0,0003326 0,008 0,019
Clostridium xylanolyticum 0.046 0,208 0,054
Desulfovibrio piger 0,026 0,276 0,037
Dialister succinatiphilus 7.00076
0,016 0,102 0,057
Eubacterium callanderi 0,000 0,066 0.094
Eubacterium coprostanoligenes 0,004 0,157 0,101
Eubacterium desmolans 0,002 0,103 0,029
Eubacterium fissicatena 0,004 0,016 0,038
Eubacterium ruminantium 0.002 0,189 0,061
Faecalibacterium prausnitzii 3.932 5,943 0,050
Flavonifractor plautii 0,069 0,152 0,067
Gordonibacter pamelaeae 0,001 0,011 0,041
Holdemania filiformis 0.000 0,003 0,034
Lactococcus lactis 0,004 0,020 0,088
900,000
900,000
900,000

0,001 0,007 0,054
Roseburia hominis 0.006 0,099 0,061
Промежуточный Streptococcus 0,001 0,004 0,086
Subdoligranulum variabile 7