30 5: Моторное масло Castrol EDGE 5W-30 LL синтетическое, 5 л

5. Собственник жилого дома или части жилого дома обязан обеспечивать обращение с твердыми коммунальными отходами путем заключения договора с региональным оператором по обращению с твердыми коммунальными отходами. Под обращением с твердыми коммунальными отходами для целей настоящего Кодекса и иных актов жилищного законодательства понимаются транспортирование, обезвреживание, захоронение твердых коммунальных отходов.

(см. текст в предыдущей редакции)

Открыть полный текст документа

Регулятор расхода газа У-30-5

Технические характеристики регулятора У-30-5:

Комплектация регулятора расхода газа У-30-5:

• Регулятор расхода газа в собранном виде 1 шт.
• Ниппель универсальный под рукав резиновый диаметром 6,3 мм или 9 мм 1 шт.
  
• Гайка 19 1 шт.
• Паспорт 1 шт.

Регулятор расхода газа У-30-5 баллонный одноступенчатый  предназначен для понижения и регулирования давления углекислого газа, поступающего из баллона, и автоматического поддержания постоянного рабочего расхода газа на выходе регулятора в ходе проведения работ.

Регулятор расхода газа – устройство по назначению идентичное с редуктором, но кроме удерживания рабочего давления (редуцирования) он также показывает и расход газа. А это как раз важно и для контроля расходов на сварку, и для некоторых технологий сварки тоже.

Регулятор расхода У 30 5 выпускается в климатическом исполнении УХЛ2 для типа атмосферы II и группы условий эксплуатации – 3 по ГОСТ 15150, для работы в интервале температур от +5 до +50° С.

Устройство и принцип работы регулятора расхода газа У-30-5:

Регулятор расхода У-30-5 присоединяется к источнику питания газом через входной штуцер накидной гайкой  с резьбой G 3/4”. Понижение давления газа, поступающего в регулятор расхода газа из баллона, происходит путём одноступенчатого расширения его при прохождении через зазор между седлом и редуцирующим клапаном в камеру рабочего давления.

Необходимый расход газа устанавливается вращением регулирующего винта и измеряется указателем расхода газа ротаметром. Пределы регулирования расхода регулируются винтом, расположенным под защитным колпачком.

В корпусе регуляторов расхода установлен предохранительный клапан, соединенный с рабочей камерой. Для отбора газа регуляторы расхода имеют ниппель под рукав резиновый для газовой сварки и резки металлов по ГОСТ 9356-75 диаметром 9 мм и 6,3 мм. Электроподогреватель обеспечивает работоспособность регулятора расхода при минусовых (до минус 30 °С) температурах окружающей среды и наибольшем расходе углекислого газа до 1,8 м3 /ч (30 л/мин). Предприятием ведется дальнейшая работа по усовершенствованию конструкции регуляторов давления, поэтому некоторые конструктивные изменения могут быть не отражены в настоящем паспорте.

Указания мер безопасности при работе У-30-5:

При эксплуатации регулятора давления У-30-5 во время работ по газопламенной обработке металлов необходимо соблюдать правила техники безопасности и гигиены труда, требования ГОСТ 12.2.008-75 и «Правила безопасности для объектов, использующих сжиженные углеводородные газы» ПБ 12-609-03, утвержденные Госгортехнадзором России. Перед открытием вентиля баллона выверните регулирующий маховик до полного освобождения задающей пружины. Запрещается быстрое открытие вентиля баллона при подаче газа в регулятор давления. Присоединительные элементы регулятора давления и вентиля баллона должны быть чистыми и не иметь никаких повреждений, следов масел и жиров.

Правила эксплуатации регулятора расхода газа У-30-5:

Перед присоединением регулятора к баллону необходимо убедиться в исправности установленных на У-30-5 показывающих устройств для определения давления и уплотняющей прокладки на входном штуцере, а также проверить качество уплотняющих поверхностей ниппеля и выходной втулки. Присоедините регулятор расхода газа к баллону и к его выходу присоедините газовый резак или горелку, закройте их вентили расхода газа. Установите рабочее давление и проверьте герметичность соединений регулятора и «самотек». После прекращения расхода газа стрелка показывающего устройства для определения рабочего давления должна остановиться, т. е. не должно происходить медленного нарастания рабочего давления. Перед запуском регулятора в работу, а также не реже одного раза в три месяца, необходимо проверять герметичность сопряжения показывающих устройств для определения давления и предохранительного клапана с корпусом регулятора давления. При нарушении герметичности необходимо подтянуть резьбовые соединения.

COVID-19 и дети | Намазова-Баранова

1. Ogimi C., Kim Y.J., Martin E.T. et al. What’s new with the old coronaviruses? J. Pediatric Infect. Dis. Soc. 2020; 9 (2): 210–217. DOI: 10.1093/jpids/piaa037.

2. Chang L.Y., Lu C.Y., Chao P.L. et al. Viral infection associated with Kawasaki disease. J. Formos. Med. Assoc. 2014; 113 (3): 148–154. DOI: 10.1016/j.jfma.2013.12.008.

3. Биоград. Часто задаваемые вопросы по коронавирусной инфекции кошек. Доступно на: https://www.biograd.ru/content/часто-задаваемые-вопросы-по-коронавирусной-инфекции-кошек.

4. Jiang S., Shi Z., Shu Y. et al. A distinct name is needed for the new coronavirus. Lancet. 2020; 395 (10228): 949. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)30419-0.

5. Letko M., Marzi A., Munster V. Functional assessment of cell entry and receptor usage for SARS-CoV-2 and other lineage В betacoronaviruses. Nat. Microbiol. 2020; 5 (4): 562–569. DOI: 10.1038/s41564-020-0688-y.

6. Zhou P., Yang X., Wang X. et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature. 2020; 579 (7798): 270–273. DOI: 10.1038/s41586020-2012-7.

7. Khera R., Clark C., Lu Y. et al. Association of angiotensin-converting enzyme inhibitors and angiotensin receptor blockers with the risk of hospitalization and death in hypertensive patients with coronavirus disease-19. medRxiv [Preprint. Posted: 2020, May 19]. DOI: 10.1101/2020.05.17.20104943.

8. WebMD. Coronavirus in kids and babies. Available at: https://www.webmd.com/lung/coronavirus-covid-19-babies-children#1 [Accessed: May 19, 2020].

9. Русинова Д.С., Никонов Е.Л., Намазова-Баранова Л.С. и др. Первые результаты наблюдения за детьми, переболевшими COVID-19 в Москве. Педиатрическая фармакология. 2020; 17 (2): 95–102. DOI: 10.15690/pf.v17i2.2095

10. Jackson D.J., Busse W.W., Bacharier L.B. et al. Association of respiratory allergy, asthma, and expression of the SARSCoV-2 receptor ACE2. J. Allergy Clin. Immunol. 2020; 146 (1): 203–206.e3. DOI: 10.1016/j.jaci.2020.04.009.

11. Kimura H., Francisco D., Conway M. et al. Type 2 inflammation modulates ACE2 and TMPRSS2 in airway epithelial cells. J. Allergy Clin. Immunol. 2020; 146 (1): 80–88.e8. DOI: 10.1016/j.jaci.2020.05.004.

12. Gemmati D., Bramanti B., Serino M.L. et al. COVID-19 and individual genetic susceptibility/receptivity: Role of ACE1/ACE2 genes, immunity, inflammation and coagulation. Might the double X-chromosome in females be protective against SARS-CoV-2 compared to the single X-chromosome in males? Int. J. Mol. Sci. 2020; 21 (10): 3474. DOI: 10.3390/ijms21103474.

13. Zang R., Gomez Castro M.F., McCune B.T. et al. TMPRSS2 and TMPRSS4 promote SARS-CoV-2 infection of human small intestinal enterocytes. Sci. Immunol. 2020; 5 (47): eabc3582. DOI: 10.1126/sciimmunol.abc3582.

14. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Временные методические рекомендации: Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Версия 7. (03.06.2020). Доступно на: https://static-0.rosminzdrav.ru/system/attachments/attaches/000/050/584/original/03062020_%D0%9CR_COVID-19_v7.pdf

15. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Методические рекомендации: Особенности клинических проявлений и лечения заболевания, вызванного новой коронавирусной инфекцией (COVID-19) у детей. Версия 2 (03.07.2020). Доступно на: https://static-0.minzdrav.gov.ru/system/attachments/attaches/000/050/914/original/03062020_%D0%B4%D0%B5%D1%82%D0%B8_COVID-19_v2.pdf

16. Shen K., Yang Y. Diagnosis and treatment of 2019 novel coronavirus infection in children: a pressing issue. World J. Pediatr. 2020; 16 (3): 219–221. DOI: 10.1007/s12519-02000344-6.

17. Lee P.I., Hu Y.L., Chen P.Y. et al. Are children less susceptible to COVID-19? J. Microb. Immunol. Infect. 2020; 53 (3): 371–372. DOI: 10.1016/j.jmii.2020.02.011.

18. Molloy E.J., Bearer C.F. COVID-19 in children and altered inflammatory responses. Pediatr. Res. 2020; 88 (3): 340–341. DOI: 10.1038/s41390-020-0881-y.

19. Cristiani L., Mancino E., Matera L. et al. Will children reveal their secret? The coronavirus dilemma. Eur. Respir. J. 2020; 55 (4): 2000749. DOI: 10.1183/13993003.00749-2020.

20. Ма Х., Su L., Zhang Y. et al. Do children need a longer time to shed SARS-CoV-2 in stool than adults? J. Microbiol. Immunol. Infect. 2020; 53 (3): 373–376. DOI: 10.1016/j.jmii.2020.03.010.

21. Zhang J., Wang S., Xue Y. Fecal specimen diagnosis 2019 novel coronavirus-infected pneumonia. J. Med. Virol. 2020; 92 (6): 680–682. DOI: 10.1002/jmv.25742.

22. Saleem H., Rahman J., Aslam N. et al. Coronavirus disease 2019 (COVID-19) in children: vulnerable or spared? A systematic review. Cureus. 2020; 12 (5): e8207. DOI: 10.7759/cureus.8207.

23. Ji L.N., Chao S., Wang Y.J. et al. Clinical features of pediatric patients with COVID-19: a report of two family claster cases. World J. Pediatr. 2020; 16 (3): 267–270. DOI: 10.1007/s12519-020-00356-2.

24. Rahimzadeh G., Noghabi M.E., Elyaderani F.K. et al. COVID-19 infection in Iranian children: A case series of 9 patients. J. Pediatr. Rev. 2020; 8 (2): 139–144. DOI: 10.32598/jpr.8.2.139.

25. Park J.Y., Han M.S., Park K.U. et al. First pediatric case of coronavirus disease 2019 in Korea. J. Korean Med. Sci. 2020; 35 (1): e124. DOI: 10.3346/jkms.2020.35.e124.

26. Kam K.Q., Yung C.F., Cui L. et al. A well infant with coronavirus disease 2019 (Covid-19) with high viral load. Clin. Infest. Dis. 2020; 71 (15): 847–849. DOI: 10.1093/cid/ciaa201.

27. Zheng M., Gao Y., Wang G. et al. Functional exhaustion of antiviral lymphocytes in COVID-19 patients. Cell. Mol. Immunol. 2020; 17 (5): 533–535. DOI: 10.1038/s41423-0200402-2.

28. Смирнов В.С., Тотолян А.А. Врожденный иммунитет при коронавирусной инфекции. Инфекция и иммунитет. 2020; 10 (2): 259–268. DOI: 10.15789/2220-7619-III-1440

29. Mehta P., McAuley D.F., Brown M. et al. COVID-19: consider cytokine storm syndromes and immunosuppression. Lancet. 2020; 395 (10229): 1033–1034. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)30628-0.

30. Ngu S.C., Tilg H. COVID-19 and the gastrointestinal tract: more than meets the eye. Gut. 2020; 69 (6): 973–974. DOI: 10.1136/gutjnl-2020-321195.

31. Krzysztof N.J., Christoffer L.J., Rahul K. et al. (2020). Age, inflammation and disease location are critical determinants of intestinal expression of Sars-Cov-2 receptor Ace2 and Tmprss2 in inflammatory bowel disease. Gastroenterology. 2020; 159 (3): 1151–1154. DOI: 10.1053/j.gastro.2020.05.030.

32. Paediatric Intensive Care Society. PICS Statement regarding novel presentation of multi-system inflammatory disease. Available at: https://pccsociety.uk/news/pics-statement-regarding-novel-presentation-of-multi-system-inflammatory-disease

33. Riphagen S., Gomez X., Gonzalez-Martinez C. et al. Hyperinflammatory shock in children during COVID-19 pandemic. Lancet. 2020; 395 (10237): 1607–1608. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)31094-1.

34. Royal College of Paediatrics and Child Health. Guidance: Paediatric multisystem inflammatory syndrome temporally associated with COVID-19. Available at: https://www.rcpch.ac.uk/sites/default/files/2020-05/COVID-19-Paediatric-multisystem-%20inflammatory%20syndrome-20200501.pdf [Accessed: June 29, 2020].

35. NYС Heatlh. 2020 Health Alert #13: Pediatric multi-system inflammatory syndrome potentially associated with COVID-19. Available at: https://www1.nyc.gov/assets/doh/downloads/pdf/han/alert/2020/covid-19-pediatric-multi-system-inflammatory-syndrome.pdf [Accessed: June 29, 2020].

36. Greene A.G., Saleh M., Roseman E., Sinert R. Toxic shock-like syndrome and COVID-19: A case report of multisystem inflammatory syndrome in children (MIS-C). Am. J. Emerg. Med. [Preprint. Posted: 2020, Jun. 6]. DOI: 10.1016/j.ajem.2020.05.117.

37. Schnapp A., Abulhija H., Maly A. et al. Introductory histopathological findings may shed light on COVID-19 paediatric hyperinflammatory shock syndrome. J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. [Preprint. Posted: 2020, Jun. 13]. DOI: 10.1111/jdv.16749.

38. Waltuch T., Gill P., Zinns L.E. et al. Features of COVID-19 post-infectious cytokine release syndrome in children presenting to the emergency department. Am. J. Emerg. Med. [Preprint. Posted: 2020, May 23]. DOI: 10.1016/j.ajem.2020.05.058.

39. Toubiana J., Poirault C., Corsia A. et al. Kawasaki-like multisystem inflammatory syndrome in children dring the covid-19 pandemic in Paris, France: prospective observational study. Br. Med. J. 2020; 369: m2094. DOI: 10.1136/bmj.m2094.

40. Grimaud M., Starck J., Levy M. et al. Acute myocarditis and multisystem inflammatory emerging disease following SARS-CoV-2 infection in critically ill children. Ann. Intensive Care. 2020; 10 (1): 69. DOI: 10.1186/s13613-02000690-8.

41. Jenco M., ed. CDC details COVID-19-related inflammatory syndrome in children. AAP News. 2020, May 14. Available at: https://www.aappublications.org/news/2020/05/14/covid19inflammatory051420 [Accessed: June 29, 2020].

42. Bernstein S. California latinos contracting COVID-19 at three times rate of whites. Medscape. 2020, Jul. 28. Available at: https://www.medscape.com/viewarticle/934777

43. Vigo D., Thornicroft G., Gureje O. The differential outcomes of coronavirus disease 2019 in low- and middle-income countries vs high-income countries. JAMA Psychiatry. 2020, Jun. 11. DOI: 10.1001/jamapsychiatry.2020.2174.

44. Taquet M., Quoibach J., Eiko I.F. et al. Mood homeostasis before and during the coronavirus disease 2019 (COVID-19) lockdown among students in The Netherlands. JAMA Psychiatry. [Preprint. Posted: 2020, Jul. 29]. DOI: 10.1001/jamapsychiatry.2020.2389.

45. Willson F.P. Many people lack protective antibodies after COVID-19 infection. Medscape. 2020, Jun. 24. Available at: https://www.medscape.com/viewarticle/932715

46. Kampf G., Todt D., Pfaender S., Steinmann E. Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and their inactivation with biocidal agents. J. Hosp. Infect. 2020; 104 (3): 246–251. DOI: 10.1016/j.jhin.2020.01.022.

47. Van Doremalen N., Bushmaker T., Morris D.H. et al. Aerosol and surface stability of SARS-CoV-2 as compared with SARS-CoV-1. N. Engl. J. Med. 2020; 82 (16): 15641567. DOI: 10.1056/NEJMc2004973.

48. van Doremalen N., Bushmaker T., Morris D.H. et al. Aerosol and surface stability of Sars-Cov-2 as compared with Sars-Cov-1. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (16): 15641567. DOI: 10.1056/NEJMc2004973.

49. Chia P.Y., Coleman K.K., Tan Y.K. et al. Detection of air and surface contamination by SARS-CoV-2 in hospital rooms of infected patients Singapore 2019 Novel Coronavirus Outbreak Research Team. Nat. Commun. 2020; 11 (1): 2800. DOI: 10.1038/s41467-020-16670-2.

50. West R., Michie S., Rubin G.J., AmlÔt R. Applying principles of behaviour change to reduce SARS-CoV-2 transmission. Nat. Hum. Behav. 2020; 4 (5): 451–459. DOI: 10.1038/s41562-020-0887-9.

51. Kam K.Q., Yung C.F., Cui L. et at. A well infant with coronavirus disease 2019 (COVID-19) with high viral load. Clin. Infect. Dis. 2020; 71 (15): 847–849. DOI: 10.1093/cid/ciaa201.

52. Cai J., Xu J., Lin D. et al. A case series of children with 2019 novel coronavirus infection: Clinical and epidemiological features. Clin. Infect. Dis. 2020; 71 (6): 1547–1551. DOI: 10.1093/cid/ciaa198.

53. Qiu H. Wu J., Hong L. et al. Clinical and epidemiological features of 36 children with coronavirus disease 2019 (COVID-19) in Zhejiang, China: an observational cohort study. Lancet Infect. Dis. 2020; 20 (6): 689–696. DOI: 10.1016/S1473-3099(20)30198-5.

54. Xu Y., Li X., Zhu B. et al. Characteristics of pediatric SARSCoV-2 infection and potential evidence for persistent fecal viral shedding. Nat. Med. 2020; 26 (4): 502–505. DOI: 10.1038/s41591-020-0817-4.

55. Young B.E., Ong S.W., Kalimuddin S. et al. Epidemiologic features and clinical course of patients infected with SARSCoV-2 in Singapore. JAMA. 2020; 323 (15): 1488–1494. DOI: 10.1001/jama.2020.3204.

56. Cao Q., Chen Y.C., Chen C.L. et al. SARS-CoV-2 infection in children: Transmission dynamics and clinical characteristics. J. Formos. Med. Assoc. 2020; 119 (3): 670–673. DOI: 10.1016/j.jfma.2020.02.009.

57. Su L., Ma X., Yu H. et al. The different clinical characteristics of corona virus disease cases between children and their families in China – the character of children with COVID-19. Emerg. Microbes. Infect. 2020; 9 (1): 707–713. DOI: 10.1080/22221751.2020.1744483.

58. Stadnytskyi V., Bax C.E., Bax A. et al. The airborne lifetime of small speech droplets and their potential importance in SARS-CoV-2 transmission. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2020; 117 (22): 11875–11877. DOI: 10.1073/pnas.2006874117.

59. Zou L., Ruan F., Huang M. et al. Sars-Cov-2 viral load in upper respiratory specimens of infected patients. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (12): 1177–1179. DOI: 10.1056/NEJMc2001737.

60. Xu Y., Li X., Zhu B. et al. Characteristics of pediatric SARSCoV-2 infection and potential evidence for persistent fecal viral shedding. Nat. Med. 2020; 26 (4): 502–505. DOI: 10.1038/s41591-020-0817-4.

61. Holshue M.L., DeBolt C., Lindquist S. et al. First case of 2019 novel coronavirus in the United States. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (10): 929–936. DOI: 10.1056/NEJMoa2001191.

62. Zeng H., Хu С., Fan J. et al. Antibodies in infants born to mothers with COVID-19 pneumonia. JAMA. 2020; 323 (18): 1848–1849. DOI: 10.1001/jama.2020.4861.

63. Dong L., Tian J., He S. et al. Possible vertical transmission of SARS-CoV-2 from an infected mother to her newborn. JAMA. 2020; 323 (18): 1846–1848. DOI: 10.1001/jama.2020.4621.

64. Hosier H., Farkadian S., Morotti R.A. et al. SARS-CoV-2 infection of the placenta. MedRxiv. [Preprint. Posted: 2020, May 12]. DOI: 10.1101/2020.04.30.20083907.

65. Lackey K.A., Pace R.M., Williams J.E. SARS-CoV-2 and human milk: What is the evidence? Matern. Child Nutr. 2020; e13032. [Preprint. Posted: 2020, May 30]. DOI: 10.1111/mcn.13032.

66. Goldstein E., Lipsitch M. Temporal rise in the proportion of younger adults and older adolescents among coronavirus disease (COVID-19) cases following the introduction of physical distancing measures, Germany, March to April 2020. EuroSurveill. 2020; 25 (17): 2000596. DOI: 10.2807/15607917.ES.2020.25.17.2000596.

67. Guan W.J., Ni Z.Y., Hu Y. et al. Clinical characteristics of coronavirus disease 2019 in China. N. Engl. J. Med. 2020, 382 (18): 1708–1720. DOI: 10.1056/NEJMoa2002032.

68. Epidemiology Working Group for NCIP Epidemic Response, Chinese Center for Disease Control and Prevention. The epidemiological characteristics of an outbreak of 2019 novel coronavirus diseases (COVID-19) in China. Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 2020; 41 (2): 145–51. DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2020.02.003 (in Chinese).

69. World Health Organization. Coronavirus disease (COVID-2019) situation reports. Available at: https://www.who.int/emergencies/diseases/novel-coronavirus2019/situation-reports

70. Намазова-Баранова Л.С., Баранов А.А. Коронавирусная инфекция у детей (состояние на февраль 2020). Педиатрическая фармакология. 2020;17 (1): 7–11.

71. Таgarro A., Epalza С., Santos М. et al. Screening and severity of coronavirus disease 2019 (COVID-19) in children in Madrid, Spain. JAMA Pediatr. [Preprint. Posted: 2020, Apr. 8]. DOI: 10.1001/jamapediatrics.2020.1346.

72. Coronavirus (COVID-19) in India – statistics and facts. Published by Sandhya Keelery. Statista. 2020, Sep. 15. Available at: https://www.statista.com/topics/6135/coronavirus-covid-19-outbreak-in-india/

73. Gudbjartsson D.F., Helgason A., Jonsson H. et al. Spread of SARS-CoV-2 in the Icelandic population. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (24): 2302–2315. DOI: 10.1056/NEJMoa2006100.

74. Oran D.P., Topol E.J. Prevalence of asymptomatic SARSCoV-2 infection. Ann. Intern. Med. 2020; 173 (5): 362–367. DOI: 10.7326/M20-3012.

75. Faulconbridge G. Children with COVID-19 may be less contagious than adults, two UK epidemiologists say. Medscape. 2020, May 19. Available at: https://www.medscape.com/viewarticle/930763

76. Xia W., Shao J., Guo Y. et al. Clinical and CT features in pediatric patients with COVID-19 infection: Different points from adults. Pediatr. Pulmonol. 2020; 55 (5): 11691174. DOI: 10.1002/ppul.24718.

77. Chen Z.M., Fu J.F., Shu Q. et al. Diagnosis and treatment recommendations for pediatric respiratory infection caused by the 2019 novel coronavirus. World J. Pediatr. 2020; 16 (3): 240–246. DOI: 10.1007/s12519-020-00345-5.

78. Liu W., Zhang Q., Chen J. et al. Detection of COVID-19 in children in early January 2020 in Wuhan, China. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (14): 1370–1371. DOI: 10.1056/NEJMc2003717.

79. Zheng F., Liao C., Fan Q.H. et al. Clinical characteristics of children with coronavirus disease 2019 in Hubei, China. Curr. Med. Sci. 2020; 40 (2): 275–280. DOI: 10.1007/s11596-020-2172-6.

80. Henry B.M., Lippi G., Plebani M. Laboratory abnormalities in children with novel coronavirus disease 2019. Clin. Chem. Lab. Med. 2020; 58 (7): 1135–1138. DOI: 10.1515/cclm-2020-0272.

81. Chen N., Zhou M., Dong X. et al. Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan, China: a descriptive study. Lancet. 2020; 395 (10223): 507–513. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)30211-7.

82. Worcester S. COVID-19 characteristics differ in children vs adults. Medscape. 2020, Mar. 13. Available at: https://www.medscape.com/viewarticle/926805

83. Huang C., Wang Y., Li X. et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet. 2020; 395 (10223): 497–506. DOI: 10.1016/S01406736(20)30183-5.

84. Zhu N., Zhang D., Wang W. et al. A novel coronavirus from patients with pneumonia in China, 2019. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (8): 727–733. DOI: 10.1056/NEJMoa2001017.

85. Guan W., Ni Z., Hu Y. et al. Clinical characteristics of coronavirus disease 2019 in China. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (18): 1708–1720. DOI: 10.1056/NEJMoa2002032.

86. Baez D. Clinical findings of 6 children with COVID-19, risks factors associated with COVID-19 death, and detection of SARS-CoV-2 in different clinical specimens. 2020, Mar. 13. Available at: http://www.anmco.it/uploads/u_cms/media/2020/3/b0f67d369884729177067cdc663b497c.pdf

87. Lu X., Liqiong Z.L., Du H. et al. SARS-CoV-2 infection in children. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (17): 1663–1665. DOI: 10.1056/NEJMc2005073.

88. Chan J.F., Yuan S., Kok K. et al. A familial cluster of pneumonia associated with the 2019 novel coronavirus indicating person-to-person transmission: a study of a family cluster. Lancet. 2020; 395 (10223): 514–523. DOI: 10.1016/S01406736(20)30154-9.

89. Zhou F., Yu T., Du R. et al. Clinical course and risk factors for mortality of adult inpatients with COVID-19 in Wuhan, China: a retrospective cohort study. Lancet. 2020; 395 (10229): 1054–1062. DOI: 10.1016/S01406736(20)30566-3.

90. Zhang J., Dong X., Cao Y. et al. Clinical characteristics of 140 patients infected with SARS-CoV-2 in Wuhan, China. Allergy. 2020; 75 (7): 1730–1741. DOI: 10.1111/all.14238.

91. Dong Y., Мо Х., Нu Y. et al. Epidemiology of COVID-19 among children in China. Pediatrics. 2020; 145 (6): e20200702. DOI: 10.1542/peds.2020-0702.

92. Davies N.G., Klepac P., Liu Y. et al. Age-dependent effects in the transmission and control of COVID-19 epidemics. Nat. Med. 2020; 26 (8): 1205–1211. DOI: 10.1038/s41591020-0962-9.

93. Oran D.P., Topol E.J. Prevalence of asymptomatic SARSCoV-2 infection: A narrative review. Ann. Intern. Med. 2020, Sep. DOI: 10.7326/M20-3012.

94. Shekerdemian L.S., Mahmood N.R., Wolfe K.K. et al. Characteristics and outcomes of children with coronavirus disease 2019 (COVID-19) infection admitted to US and Canadian pediatric intensive care units. JAMA Pediatr. 2020; 174 (9): 868–873. DOI: 10.1001/jamapediatrics.2020.1948.

95. Boulos M.N., Geraghty E.M. Geographical tracking and mapping of coronavirus disease COVID-19 / severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) epidemic and associated events around the world: how 21 st century GIS technologies are supporting the global fight against outbreaks and epidemics. Int. J. Health Geogr. 2020; 19 (1): 8. DOI: 10.1186/s12942-020-00202-8.

96. Dashraath P., Jing Lin Jeslyn W., Mei Xian Karen L. et al. Coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic and pregnancy. Am. J. Obstet. Gynecol. 2020; 222 (6): 521–531. DOI: 10.1016/j.ajog.2020.03.021.

97. Wang W., Xu Y., Gao R. et al. Detection of SARS-CoV-2 in different types of clinical specimens. JAMA. 2020; 323 (18): 1843–1844. DOI: 10.1001/jama.2020.3786.

98. Chen H., Guo J., Wang C. et al. Clinical characteristics and intrauterine vertical transmission potential of COVID-19 infection in nine pregnant women: a retrospective review of medical records. Lancet. 2020; 395 (10226): 809–815. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)30360-3.

99. Coronavirus suspicion: 7-month-old baby sent to Dhaka from isolation ward in Kushtia. The Daily Star. 2020, Mar. 26. Available at: https://www.thedailystar.net/coronavirus-suspicion-in-kushtia-7-month-old-baby-isolation-ward-1886209

100. World Health Organization. COVID-19 and breatfeeding. Available at: https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/breastfeeding-and-covid-19

101. Zeng L., Xia S., Yuan W. et al. Neonatal early-onset infection with SARS-CoV-2 in 33 neonates воrn to mothers with COVID-19 in Wuhan, China. JAMA Pediatrics. 2020; 174 (7): 722–725. DOI: 10.1001/jamapediatrics.2020.0878.

102. Marzano A.V., Genovese G., Fabbrocini G. et al. Varicellalike exanthem as a specific COVID-19-associated skin manifestation: multicenter case series of 22 patients. J. Am. Acad. Dermatol. 2020; 83 (1): 280–285. DOI: 10.1016/j.jaad.2020.04.044.

103. Genovese G., Colonna C., Marzano A.V. Varicella-like exanthem associated with COVID-19 in an 8-year-old girl: a diagnostic clue? Pediatr. Dermatol. 2020; 37 (3): 435–436. DOI: 10.1111/pde.14201.

104. Moore J.T., Ricaldi J.N., Rose C.E. et al. Disparities in incidence of COVID-19 among underrepresented racial/ ethnic groups in counties identified as hotspots during June 5–18, 2020 – 22 States, February–June 2020. MMWR. Morb. Mortal. Wkly Rep. 2020; 69 (33): 1122–1126. DOI: 10.15585/mmwr.mm6933e1.

105. Politi L.S., Salsano E., Grimaldi M. Magnetic resonance imaging alteration of the brain in a patient with coronavirus disease 2019 (COVID-19) and anosmia. JAMA Neurol. 2020; 77 (8): 1028–1029. DOI: 10.1001/jamaneurol.2020.2125.

106. Benameur K., Agarwal A., Auld S.C. et al. Encephalopathy and encephalitis associated with cerebrospinal fluid cytokine alterations and coronavirus disease, Atlanta, Georgia, USA, 2020. Emerg. Infect. Dis. 2020; 26 (9): 2016–221. DOI: 10.3201/eid2609.202122.

107. Mao L., Jin H., Wang M. et al. Neurologic manifestations of hospitalized patients with coronavirus disease 2019 in Wuhan, China. JAMA Neurol. 2020; 77 (6): 683–690. DOI: 10.1001/jamaneurol.2020.1127.

108. Zubair A.S., McAlpine L.S., Gardin T. et al. Neuropathogenesis and neurologic manifestations of the coronaviruses in the age of coronavirus disease 2019: A review. JAMA Neurol. 2020; 77 (8): 1018–1027. DOI: 10.1001/jamaneurol.2020.2065.

109. Postolashe T.T., Benros M.E., Brenner L.A. Targetable biological mechanisms implicated in emergent psychiatric conditions associated with SARS-CoV-2 infection. JAMA Psychiatry. [Preprint. Posted: 2020, Jul. 31]. DOI: 10.1001/jamapsychiatry.2020.2795.

110. Guo L., Ren L., Yang S. et at. Profiting early humoral response to diagnose novel coronavirus disease (COVID-19). Clin. Infect. Dis. 2020; 71 (15): 778–785. DOI: 10.1093/cid/ciaa310.

111. Gao Y., Li T., Han M. et al. Diagnostic utility of clinical laboratory data determinations for patients with the severe COVID-19. J. Med. Virol. 2020; 92 (7): 791–796. DOI: 10.1002/jmv.25770.

112. Cummings M.J., Baldwin M.R., Abrams D. et al. Epidemiology, clinical course, and outcomes of critically ill adults with COVID-19 in New York City: a prospective cohort study. Lancet. 2020; 395 (10239): 1763–1770. DOI: 10.1016/S0140-6736(20)31189-2.

113. Li W., Cui H., Li K. et al. Chest computed tomography in children with COVID-19 respiratory infection. Pediatr. Radiol. 2020; 50 (6): 796–799. DOI: 10.1007/s00247-020-04656-7.

114. DeBiasi R.L., Song X., Delaney M. et al. Severe COVID19 in children and young adults in the Washington, DC Metropolitan Region. J. Pediatr. 2020; 223: 199–203.e1. DOI: 10.1016/j.jpeds.2020.05.007.

115. D’Antiga L. Coronavimses and immunosuppressed patients: The facts during the third epidemic. Liver Transpl. 2020; 26 (6): 832–834. DOI: 10.1002/lt.25756.

116. Shuang Liu, Yuxiang Zhi, Sun Ying. COVID-19 and asthma: Reflection during the pandemic. Clin. Rev. Allergy Immunol. 2020; 59 (1): 78–88. DOI: 10.1007/s12016-020-08797-3.

117. Gianfrancesco M., Hyrich K.L., Al-Adely S. et al. Characteristics associated with hospitalisation for COVID19 in people with rheumatic disease: data from the COVID19 Global Rheumatology Alliance physician-reported registry. Ann. Rheum. Dis. 2020; 79 (7): 859–866. DOI: 10.1136/annrheumdis-2020-217871.

118. Price E., MacPhie E., Kay L. et al. Identifying rheumatic disease patients at high risk and requiring shielding during the COVID-19 pandemic. Clin. Med. 2020; 20 (3): 290–291. DOI: 10.7861/clinmed.2020-0160.

119. Louapre C., Collongues N., Stankoff B. et al. Clinical characteristics and outcomes in patients with coronavirus disease 2019 and multiple sclerosis. JAMA Neurol. 2020; 77 (9): 1079. DOI: 10.1001/jamaneurol.2020.2581.

120. Rasmussen S.A., Smulian J.C., Lednicky J.A. et al. Coronavirus disease 2019 (COVID-19) and pregnancy: What obstetricians need to know. Am. J. Obstet. Gynecol. 2020; 222 (5): 415–426. DOI: 10.1016/j.ajog.2020.02.017.

121. Parazzini F., Bortolus R., Mauri P.A. et al. Delivery in pregnant women infected with SARS-CoV-2: A fast review. Int. J. Gynaecol. Obstet. 2020; 150 (1): 41–46. DOI: 10.1002/ijgo.13166.

122. Yang Z., Liu Y. vertical transmission of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2: A systematic review. Am. J. Perinatol. 2020; 37 (10): 1055–1060. DOI: 10.1055/s-00401712161.

123. Li Y., Zhao R., Zheng S. et al. Lack of vertical transmission of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, China. Emerg. Infect. Dis. 2020; 26 (6): 1335–1336. DOI: 10.3201/eid2606.200287.

124. Lu Q., Shi Y. Coronavirus disease (COVID-19) and neonate: What neonatologist need to know. J. Med. Virol. 2020; 92 (6): 564–567. DOI: 10.1002/jmv.25740.

125. Zhu H., Wang L., Fang C. et al. Clinical analysis of 10 neonates born to mothers with 2019-nCoV pneumonia. Transl. Pediatr. 2020; 9 (1): 51–60. DOI: 10.21037/tp.2020.02.06.

126. Cui Y., Tian M., Huang D. et al. A 55-day-old female infant infected with COVID 19: Presenting with pneumonia, liver injury, and heart damage. J. Infect. Dis. 2020; 221 (11): 1775–1781. DOI: 10.1093/infdis/jiaa113.

127. COVID-19 Treatment Guidelines. Coronavirus disease 2019 (COVID-19) treatment guidelines. Available at: https://www.covid19treatmentguidelines.nih.gov [Accessed: June 29, 2020].

128. Boulware D.R., Pullen M.F., Bangdiwala A.S. et al. A randomized trial of hydroxychloroquine as postexposure prophylaxis for COVID-19. N. Engl. J. Med. 2020; 383 (6): 517–525. DOI: 10.1056/NEJMoa2016638.

129. FitzGerald G.A. Misguided drug advice for COVID-19. Science. 2020; 367 (6485): 1434. DOI: 10.1126/science.abb8034.

130. Sheahan T.P., Sims A.C., Leist S.R. et al. Comparative therapeutic efficacy of remdesivir and combination lopinavir, ritonavir, and interferon beta against MERS-CoV. Nat. Commun. 2020; 11 (1): 222. DOI: 10.1038/s41467-019-13940-6.

131. Martinez M.A. Compounds with therapeutic potential against novel respiratory 2019 coronavirus. Antimicrob. Agents Chemother. 2020; 64 (5): e00399-20. DOI: 10.1128/AAC.00399-20.

132. Сао В., Wang Y., Wen D. et al. A trial of lopinavir-ritonavir in adults hospitalized with severe COVID-19. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (19): 1787–1799. DOI: 10.1056/NEJMoa2001282.

133. Grein J., Ohmagari N., Shin D. et al. Compassionate use of remdesivir for patients with severe COVID-19. N. Engl. J. Med. 2020; 382 (24): 2327–2336. DOI: 10.1056/NEJMoa2007016.

134. Gautret P., Lagier J., Parola P. et al. Hydroxychloroquine and azithromycin as a treatment of COVID-19: results of an open-label non-randomized clinical trial. Int. J. Antimicrob. Agents. 2020; 56 (1): 105949. DOI: 10.1016/j.ijantimicag.2020.105949.

135. Chang R., Sun W. Repositioning chloroquine as ideal antiviral prophylactic against COVID-19 – time is now. Preprints. [Preprint. Posted: 2020, Mar. 17]. DOI: 10.20944/preprints202003.0279.v1.

136. Advisory on the use of hydroxy-chloroquine as prophylaxis for SARS-CoV-2 infection. Scribd. Available at: https://ru.scribd.com/document/452876030/Advisory-on-the-Use-ofHydroxy-chloroquin-as-Prophylaxis-for-SARS-CoV-2-Infection-1

137. Velthuis A.J., van den Worm S.H., Sims A.C. et al. Zn2+ Inhibits coronavirus and arterivirus RNA polymerase activity in vitro and zinc ionophores block the replication of these viruses in cell culture. PLoS Pathog. 2010; 6 (11): e1001176. DOI: 10.1371/journal.ppat.1001176.

138. Santoli J.M., Lindley M.C., DeSilva M.B. et al. Effects of the COVID-19 pandemic on routine pediatric vaccine ordering and administration – United States, 2020. MMWR. Morb. Mortal. Weekly Rep. 2020; 69 (19): 591–593. DOI: 10.15585/mmwr.mm6919e2.

139. Gellin B. Why vaccine rumours stick – and getting them unstuck. Lancet. 2020; 396 (10247): 303–304. DOI: 10.1016/s0140-6736(20)31640-8.

140. Bramer C.A., Kimmins L.M., Swanson R. et al. Decline in child vaccination coverage during the COVID-19 pandemic – Michigan Care Improvement Registry, May 2016 May 2020. Am. J. Transplant. 2020; 20 (7): 1930–1931. DOI: 10.1111/ajt.16112.

141. Bousquet J., Anto J.M., Iaccarino G. et al. Is diet partly responsible for differences in COVID-19 death rates between and within countries? Clin. Transl. Allergy. 2020; 10 (1): 16. DOI: 10.1186/s13601-020-00323-0.

142. Parikh P.A., Shah B.V., Phatak A.G. et al. COVID-19 pandemic: Knowledge and perceptions of the public and healthcare professionals. Cureus. 2020; 12 (5): e8144. DOI: 10.7759/cureus.8144.

Топорик Berghoff Redwood 30,5 см 1307154

Топорик от бельгийского всемирно известного бренда Berghoff из линейки Redwood изготовлен из высококачественной пищевой нержавеющей стали х30Сr14 — прочной, износостойкой, максимально устойчивым к корозии. Такая сталь не темнеет и не тускнеет со временем при правильном уходе. Рукоятка ножа выполнена из  натуральной древесины, и благодаря специальной обработке имеет влагоотталкивающие свойства, не впитывает жир.

Структура покрытия не позволяет ножу скользить в руке. Также у рукоятки удобная, эргономичная форма, с выемками для безопасного и удобного захвата. Крепится к лезвию при помощи заклепок. Такой топорик очень удобен для шинковки и нарезки, его широкое лезвие можно использовать и как лопатку, поддевая нарезанные продукты и отправляя их сразу на сковороду или в кастрюлю. Не требует особого ухода, легко чистится. Рекомендуется мыть вручную. 

• Материал: нержавеющая сталь(x30Cr13)
• Вес: 0,5 кг
• Ширина лезвия: 30,5 см
• Рукоятка:дерево
• Размер: 30,5 x 7,5 x 2 см
• Твердость ca. 52 HRC

• Материал: нержавеющая сталь(x30Cr13)
• Вес: 0,5 кг
• Ширина лезвия: 30,5 см
• Рукоятка:дерево
• Размер: 30,5 x 7,5 x 2 см
• Твердость ca. 52 HRC

У вас есть возможность получить заказ в нашем шоуруме. Для этого необходимо оформить заказ на сайте или по телефону. Когда ваш заказ будет готов к выдаче, вы получите sms-сообщение.

Шоурум находится в центре Киева, по адресу Киев, ТЦ «Бессарабский квартал»

Если вас заинтересовал один из доступных товаров в шоуруме, обязательно зарезервируйте товар.

Способы оплаты при самовывозе:

• Наличными
• Картами Visa и MasterCard
• Безналичная оплата

Курьером по Киеву

Доставка по Киеву осуществляется с понедельника по субботу, с 10:00 до 20:00

При заказе от 400 грн доставка в пределах Киева бесплатная.

Стоимость доставки заказа до 400 грн в пределах Киева составляет 30 грн.

Доставить ваш заказ мы стараемся максимально быстро. Как правило, доставляем в день поступления заказа или на следующий день (при наличии товара на ближайшем складе).

Менеджер при подтверждении заказа согласует с вами удобный для вас временной интервал и условия  доставки.

Способы оплаты:

• Наличными
• Предоплата Privat24
• Безналичная оплата

По Украине

По Украине доставка осуществляется компанией «Новая почта» на удобное Вам отделение.

Срок доставки, как правило, 1-2 дня с момента отправки.

При заказе от 800 грн доставка по Украине Новой Почтой бесплатная.

Стоимость доставки заказа до 800 грн «Новой почтой» наложенным платежом: 80 грн

Стоимость доставки заказа «Новой почтой» с предоплатой (Приват 24): бесплатная

Способы оплаты:

• Наличными при получении. На почтовом отделении вы сможете осмотреть товар в присутствии работника «Новой Почты».
• Предоплата Privat24
• Безналичная оплата

Ершенные гвозди оцинкованные SHINGLAS, 30х3,5 мм, 5 кг (Комплектация)

Ершенные гвозди оцинкованные SHINGLAS, 30х3,5 мм, 5 кг

Гвозди с кольцевой накаткой и цинковым покрытием. Кольцевая накатка увеличивает прочность крепления в 5 раз.

Гвозди с кольцевой накаткой и цинковым покрытием. Кольцевая накатка увеличивает прочность крепления в 5 раз.

• Доставка

  Быстрая доставка по России

• Безопасность платежа

  технология 3D Secure для карт VISA и Mastercard Secure Code

• Гарантия качества

  прямая покупка от производителя

Facebook

Одноклассники

Вконтакте

• Показатель
• Значение

• Бренд
• ТехноНИКОЛЬ

• Страна происхождения
• Россия

• Вид кровли
• Скатная

Используются для закрепления гибкой черепицы на кровле.

Ершенные гвозди оцинкованные SHINGLAS, 30х3,5 мм, 5 кг

Об этом товаре отзывов пока нет. Оставьте первым!

There are no reviews yet

Псалом 30: 5 Ибо гнев Его скоротечен, но милость Его длится всю жизнь. Плач может остаться на ночь, но утром приходит радость.

часов — сколько часов между часами?

Используйте этот калькулятор, чтобы легко вычислить разницу в часов и между двумя заданными временами в течение дня с точностью до минуты. Он также покажет вам результат в минутах, если расчет часа вам не удобен. Если вам интересно, сколько часов вы тратите на определенные виды деятельности (например, сколько часов я работаю?), Это калькулятор часов для вас.

Быстрая навигация:

1. Как рассчитать часы между временами?
2. Сколько часов?

Этот простой онлайн-инструмент позволяет легко рассчитать разницу в часах и минутах между двумя заданными временами. Чтобы рассчитать часы и минуты, содержащиеся в периоде времени, вам необходимо знать его начало и конец. Калькулятор часов будет использовать формат времени в зависимости от настроек вашего браузера, например США, Великобритания.

После того, как вы укажете начало и конец интересующего вас периода времени, вы просто нажмите кнопку «Рассчитать разницу».Ниже вы получите разницы как за полных часов , так и за минут . Если первый час, который вы вводите, позже в течение дня, чем второй час, который вы вводите, разница во времени рассчитывается так, как если бы первый час приходился на сегодняшний день, а второй — на завтра. Например, введя в калькуляторе время начала 18:00 и время окончания 8:00, он вычислит разницу в часах, минутах и ​​секундах с 18:00 сегодня до 8:00 завтра (14 часов).

Этот калькулятор количества часов между двумя временами может использоваться, чтобы узнать, сколько времени вы проработали, чтобы заполнить табели учета рабочего времени. Например, сколько часов длится с 21 до 17:30 (или с 9:00 до 17:30)? Вам просто нужно ввести два раза в любом порядке и нажать «Рассчитать». Результатом будет 8 часов 30 минут (8:30 часов или 8,5 часов в десятичной системе) или 510 минут. Между этими временами есть 8 полных часов. Он также поддерживает вычитание перерывов на обед и других типов пауз из общего количества часов между ними. Для получения дополнительной информации см. Обеденные перерывы.

Многие люди, работающие в определенное время, хотят узнать продолжительность своего рабочего дня.Если вам также интересно, «сколько часов я работаю?» а вы на работе с 9 утра до 5 вечера, тогда вопрос в том, сколько часов у вас с 9 до 5. Ответ — ровно восемь часов.

Если вы оставите своих детей рано в школе и заберете их после обеда, вы можете задаться вопросом, сколько времени они проводят в школе каждый день. Если вы оставите их в 7 утра и заберете в 3 часа дня, тогда вопрос будет в том, сколько часов с 7 утра до 3 вечера, и ответ будет восемь часов (15-7 = 8).

Вот еще несколько примеров расчета количества часов между двумя указанными точками времени.Вы можете использовать наш калькулятор часов выше, чтобы вычислить время между любыми двумя произвольными часами и минутами.

Время работы без обеденного перерыва

Если вы используете наш калькулятор, чтобы понять, сколько часов вы работаете, вам необходимо использовать функцию, которая позволяет вычесть перерыв на обед или другие типы перерывов смены, чтобы получить только количество рабочих часов .Например, рабочий день с 7:30 до 4:30 с 30-минутным перерывом на обед означает рабочий день 8,5 часов (9 часов между ними, минус 30 минут или 0,5 часа равны 8,5). Если вы работаете посменно, ваш перерыв может не быть перерывом на обед, и вам также может быть разрешено несколько перерывов. В таком случае сложите общее время отдыха и введите его в поле (в минутах).

Возможность указать общее время перерыва также полезна при расчете физической активности с интервалами перерыва, например интенсивная тренировка в течение одного часа, затем 15-минутный перерыв, а затем еще час упражнений.

Европейцы и американцы определяют время по-разному, как в том, как оно сказано, так и в том, как оно написано. Гражданские лица в Америке используют часы до 12 два раза в день, а европейцы — с 00:00 до 23:59. По этой причине в Америке люди используют pm и am , чтобы различать, о какой половине дня они говорят. С другой стороны, большинство европейцев, вероятно, скажут 15:00 (вместо 15:00) .Чтобы еще больше усложнить задачу для гостей из-за границы, многие европейцы также сказали бы 3 дня .

Если вы новичок в Европе и вам нужно иметь дело с «военное время» , все, что вам нужно сделать, это использовать часы до 12 таким же образом и после 13:00 либо прибавить, либо вычесть 12 , положив часов. после результата. Например, , если вы встречаетесь с кем-то в 17:30, это будет 17:30 — 12 = 17:30 . Если вам нужно узнать, что написать коллеге, с которым вы хотите встретиться в 14:00, это будет 2 + 12 = 14:00.

Ради точности, следует отметить, что европейское время, хотя и похоже на него, не совсем военное время. В армии 18:00 (18:00) будет 1800. В одном случае это «восемнадцать часов», в другом — «тысяча восемьсот». В военных 7:00 (7:00) будет «ноль семьсот» или «семьсот» (07:00), в то время как гражданские лица в Европе просто скажут «семь». Более строгий военный способ передачи времени обусловлен критическими условиями, в которых оно используется.Ошибочное указание часа или минуты действия может привести к гибели людей …

Псалом 30: 5 Значение стиха и простой комментарий — ConnectUS

Псалом 30: 5
«Ибо его гнев длится только мгновение, а его благосклонность длится всю жизнь; плач может остаться на ночь, но радость приходит утром ».

Объяснение и комментарий к Псалму 30: 5

Царь Давид был возвращен из края отчаяния Богом, который спас его. Неясно, в чем именно был грех или падение Давида в данном случае, но есть из чего выбрать в историях его жизни, приведенных в книгах по истории Ветхого Завета.

Очевидно, что Бог любил Давида и считал его «человеком по сердцу его» (Деяния 13:22), и это еще одна причина для Бога наказать Давида, когда он отвернулся от Бога в своем грехе. Давид переживал своего Небесного Отца, что он справедлив и милосерден, и что вся дисциплина Бога необходима и полезна для того, чтобы следовать за Богом и расти в Его подобии.

Если вы испытываете Божью дисциплину и обнаруживаете, что можете покаяться, сделайте это быстро. Или, может быть, вы страдаете, не зная о грехе с вашей стороны.Бог милостив. Молитесь об избавлении, но также молитесь, чтобы ваш Отец завершил ту очищающую работу, которую он делает в вас через испытание.

Разбор основных частей Псалма 30: 5

# 1 «Ибо его гнев длится только мгновение»,
Хороший отец будет злиться ровно настолько, насколько это необходимо для обучения ребенка. Бог выражает не неконтролируемые человеческие эмоции, а праведное негодование по поводу греха и мятежа. Бог желает не злиться, а восстановить правильные отношения со своими детьми.Его гнев в этом контексте выражается в его любящей и эффективной дисциплине.

# 2 «но его благосклонность длится всю жизнь;
Даже Божья дисциплина проистекает из Его благосклонности. Давид наслаждается верными обещаниями Бога о том, что он вечно благословит свое потомство. Действительно, его обещание Давиду простирается до вечного престола его Сына, Иисуса Христа, Царя царей и Господа господствующих. Его благосклонность к нам во Христе столь же непреложна и вечна.

# 3 «плач может остаться на ночь, но радость приходит утром.
Когда вы находитесь в бездне плача, обнадеживайте, что ваш плач, когда он сопровождается надлежащей скорбью о грехе, приведет к радости, когда наступит утро. Пророки не уклоняются от того, чтобы рассказать правду о Божьем суде за грех, но они также верны в том, чтобы рассказать о Божьих обещаниях восстановления для его возлюбленной невесты, его Церкви (Амо 9:14; Ос 6: 1; Ис 61: 7).

Эксперт Обзор псалмов

Библейские переводы псалмов 30: 5

NIV
Потому что его гнев длится только мгновение, но его благосклонность длится всю жизнь; плач может остаться на ночь, но радость приходит утром.

NLT
Потому что его гнев длится только мгновение, а его благосклонность длится всю жизнь! Плач может длиться всю ночь, но радость приходит с утром.

ESV
Потому что его гнев лишь на мгновение, а его благосклонность — на всю жизнь. Плач может задержаться на ночь, но с утром приходит радость.

KJV
Гнев его длится лишь мгновение; в его пользу жизнь: плач может длиться ночь, но радость приходит утром.

NKJV
Ибо гнев Его лишь на мгновение, Его благосклонность — на всю жизнь; Плач может длиться ночь, Но радость приходит утром.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Построение филогенетических деревьев на основе молекулярных данных с помощью MEGA | Молекулярная биология и эволюция

Аннотация

Филогенетический анализ иногда рассматривается как устрашающий и сложный процесс, требующий специальных знаний и многолетнего опыта.Фактически, это довольно простой процесс, который можно быстро изучить и эффективно применять. Этот протокол описывает несколько шагов, необходимых для создания филогенетического дерева из молекулярных данных для новичков. В проиллюстрированном здесь примере программа MEGA используется для реализации всех этих шагов, тем самым устраняя необходимость изучения нескольких программ и работы с несколькими форматами файлов от одного шага к другому (Tamura K, Peterson D, Peterson N, Stecher G , Ней М., Кумар С. 2011. MEGA5: анализ молекулярной эволюционной генетики с использованием методов максимального правдоподобия, эволюционного расстояния и максимальной экономии. Мол Биол Эвол . 28: 2731–2739). Первый шаг — идентификация набора гомологичных последовательностей и загрузка этих последовательностей — выполняется собственным браузером MEGA, созданным на основе набора инструментов Google Chrome. Для второго этапа, выравнивания этих последовательностей, MEGA предлагает два разных алгоритма: ClustalW и MUSCLE. Для третьего шага, построения филогенетического дерева из выровненных последовательностей, MEGA предлагает множество различных методов. Здесь мы проиллюстрируем метод максимального правдоподобия, начиная с функции MEGA Models, которая позволяет выбрать наиболее подходящую модель замещения.Наконец, MEGA предоставляет мощный и гибкий интерфейс для последнего шага, фактически отрисовывая дерево для публикации. Здесь пошаговый протокол представлен достаточно подробно, чтобы позволить новичку начать с интересующей последовательности и построить дерево качества публикации, иллюстрирующее эволюцию соответствующего набора гомологов этой последовательности. MEGA доступна для использования на ПК и Mac на сайте www.megasoftware.net.

Протокол

Филогенетическое дерево — это оценка взаимоотношений между таксонами (или последовательностями) и их гипотетическими общими предками (Nei and Kumar 2000; Felsenstein 2004; Hall 2011).Сегодня большинство филогенетических деревьев построено на основе молекулярных данных: последовательностей ДНК или белков. Первоначально цель большинства молекулярных филогенетических деревьев заключалась в оценке взаимосвязей между видами, представленными этими последовательностями, но сегодня цели расширились и теперь включают понимание взаимосвязей между самими последовательностями без учета вида-хозяина, а также определение функций генов, которые не были изучены экспериментально (Hall et al. 2009), и выясняют механизмы, которые приводят к вспышкам микробов (Hall and Barlow 2006) среди многих других.Для построения филогенетического дерева требуется четыре отдельных шага: (шаг 1) идентификация и получение набора гомологичных последовательностей ДНК или белков, (шаг 2) выравнивание этих последовательностей, (шаг 3) оценка дерева по выровненным последовательностям и (шаг 4) представьте это дерево таким образом, чтобы ясно донести соответствующую информацию до других.

Обычно вы используете свой любимый веб-браузер для идентификации и загрузки гомологичных последовательностей из национальной базы данных, такой как GenBank, затем одну из нескольких программ выравнивания для выравнивания последовательностей, а затем одну из многих возможных филогенетических программ для оценки дерева и наконец, программа для рисования дерева для исследования и публикации.Каждая программа будет иметь свой собственный интерфейс и свой собственный требуемый формат файла, что заставит вас взаимно конвертировать файлы при перемещении информации из одной программы в другую. Неудивительно, что филогенетический анализ иногда пугает!

MEGA5 (Tamura et al. 2011) — это интегрированная программа, которая выполняет все четыре шага в единой среде с единым пользовательским интерфейсом, исключающим необходимость взаимного преобразования форматов файлов. В то же время MEGA5 достаточно гибок, чтобы при желании можно было использовать другие программы для определенных шагов.Таким образом, MEGA5 особенно хорошо подходит для тех, кто менее знаком с оценкой филогенетических деревьев.

Шаг 1. Получение последовательностей

По иронии судьбы, первый шаг является наиболее интеллектуальным, но зачастую ему уделяется меньше всего внимания. Если все сделано неправильно, дерево будет недействительным или его невозможно будет интерпретировать, или и то, и другое. Если все сделано с умом, оставшиеся шаги будут простыми, по сути механическими, операциями, результатом которых станет надежное осмысленное дерево.

Часто исследователя интересует конкретный ген или белок, который был предметом исследования, и он хочет определить родство этого гена или белка с его гомологами. Слово «гомологи» здесь ключевое. Основное предположение филогенетического анализа состоит в том, что все последовательности на дереве гомологичны, то есть происходят от общего предка. Программы выравнивания будут выравнивать последовательности, гомологичные или нет. Все программы построения дерева сделают дерево из этого выравнивания.Однако, если последовательности на самом деле не происходят от общего предка, дерево будет бессмысленным и вполне может вводить в заблуждение. Самый надежный способ идентифицировать последовательности, гомологичные интересующей последовательности, — это выполнить поиск с помощью инструмента поиска базового локального выравнивания (BLAST) (Altschul et al. 1997), используя интересующую последовательность в качестве запроса.

Шаг 1.1

При запуске MEGA5 открывается главное окно MEGA5. В меню Align выберите Do Blast Search .MEGA5 открывает собственное окно браузера, чтобы показать страницу нуклеотидного BLAST из Национального центра биотехнологической информации (NCBI). В верхней части страницы находится набор из пяти вкладок (blastn, blastp, blastx, tblastn и tblastx). По умолчанию выбрана вкладка blastn (Standard Nucleotide BLAST). Если ваша последовательность является последовательностью белка, щелкните вкладку blastp , чтобы открыть страницу Standard Protein BLAST.

Обратите внимание, что NCBI часто меняет внешний вид страницы BLAST, поэтому он может отличаться в некоторых деталях от описанного здесь.

Имеется большое текстовое поле ( Введите инвентарный номер …), в котором вы вводите интересующую последовательность. Вы можете вставить последовательность запроса прямо в это поле. Однако, если ваша последовательность запросов уже находится в одной из баз данных, вы можете вставить ее инвентарный номер или номер gi. Если ваша последовательность ДНК является частью последовательности генома, вы можете ввести инвентарный номер генома, затем в полях справа ( Поддиапазон запроса ) введите диапазон оснований, составляющих вашу последовательность.(Вы действительно не хотите использовать последовательность в несколько мегабаз в качестве запроса!)

Средняя часть страницы позволяет вам выбрать базы данных, в которых будет выполняться поиск, и ограничить этот поиск, если вы того пожелаете. По умолчанию — Nucleotide collection (nr / nt) , но раскрывающееся текстовое поле с треугольником позволяет вам выбирать среди большого количества альтернатив, например, геном человека или геном NCBI.

Дополнительное текстовое поле Организмы позволяет ограничить поиск конкретным организмом или исключить конкретный организм.Например, если ваша последовательность принадлежит людям, вы можете исключить людей из поиска, чтобы не подобрать много человеческих вариантов, когда вас действительно интересуют гомологи у других видов. Чтобы включить больше организмов, щелкните маленький знак + рядом с полем параметров.

Параметр «Исключить» позволяет исключить, например, образцы окружающей среды.

Шаг 1.2: Какой алгоритм BLAST использовать?

В нижней части страницы вы можете выбрать тот вариант BLAST, который лучше всего подходит для ваших целей.Для нуклеотидов выбор — мегабласт для очень похожих последовательностей, несмежный мегабласт для более разнородных последовательностей или blastn для несколько похожих последовательностей. По умолчанию используется blastn, но если вас интересует только идентификация близкородственных гомологов, отметьте megablast. Это первый выбор, который действительно требует некоторого размышления. Последовательности, которые будут на вашем дереве, во многом определяются выбором, который вы делаете на этом этапе.

В самом низу страницы нажмите кнопку BLAST, чтобы начать поиск; не ставьте галочку в поле «показывать результаты в новом окне».Появится окно результатов, возможно, с графиком, иллюстрирующим идентифицированные домены, обычно с заявлением, похожим на «эта страница будет автоматически обновлена ​​через 5 секунд». В конце концов, появится окно с окончательными результатами. На верхней панели приведены свойства последовательностей запросов и описание базы данных, в которой был выполнен поиск. Ниже приведен график, который иллюстрирует выравнивание для 100 лучших «совпадений» (последовательностей, идентифицированных при поиске). Прокрутите вниз, чтобы увидеть список последовательностей, дающих значительные оценки выравнивания.Для каждой последовательности есть номер доступа (ссылка, которую можно щелкнуть), описание, максимальный балл (также интерактивная ссылка), общий балл, охват запроса, а также значение E и максимальный идентификатор. Вы используете эту информацию, чтобы решить, какую из этих последовательностей добавить к вашему выравниванию и, таким образом, включить в ваше дерево.

Описание помогает решить, интересует ли вас эта конкретная последовательность. Может быть несколько последовательностей одного и того же вида; вы хотите все это или, возможно, только одного представителя вида или даже рода? Если вас, возможно, интересует эта последовательность, посмотрите Охват запросов.Вас интересует гомолог, который соответствует только 69% запроса? Если нет, проигнорируйте эту последовательность и двигайтесь дальше. Вас интересует последовательность, на 100% идентичная вашему запросу? Если вас интересуют только более отдаленные гомологи, возможно, вас это не интересует. Если вы хотите получить максимально инклюзивное дерево, вы можете это сделать. Вы, , должны решить; не существует алгоритма, который подскажет, что включить.

Если вы решите, что вас интересует последовательность совпадений, щелкните ссылку « Max score », чтобы перейти к серии выравниваний.То, что вы увидите, зависит от того, был ли ваш запрос последовательностью ДНК или белковой последовательностью.

Шаг 1.3: Последовательности ДНК

Согласование запроса с обращением начинается со ссылки на файл последовательности через его gi и номера доступа. Если эта ссылка связана с последовательностью генома или даже с большим файлом, который включает последовательности нескольких генов, вы не захотите включать всю последовательность в выравнивание. Есть два способа решить эту проблему. 1) Посмотрите на само выравнивание и обратите внимание на диапазон нуклеотидов в испытуемом.Обязательно обратите внимание на то, совпадает ли запрос с самой последовательностью темы ( Strand = плюс / плюс ) или с ее дополнением ( Strand = плюс / минус ). Щелкните ссылку, чтобы открыть файл последовательности. Вверху справа щелкните треугольник в сером поле Изменить область, показанном , затем введите первый и последний нуклеотиды диапазона, затем нажмите кнопку Обновить представление . В серой области Настроить представление ниже отметьте поле Показать последовательность , и если Strand = плюс / минус также отметьте поле Показать обратное дополнение , затем нажмите кнопку «Обновить представление».Наконец, нажмите кнопку « Добавить к трассе » (красный крест) в верхней части окна. (2) Если ваш запрос представляет собой последовательность кодирования или какую-либо другую примечательную функцию, вы можете увидеть функции в этой части тематической последовательности: сразу под описанием последовательности со ссылкой на функцию. Щелкните эту ссылку функции, чтобы открыть файл последовательности, уже показывающий интересующую область. Убедитесь, что показанная последовательность является обратным дополнением запроса, и, если она установлена, отметьте поле Показать обратное дополнение в области Настроить вид , обновите вид, затем нажмите кнопку Добавить к выравниванию ( красный крест) в верхней части окна.

Шаг 1.31 . Когда вы нажимаете кнопку Add to Alignment , открывается окно MEGA5 Alignment Explorer , и в это окно добавляется последовательность. После добавления последовательности в Alignment Explorer используйте стрелку назад в окне BLAST, чтобы вернуться к списку гомологичных последовательностей и добавить другую интересующую последовательность.

Шаг 1.4: Белковые последовательности

Основное отличие от поиска нуклеотидов состоит в том, что вы можете видеть ссылки с номерами доступа на несколько файлов последовательностей белков.Все они имеют одинаковую аминокислотную последовательность, хотя лежащие в их основе кодирующие последовательности могут отличаться. Щелкните любую из ссылок, чтобы открыть файл последовательности белка, затем нажмите кнопку Добавить к выравниванию .

Вещи, которые могут пойти не так

1. Вы можете обнаружить, что все совпадения, полученные в результате вашего поиска, принадлежат очень близкородственным организмам; то есть, если вашим запросом был белок E scherichia coli , все совпадения могут быть из E.coli, Salmonella и близкородственные виды. Если все совпадения показывают высокую максимальную идентичность, и вы почти уверены, что последовательность встречается в более отдаленно связанных последовательностях, вы, вероятно, столкнулись с максимальным значением по умолчанию, равным 100 целевым последовательностям. Повторите поиск, но перед тем, как вы нажмете кнопку BLAST, чтобы начать поиск, обратите внимание, что сразу под этой кнопкой находится загадочная строка « + параметры алгоритма ». Щелкните значок плюса, чтобы открыть другой раздел страницы настройки BLAST.Установите Max Target Sequences на большее значение и повторите поиск. Вы также можете исключить некоторые близкородственные виды в разделе «Выбор набора для поиска » выше. Введите таксон, например E . coli , в поле и отметьте Исключить . Если вы хотите исключить более одного вида, щелкните значок «плюс» справа от Исключить , чтобы добавить еще одно поле. Вы можете исключить до 20 видов.

2. При попытке вернуться к списку совпадений может появиться страница с надписью « Как неловко! Ошибка: -400 Отсутствует кэш.”Щелкните круговую стрелку рядом с кнопкой Добавить в выравнивание . Вы будете отправлены на главную страницу BLAST, но не отчаивайтесь. Вверху справа на этой странице находится раздел Your Recent Results . Верхняя ссылка в списке — это ваш последний поисковый запрос. Просто щелкните эту ссылку, чтобы вернуться к своим результатам.

После добавления всех желаемых последовательностей просто закройте окно браузера MEGA5.

В окне редактора выравнивания сохраните выравнивание, выбрав Сохранить сеанс в меню Данные .Мне нравится использовать такое имя, как Myfile_unaligned, просто чтобы напомнить себе, что последовательности не выровнены. Файл будет иметь расширение .mas.

Шаг 1.5: Альтернативы MEGA5 для идентификации и получения последовательностей

Шаг 1.51 . Вы можете получить доступ к NCBI BLAST через любой поддерживаемый NCBI веб-браузер по адресу http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi. В разделе Basic BLAST щелкните ссылку nucleotide blast или protein blast , чтобы перейти на страницу, идентичную описанной ранее.Все то же самое, что и при использовании браузера MEGA5, за исключением того, что вы не можете щелкнуть удобную кнопку, чтобы добавить последовательности в редактор выравнивания.

Шаг 1.52 . Откройте новый файл в текстовом редакторе. Вы можете использовать встроенный текстовый редактор MEGA5, выбрав Редактировать текстовый файл в меню Файл. Этот редактор имеет несколько функций для редактирования молекулярных последовательностей, включая обратное дополнение и преобразование в несколько распространенных форматов, включая Fasta. Или используйте Блокнот для Windows или TextWrangler для Mac (http: // www.barebones.com/products/textwrangler/). Сохраните файл с осмысленным именем с расширением .fasta, например, myfile.fasta. Не используйте , а не , используйте Microsoft Word, Word Pad, TextEdit (Mac) или другой текстовый редактор!

Шаг 1.53 . После того, как вы определили последовательность, которую хотите добавить, и щелкнули ссылку, чтобы перейти на страницу этого файла последовательности, при необходимости настройте область отображения и настройте вид. Обратите внимание на ссылку Display Settings в верхнем левом углу страницы.Значение по умолчанию — GenBank (полный). Измените это на Fasta (текст) , выделите все, скопируйте и вставьте в файл текстового редактора. При добавлении последовательностей в файл удобно, но не обязательно, оставлять пустые строки между последовательностями.

Идентификация и получение последовательностей обсуждается более подробно в главе 3 книги Phylogenetic Trees Made Easy , 4-е издание (PTME4) (Hall 2011).

В следующем разделе объясняется, как импортировать эти последовательности в редактор выравнивания MEGA5.

Шаг 2: Выравнивание последовательностей

Если окно Alignment Explorer еще не открыто, в главном окне MEGA5 выберите Open a File / Session из меню File. Выберите файл выравнивания MEGA5 (.mas) или файл последовательности (.fasta), который вы сохранили на шаге 1. В появившемся диалоговом окне выберите Align .

Обозреватель выравнивания показывает слева имя каждой последовательности, за которым следует последовательность с окрашенными остатками.Обычно имя очень длинное. Это имя в конечном итоге появится на дереве, и длинные имена, как правило, нежелательны. Это время для редактирования этих имен, фактически это единственный практический момент для редактирования имен, так что не упускайте возможность. Просто дважды щелкните каждое имя и измените его на более подходящее.

Если ваша последовательность — ДНК, вы увидите две вкладки: ДНК-последовательности и Транслированные белковые последовательности . Вкладка «Последовательности ДНК» выбрана по умолчанию.Щелкните вкладку Translated Protein Sequences, чтобы увидеть соответствующую последовательность белка.

Шаг 2.1

Пришло время выровнять последовательности. Предлагаются два метода выравнивания: ClustalW (Thompson et al. 1994) и MUSCLE (Edgar 2004a, 2004b). Любой из них может быть использован, но в целом МЫШЦЫ предпочтительнее. На панели инструментов в верхней части окна выравнивание Clustal символизируется кнопкой W , а MUSCLE — рукой со сжатым кулаком, чтобы «показать мышцу».Нажмите одну из этих кнопок или выберите Clustal или Muscle в меню Alignment . Если ваша последовательность ДНК, вы увидите два варианта: Align DNA и Align Codons . Если ваша последовательность является кодирующей последовательностью ДНК, очень важно выбрать Align Codons . Это обеспечит выравнивание последовательностей по кодонам, что является гораздо более реалистичным подходом, чем прямое выравнивание последовательностей ДНК, потому что это позволяет избежать появления пробелов в положениях, которые могут привести к сдвигу рамки считывания в реальных последовательностях.

Шаг 2.2

При выборе метода выравнивания открывается окно настроек этого метода. Для МЫШЦ я рекомендую принять настройки по умолчанию. Для ClustalW настройки по умолчанию подходят для ДНК, но для белков я рекомендую изменить штраф за раскрытие зазора множественного выравнивания на 3 и штраф за расширение зазора множественного выравнивания на 1,8.

Шаг 2.3

Нажмите кнопку ОК , чтобы начать процесс выравнивания.В зависимости от количества задействованных последовательностей и выбранного вами метода выравнивание может занять от нескольких секунд до нескольких часов. После завершения выравнивания Сохраните сеанс. Мне нравится сохранять выровненные последовательности под другим именем, поэтому, если бы мой исходный файл был Myfile_unaligned.mas, я бы сохранил выровненную последовательность как Myfile.mas.

Шаг 2.4

MEGA5 не может использовать файл .mas напрямую для оценки филогенетического дерева, поэтому вы также должны выбрать Export Alignment из меню Data и экспортировать файл в формате MEGA5, где он получит расширение.расширение мег. Вам будет предложено ввести заголовок для данных. Вы можете оставить заголовок пустым, если хотите, но полезно добавить какой-нибудь заголовок, который будет иметь для вас значение. Если это выравнивание последовательностей ДНК, вас также спросят, являются ли они кодирующими последовательностями.

Выравнивание более подробно обсуждается в главе 4 PTME4 (Hall 2011).

Шаг 2.5: Альтернатива согласованию с MEGA5

После завершения выравнивания вы увидите, что в последовательности были введены пробелы.Эти пробелы представляют собой исторические вставки или делеции, и их цель — привести гомологичные сайты в соответствие в одном столбце. Следует понимать, что так же, как филогенетическое дерево является «оценкой» отношений между последовательностями, выравнивание — это просто оценка положений исторических вставок и делеций. Качество выравнивания может повлиять на качество филогенетического дерева, но MEGA5 не дает возможности судить о качестве выравнивания. Интернет-программа Guidance (http: // guide.tau.ac.il/) предоставляет пять различных методов выравнивания, но, что более важно, он оценивает качество выравнивания и идентифицирует области и последовательности, которые способствуют снижению качества выравнивания. Обсуждение Руководства (Penn et al. 2010) выходит за рамки данной статьи, но эта тема подробно освещена в главе 12 PTME4 (Hall 2011).

Руководство требует, чтобы невыровненные последовательности были предоставлены в файле в формате Fasta. См. Hall (2011) для подробного описания формата Fasta.Если вы загрузили последовательности через свой любимый веб-браузер и сохранили их как файл .fasta, этот файл можно использовать в качестве входных данных для Guidance . Если вы использовали MEGA5 для загрузки последовательностей в Alignment Explorer, вы можете экспортировать невыровненные последовательности в формате FASTA, выбрав Экспорт выравнивания в меню Data , а затем выбрав формат FASTA . Если вы забыли сохранить невыровненные последовательности, вы можете выбрать все последовательности (Control-A), затем выбрать Удалить пробелы в меню Редактировать , прежде чем экспортировать последовательности в формат FASTA.

Шаг 3: оценка дерева

Существует несколько широко используемых методов оценки филогенетических деревьев (соединение соседей, максимальная экономия UPGMA, байесовский вывод и максимальное правдоподобие [ML]), но в этой статье будет рассмотрен только один: ML.

Шаг 3.1

В главном окне MEGA5 выберите Открыть файл / сеанс из меню Файл и откройте файл .meg, который вы сохранили на шаге 2.

Шаг 3.2

ML использует множество моделей замещения для корректировки множественных изменений в одном и том же месте в течение эволюционной истории последовательностей. Количество моделей и их вариантов может быть совершенно непонятным, но MEGA5 предоставляет функцию, которая позволяет выбрать лучшую модель для вас. В меню Models выберите Find Best DNA / Protein Models (ML)… . Появится диалоговое окно настроек, но вы можете принять настройки по умолчанию. Нажмите кнопку Compute , чтобы начать запуск.Модели могут занять некоторое время, чтобы рассмотреть все доступные модели, но индикатор выполнения показывает, как идут дела.

По завершении появится окно со списком моделей в порядке предпочтения. Отметьте предпочтительную модель, затем оцените дерево, используя эту модель. Для приведенных ниже примеров модель WAG + G + I была лучшей.

Шаг 3.3

В меню Филогения выберите Построить / проверить дерево максимального правдоподобия… . Появится диалоговое окно настроек, аналогичное показанному на рисунке 1.

Рис. 1.

Рис. 1.

Желтые области — это параметры, которые вы можете изменять. Вам нужно иметь дело только с тремя параметрами: 1) Модель / метод , 2) Скорость между сайтами и 3) Обработка пробелов / отсутствующих данных . Щелкните в правом конце желтой области, чтобы открыть раскрывающееся меню.

• Для модели / метода будет выбрана модель WAG.

• Для ставок среди сайтов будет выбрана гамма, распределенная с неизменяемыми сайтами (G + I).Вместе с выбранными выше моделями / методами это соответствует лучшей модели, найденной функцией Models.

Пробелы / Обработка отсутствующих данных определяет, как обрабатываются пробелы. Полное удаление означает, что MEGA5 игнорирует все столбцы, в любой последовательности которых есть пробелы. Если не будет очень мало пробелов, этот вариант может потерять много информации, потому что он исключает рассмотрение большого количества сайтов. Я предпочитаю опцию Partial Deletion , при которой сайты с отсутствующими данными удаляются только по мере необходимости, потому что эта опция сохраняет больше информации.

Когда настройки установлены, нажмите кнопку вычисления, чтобы вычислить дерево. В конце концов, откроется окно проводника дерева, которое отображает дерево (рис. 2).

Рис. 2.

Рис. 2.

Шаг 3,4

Важно сохранить дерево, чтобы его можно было изменить позже при необходимости. Сохраните дерево из меню «Файл». Файл будет иметь расширение .mts.

Вы также можете экспортировать дерево для ввода в другие программы рисования дерева (см. Шаг 4).В меню File выберите Export Current Tree (Newick) .

Шаг 3.5: Оценка надежности дерева

Дерево, которое вы оценили, почти наверняка не отражает исторических отношений между таксонами и их предками. Вместо этого это оценка этих отношений. Как и в случае с любой оценкой, желательно знать ее надежность. Наиболее распространенный способ оценки надежности филогенетического дерева — метод bootstrap .Подробное описание метода начальной загрузки выходит за рамки этого протокола, но этот метод более подробно обсуждается на страницах 82–88 в Hall (2011).

Чтобы выполнить тест начальной загрузки, вернитесь в диалоговое окно «Параметры анализа», показанное на рисунке 1. В разделе «Тест филогении » установите для параметра «Тест филогении» значение «Метод начальной загрузки», затем установите для параметра Число репликатов начальной загрузки целое число от 100 до 2000. Чем выше число, тем больше времени потребуется на выполнение теста. Щелкните вычислить. Окно с индикатором выполнения показывает, как продвигается анализ.Когда анализ будет завершен, появится дерево с номерами на каждом узле. Эти числа, проценты начальной загрузки, указывают на надежность кластера, происходящего от этого узла; чем выше число, тем надежнее оценка таксонов, происходящих от этого узла. В общем, мы не относимся серьезно к узлам с надежностью <70%. Тест начальной загрузки не оценивает общую надежность дерева; вместо этого он оценивает надежность каждого узла. Это на самом деле выгодно, потому что говорит вам, каким частям дерева вам следует доверять, а к каким - не стоит относиться серьезно.

Шаг 3.6: Альтернативы MEGA5 для оценки дерева

PhyML (http://www.atgc-montpellier.fr/phyml/binaries.php) (Guindon et al. 2010) — еще одна программа, которая оценивает деревья машинного обучения, и ее также можно использовать в Интернете http: // www. .atgc-montpellier.fr / phyml /. SeaView (http://pbil.univ-lyon1.fr/software/seaview.html) (Gouy et al. 2010) — еще одна многоцелевая программа, которая выравнивает последовательности, оценивает деревья несколькими методами и рисует деревья.

Шаг 4. Представьте дерево

Рисунок филогенетического дерева передает много информации, как явной, так и неявной.Часть этой неявной информации может вводить в заблуждение, поэтому следователь должен убедиться, что переданная информация, как явная, так и неявная, является правильной.

Филогенетическое дерево состоит из внешних узлов (кончиков), которые представляют фактические последовательности, существующие сегодня, внутренних узлов, которые представляют гипотетических предков, и ветвей, которые соединяют узлы друг с другом. Длины ветвей представляют собой количество изменений, которые, по оценкам, произошли между парой узлов.Это явная информация, передаваемая чертежом дерева. Дерево на рисунке 2 имеет формат «прямоугольной филограммы», в котором внутренние узлы представлены вертикальными линиями.

На рисунке 2 крайний левый узел, по-видимому, представляет корень, общего предка, от которого произошли все последовательности. Эта неявная информация неверна и вводит в заблуждение. Фактически, метод ML, как и методы Neighbor Joining, Parsimony и Bayesian Inference, неспособен определить корень дерева; все эти методы оценивают неукорененных деревьев.

Шаг 4.1

Формат Radiation или без корня , показанный на рисунке 3, — лучший способ нарисовать дерево без корня, потому что он не позволяет зрителю предположить, что корень неизвестен. Чтобы отобразить дерево в формате Radiation, в окне Tree Explorer выберите Tree / Branch Style из меню View , затем выберите Radiation из подменю. Поскольку формат Radiation неизвестен многим читателям, часто публикуется формат прямоугольной филограммы по умолчанию, несмотря на то, что он ошибочно подразумевает корневое дерево.Укоренившееся дерево задает направление эволюционному процессу с порядком спуска от корня к кончикам. Предположение о такой направленности может легко привести к неверным предположениям об эволюционной истории этих последовательностей. Чтобы избежать неоправданного значения направленности, важно указать в легенде рисунка или в тексте, что дерево не имеет корней.

Рис. 3.

МЛ в радиационном (некорневом) формате.

Рис.3.

мл в радиационном (некорневом) формате.

Шаг 4.2

Часто мы хотим представить корневое дерево, чтобы сделать выводы, которые зависят от порядка спуска. Для этого нам нужна дополнительная информация о последовательностях, информация, внешняя по отношению к самим последовательностям, то есть внешняя группа . Внешняя группа — это последовательность, которая более отдаленно связана с остальными (внутригрупповыми) последовательностями, чем они друг с другом. Мы не можем вывести внешнюю группу из самого дерева, поэтому обратимся к другой информации.Для последовательностей на рисунке 2 мы знаем, что Pseudomonas aeruginosa принадлежит порядку Pseudomonadales , , тогда как остальные организмы принадлежат порядку Oceanospirillales , оба из класса Gammaproteobacteria. Таким образом, P . aeruginosa является законной аутгруппой для остальных последовательностей.

Шаг 4.21.

Мы можем укоренить дерево на P . aeruginosa с помощью инструмента укоренения, который находится на боковой панели окна Tree Explorer (рис.3). В представлении «Прямоугольная филограмма» или в представлении «Излучение», когда выбран инструмент укоренения, щелкните ветвь, ведущую к P . aeruginosa , чтобы укоренить дерево в такой последовательности, как показано на рисунке 4.

Рис. 4. Дерево

ML, укорененное на Pseudomonas aeruginosa .

Рис. 4. Дерево

ML, укорененное на Pseudomonas aeruginosa .

Корневое дерево на рисунке 4 теперь правильно указывает направление развития этих последовательностей.Когда дерево публикуется, важно указать, что дерево было основано на P . Ашхабад .

Шаг 4.3

MEGA5 предоставляет множество инструментов для управления внешним видом дерева. Я уже упоминал форматы «Прямоугольная филограмма» и «Радиация». Хотя эти форматы кажутся очень разными, это рисунки одного и того же дерева. В обоих случаях рисуются ветви, так что длины линий пропорциональны длинам ветвей.Эти форматы делают очевидным, что между Hahella chejuensis KCTC 2396 и Oceanospirillum sp. Произошло гораздо больше изменений. MED292 a , чем было между Halomonas boliviensis LC1 и Halomonas sp. HAL1.

Шаг 4.4

Кладограмма или Только топология в формате — еще один важный формат. Выберите Topology only из меню View , чтобы увидеть нарисованное дерево, так что длины ответвлений не связаны с длинами ответвлений.Зачем вообще нужно удалять эту информацию из рисунка? В некоторых деревьях есть узлы, разделенные очень короткими ветвями, тогда как другие — очень длинными ветвями. Когда ветви слишком короткие, может быть невозможно увидеть порядок ветвления или топологию. Формат «Только топология» позволяет увидеть порядок ветвления всего дерева.

Шаг 4.4.1.

Но как насчет этих длин ветвей? Неужели мы действительно хотим потерять эту информацию? Нет, мы не делаем, поэтому мы можем просто пометить ветви длиной их ответвлений.Для этого выберите Показать / Скрыть в меню Просмотр и выберите Длины ответвлений из подменю.

Шаг 4.5: Публикация дерева

Несмотря на то, что вы можете распечатать дерево для собственных целей, чтобы опубликовать его, вы должны сохранить его в формате графического файла, приемлемом для журнала. Формат переносимых документов (PDF) является практически универсальным. Выберите Сохранить как файл PDF в меню Изображение .

Возможно, вы захотите манипулировать рисунком способами, которые MEGA5 не предоставляет: выделение жирным шрифтом некоторых имен последовательностей, чтобы привлечь к ним внимание, добавление стрелки и т. Д.Такие манипуляции производятся с помощью программы для рисования графики. Большинство программ для рисования принимают файлы в формате PDF, но если они этого не делают, MEGA5 также позволяет сохранять изображения в форматах PNG и расширенных мета-файлов.

Шаг 4.6: Альтернативы рисованию деревьев в MEGA5

Программа рисования дерева FigTree (http://tree.bio.ed.ac.uk/software/figtree/) — это полнофункциональная программа, которая предлагает многие возможности системы MEGA5 и многие другие возможности.Он доступен для операционных систем Windows и Mac в виде исполняемого файла Java, который будет работать в любой ОС, включая Linux. Чтобы импортировать дерево в FigTree, экспортируйте его как файл Newick, как описано в шаге 3.

Использование MEGA5 на компьютерах Macintosh

Диалоги Сохранить и Открыть похожи на Windows и могут быть незнакомы пользователям Mac. Документ с подробным описанием навигации в MEGA 5 для Mac можно загрузить с http://bellinghamresearchinstitute.com/NavigatingMEGA5/index.html.

Некоторые пользователи Macintosh сообщали о проблемах с запуском MEGA5 для Mac на своих машинах; однако они не должны обходиться без MEGA5. Существует несколько программ «виртуальных машин», таких как Parallels (http://www.parallels.com/products/desktop/) и VMFusion (http://www.vmware.com/products/fusion/overview.html), которые будут разрешить Macintosh запускать операционную систему Windows. Им обоим необходимо купить копию Windows и установить ее на виртуальную машину, но как только это будет сделано и MEGA5 для Windows будет установлен на этой виртуальной машине, MEGA5 станет таким же удобным и простым в использовании, как и на выделенном компьютере с Windows.Вдобавок пользователь получает доступ ко всему миру программ Windows, некоторые из которых на самом деле не хуже программ Macintosh.

Список литературы

Gapped BLAST и PSI-BLAST: новое поколение программ поиска в базе данных белков

Nucleic Acid Res.

1997

25

3389

3402

MUSCLE: метод множественного выравнивания последовательностей с уменьшенной временной и пространственной сложностью

BMC Bioinformatics

2004a

5

113

MUSCLE: множественное выравнивание последовательностей с высокой точностью и высокой пропускной способностью.

Nucleic Acids Res.

2004b

32

1792

1797

Выведение филогении

2004

Сандерленд (Массачусетс)

Sinauer Associates

SeaView версия 4: мультиплатформенный графический интерфейс пользователя для выравнивания последовательностей и построения филогенетического дерева

Mol Biol Evol.

2010

27

221

224

Новые алгоритмы и методы оценки филогении максимального правдоподобия: оценка производительности PhyML 3.0

Syst Biol.

2010

59

307

321

Филогенетические деревья стали проще: практическое руководство

2011

Сандерленд (Массачусетс)

Sinauer Associates

Филогенетический анализ как инструмент молекулярной эпидемиологии инфекционных болезней

Ann Epidemiol.

2006

16

157

169

Эволюция и биохимия гликозидаз семейства 4: значение для определения функции фермента в аннотациях последовательностей

Mol Biol Evol.

2009

26

2487

2497

Молекулярная эволюция и филогенетика

2000

Нью-Йорк

Oxford University Press

УКАЗАНИЕ: веб-сервер для оценки достоверности выравнивания

Nucleic Acids Res.

2010

38

Выпуск веб-сервера

W23

W28

MEGA5: молекулярно-эволюционный генетический анализ с использованием методов максимального правдоподобия, эволюционного расстояния и максимальной экономии

Mol Biol Evol.

2011

28

2731

2739

CLUSTAL W: повышение чувствительности последовательного множественного выравнивания последовательностей за счет взвешивания последовательностей, штрафов за пропуски в зависимости от положения и выбора весовой матрицы.

Nucleic Acids Res.

1994

22

4673

4680

Заметки автора

© Автор, 2013. Опубликовано Oxford University Press от имени Общества молекулярной биологии и эволюции.Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected].

Производство 30-дюймовых графеновых пленок для прозрачных электродов с рулона на рулон

Mazda CX-3 против CX-30 против CX-5: в чем разница?

По мере роста популярности внедорожников Mazda продолжала расширять свой модельный ряд, чтобы удовлетворить потребности своих клиентов. Mazda CX-3 играет роль субкомпактного внедорожника и предназначена для тех, кто хочет немного более высокую езду, чем автомобиль, и, при необходимости, полный привод.CX-30 предлагает немного больше места и больше мощности, в то время как CX-5 лучше всего подходит для семей, играя важную роль в компактном пространстве. Помимо позиционирования в разных сегментах, каждая модель привносит в стол что-то уникальное — будь то стиль, практичность или больше места. Давайте посмотрим, как они сравниваются.

Mazda CX-3 против CX-30 против CX-5: размеры

CX-3 лучше всего подходит, если вы живете в городе с ограниченными парковочными местами или уличной парковкой.При длине 168,3 дюйма CX-3 на самом деле меньше, чем обновленная Mazda3. Это означает, что вы получаете кабину меньшего размера, но это может не иметь большого значения, если вы не собираетесь часто собираться в компании. С 35-дюймовым пространством для ног на задних сиденьях любой взрослый будет чувствовать себя напряженно. Переднее место для ног приличное, 41,7 дюйма.

Те, кто хочет взять с собой в поездку больше друзей или родственников, смогут сделать это на CX-30. Новейший внедорожник Mazda отличается красивым стилем и изысканным интерьером, а также оказался хорошим предложением для тех, кто считает CX-3 слишком маленьким и не хочет чего-то такого большого, как CX-5.Этот «твинер» имеет длину 173 дюйма, что означает больше внутреннего пространства для груза и пассажиров. У тех, кто путешествует на задних сиденьях, будет 36,3 дюйма, а у тех, кто на переднем сиденье, будет такое же пространство для ног, как в CX-3: 41,7 дюйма.

Mazda CX-5 — это не только отличный семейный внедорожник, но и фантастический внешний вид и роскошный салон. Внутри CX-5 просторен для пассажиров и их снаряжения. С 39,6 дюймами пространства для ног тех, кто сидит сзади, CX-5 предлагает просторный второй ряд; те, кто впереди, получают 41.0 дюймов.

Посмотрите в таблице ниже другие размеры.

Mazda CX-3 против CX-30 против CX-5: варианты двигателя

Широкий ассортимент внедорожников означает, что Mazda имеет обширную линейку двигателей. Как самый маленький кроссовер, CX-3 оснащен 2,0-литровым четырехцилиндровым двигателем без наддува, который развивает 148 л.с. и 146 Нм крутящего момента. В прошлый раз, когда мы ездили на нем, мы остались довольны тем, как работает CX-3, поскольку он демонстрирует спортивную езду. 2,0-литровый двигатель работает в паре с шестиступенчатой ​​автоматической коробкой передач, которая может передавать всю мощность на передние или все четыре колеса, если он оснащен полным приводом.

Mazda CX-30 доступна только с одним двигателем: 2,5-литровым, мощностью 186 л.с. и 186 фунт-фут в сочетании с шестиступенчатой ​​автоматической коробкой передач. Как и у большинства CX-30, двигатель используется совместно с Mazda3, и во время нашего первого теста он разгонялся до 100 км / ч за 7,8 секунды. Хотя это не лучший вариант, но и не так уж и плохо. В дороге CX-30 чувствует себя реактивным и маневренным, но мы отметили его расслабленную подачу мощности.

CX-5, самая популярная на сегодняшний день Mazda, имеет несколько вариантов двигателя.Базовым движителем является тот же 2,5-литровый атмосферный двигатель, что и в CX-30, но здесь он развивает 187 л.с. и 186 фунт-фут крутящего момента. Если вам нужна большая мощность, 2,5-литровый четырехцилиндровый двигатель с турбонаддувом выдает 227 л.с. и 310 фунт-фут, что делает его самым мощным двигателем, доступным в CX-5. Мощность увеличивается до 250, если использовать 93-октановый бензин. Модели Signature также могут модернизироваться до 2,2-литрового турбодизельного двигателя, который производит 168 л.с. и 290 фунт-футов. Дизельный двигатель может показаться привлекательным, но он самый медленный в модельном ряду — 9.0 секунд, чтобы разогнаться до 60 миль в час.

Mazda CX-3 vs.CX-30 против CX-5: диапазон цен

Mazda CX-3 2020 года имеет стартовую цену 21 740 долларов США и стандартно поставляется с функциями безопасности i-Activesense, а также Apple CarPlay, Android Auto и автоматическим климат-контролем. . Также в стандартную комплектацию входят функции безопасности Mazda i-Activesense, которые включают радарный круиз-контроль с функцией остановки и движения, интеллектуальную поддержку тормозов с обнаружением пешеходов и предупреждением о столкновении, предупреждение о выезде с полосы движения и управление дальним светом. Внутри CX-3 оснащен 7,0-дюймовым сенсорным экраном с информационно-развлекательной системой Mazda Connect, которой также можно управлять с помощью поворотной ручки на центральной консоли.CX-3 2020 доступен только в спортивной комплектации, и здесь нет доступных опций (кроме полного привода и ряда аксессуаров).

С другой стороны, CX-30 доступен в четырех различных комплектациях — или, как говорят Mazda, пакетах: базовый, Select, Preferred и Premium. Базовая комплектация начинается с 23 000 долларов, а комплектация Premium начинается с 29 300 долларов. Полный привод является дополнительным для всех комплектаций. Стандартное оборудование включает 8,8-дюймовый дисплей с информационно-развлекательной системой Mazda Connect, два порта USB и комплект безопасности i-Activesense.Тем, кто хочет Apple CarPlay и Android Auto, придется перейти на отделку Select, и они также получат задние вентиляционные отверстия и 18-дюймовые колеса вместо 16-ти. Отделка Preferred добавляет сиденья с подогревом, аудиосистему премиум-класса Bose с 12 динамиками и глянцевую решетку радиатора. Наконец, пакет Premium добавляет цветной проекционный дисплей, адаптивное освещение, кожаные сиденья и подрулевые переключатели.

CX-5 стоит от 26 290 долларов за комплектацию Sport, которая добавляет 187-сильный двигатель, кнопочный пуск и комплект безопасности i-Activesense.В комплектацию Touring (27 930 долларов) добавлены сиденья из кожзаменителя Apple CarPlay и Android Auto, а также аудиосистема с шестью динамиками. Обновление до Grand Touring, стоимость которого начинается с 31 410 долларов, означает, что вы получите 19-дюймовые колеса, светодиодные дневные ходовые огни и противотуманные фары, дверь багажного отделения с электроприводом и кожаные сиденья. Grand Touring Reserve (36 235 долларов) — это следующий вариант отделки, и он доступен только с полным приводом и 2,5-литровым двигателем с турбонаддувом. Помимо обновления трансмиссии, вы также получите вентилируемые передние сиденья, передние и задние сиденья с подогревом и боковые зеркала с автоматическим складыванием.Наконец, верхняя отделка CX-5 — это Signature, которая начинается с 38 255 долларов и добавляет систему навигации, кожаные сиденья Nappa, деревянную отделку по всей кабине и систему камеры с обзором на 360 градусов.

Mazda CX-3 против CX-30 против CX-5: Безопасность

Хотя CX-30 не получил высшей награды, он получил награду Top Safety Pick, которая все еще остается замечательный.